conceitos basicos de microgiologia
DESCRIPTION
Introdução a Microbiologia AplicadaTRANSCRIPT
![Page 1: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/1.jpg)
Principais conceitos e técnicas
utilizados na microbiologia
Aluno: Ivson Cassiano de O. Santos
2012
LAQB
Laboratório de Analises
Químicas e Biológicas
![Page 2: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/2.jpg)
INTRODUÇÃO
A Microbiologia é o ramo da biologia que estuda os
microrganismos, incluindo eucariontes unicelulares e
procariontes, que incluem Bactérias, Fungos, Vírus,
Protozoários, Algas unicelulares, Viróides e Prions.
A Bacteriologia é uma ciência, ramo da Biologia, que
estuda as bactérias e suas propriedades.
![Page 3: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/3.jpg)
ambiente apropriado
instrumentais estéreis
luvas, máscaras e óculos protetores
Flambar as alças e agulhas e boca dos tubos.
limpar e desinfetar periodicamente a bancada.
Todas as operações envolvendo manipulação de culturas e
meios de cultura deverão ser efetuadas na área de proteção
conferida pela chama do bico de Bunsen.
CONDUTAS, BARREIRAS, EQUIPAMENTOS E
INSTRUMENTAIS DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL E AMBIENTAL
![Page 4: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/4.jpg)
ÁLCOOL 70%
Sua atividade ocorre pela desnaturação de proteínas e remoção de
lipídios, inclusive dos envelopes de alguns vírus. Para apresentar
sua atividade germicida máxima, o álcool deve ser diluído em
água, que possibilita a desnaturação das proteínas. A concentração
recomendada para atingir maior rapidez microbicida com o álcool
etílico é de 70% em peso e com o isopropílico, entre 60 e 95%.
Possuir fácil aplicabilidade, baixo custo e reduzida toxicidade.
Diluição correta e tempo de exposição
![Page 5: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/5.jpg)
CUIDADOS DE ASSEPSIA NA REMOÇÃO DE BACTÉRIAS
![Page 6: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/6.jpg)
CUIDADOS DE ASSEPSIA NA REMOÇÃO DE BACTÉRIAS
Fig.: Procedimento para remover bactérias de um caldo com a
alça de platina
![Page 7: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/7.jpg)
CUIDADOS DE ASSEPSIA NA REMOÇÃO DE BACTÉRIAS
Fig.: Procedimento para inocular um meio Agar inclinado a partir de
uma Placa de Petri
![Page 8: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/8.jpg)
INOCULAÇÃO NA PLACA DE PETRI
Estrias múltiplas ou
esgotamento
Isolamento de colônias
bacterianas e obtenção
culturas puras.
![Page 9: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/9.jpg)
DESCONTAMINAÇÃO
Um dos principais problemas nos laboratórios de microbiologia é a grande
quantidade de resíduos contendo microrganismos infecciosos.
Autoclaves
Desinfecção química
Os recipientes que acondicionam material com perigos microbiológicos
devem conter um desinfetante na diluição de uso apropriada.
Compostos à base de fenol 5% , hipocloritos (água sanitária a 2%) e
glutaraldeído 2%, formaldeído (solução alcoólica 8% e solução aquosa
10%).
![Page 10: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/10.jpg)
BANCO DE DADOS
O nosso laboratório dispõe de uma tabela com as bactérias presentes
em estoque com suas devidas informações e observações.
Bactéria Cepa/numero Origem Espécie
Condições de crescimento Incubação Condições de estoque
Ultima data de estoque Observações
![Page 11: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/11.jpg)
INTRODUÇÃO
Cepas bacterianas
Isto deriva dos fenômenos espontâneas ou
induzidos da natureza ou mesmo
artificialmente, chamado "Mutação Genética"
![Page 12: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/12.jpg)
CEPAS PADRÃO
São cepas destinadas ao controle de qualidade
bacteriológico.
Apresentam resposta conhecida a uma série de
provas laboratoriais, entre as quais bioquimismo,
reação tintorial ao Gram, morfologia e resposta a
antibióticos.
ATCC AYE SDF
ACICU AB
![Page 13: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/13.jpg)
CEPAS LAQB
Cepas ATCC - American Type Culture
Collection.
Escherichia coli ATCC 10536
![Page 14: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/14.jpg)
ESCHERICHIA COLI ATCC 10536
Referencia para esta cepa :
Di Modugno E et al. 1994
Misiek et al. 1973.
![Page 15: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/15.jpg)
STAPHYLOCOCCUS AUREUS ATCC 8096
![Page 16: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/16.jpg)
PSEUDOMONAS AERUGINOSA ATCC 9027
![Page 17: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/17.jpg)
MICROCOCCUS LUTEUS ATCC 10240
ATCC 14452
![Page 18: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/18.jpg)
MEIO DE CULTURA
Conjunto de substâncias, formuladas de maneira adequada,
capazes de promover o crescimento bacteriano, em condições laboratoriais. Para isso um meio de cultura necessita conter características básicas, que incluem:
- Fonte de carbono e nitrogênio
- Fonte de energia
- Sais minerais
- Fatores de crescimento
- Condições físicas
- Esterilização
![Page 19: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/19.jpg)
TIPOS DE MEIOS DE CULTURA
Meios de enriquecimentos
Caldo Brain Heart Infusion (BHI)
Caldo Tetrationato
Meios de transporte
Meio de Stuart
Meio de Cary-Blair
Caldo Tioglicolato
o Meio seletivo
Agar Manitol Salgado
Agar SS
![Page 20: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/20.jpg)
TIPOS DE MEIOS DE CULTURA
Meio diferencial
Agar Eosin Meteiolene Blue (EMB)
Agar McConkey
Agar Hektoen.
Meio indicador
Agar Triple Sugar Iron (TSI)
Agar Citrato de simimons.
![Page 21: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/21.jpg)
PROCEDIMENTOS E CUIDADOS NA PREPARAÇÃO
DE MEIOS DE CULTURA
Na preparação de um meio, deve-se adicionar uma pequena
quantidade de água até que o meio fique úmido e então completar
com o resto de água homogeneizando a solução.
O tempo de esterilização em autoclave é de 15 minutos á
temperatura de 121°C.
Os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas,
para que a esterilização seja por igual em todo o conteúdo dos
tubos - tampas fechadas não permitem a entrada do vapor.
![Page 22: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/22.jpg)
Todos os meios confeccionados
devem ser devidamente
identificados com o nome do
meio e do responsável, data de
fabricação, data de validade e
tipo de armazenamento.
![Page 23: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/23.jpg)
MANUTENÇÃO DE CULTURAS
A manutenção de culturas é realizada para que
se possa manter viável as cepas em estoque.
De acordo com a cepa a concentração de glicerol
pode variar.
Ex.: E. coli 50% glicerol e 50% Ágar Nutriente.
Prazo de validade: 3 meses á -20°C.
![Page 24: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/24.jpg)
PLANO DE TRABALHO LAQB - 2012
Objetivo: Fazer o levantamento de cepas atualmente encontradas no
LAQB e preparar o mesmo para aquisição de outras.
Método:
1°- Inoculado as amostras em meio enriquecido para proporcionar o
crescimento das amostras. O meio de enriquecimento escolhido foi o
caldo BHI, após a semeadura , incubar por 24h á 37ºC.
Resultados: POSITIVO para turvação no meio.
NEGATIVO para coloração intacta do meio.
2° - De acordo com os resultados obtidos na etapa 1, será semeado as
amostras de acordo com o meio seletivo de cada espécie.
Staphylococcus aureus = manitol
E. coli = EMB
Pseudomonas areuginosa = agar Pseudomonas
Micrococcus luteus = MH
![Page 25: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/25.jpg)
Análise do crescimento bacteriano (morfologia e coloração)
Método:
O Manitol é fermentado pelo Staphylococcus Aureus,
mas não pela maioria dos Staphylococcus; o Sal inibe o
crescimento da maioria dos microrganismos, mas o
Staphylococcus Aureus.
Meio Manitol salgado para
Staphylococcus Aureus.
Meio EMB (Eosine Methylene
Blye) para E. coli
O meio EMB, o azul de Eosina e Metileno
inibem o crescimento de Gram positivas. E. coli
apresentam colônias escuras ou verde metalico,
fermentação da lactose e sacarose.
![Page 26: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/26.jpg)
Análise do crescimento bacteriano (morfologia e coloração)
Meio Agar Pseudomonas.
Permite a diferenciação de P. aeroginosa de outras
Pseudomonas. As P. aeroginosa apresentam
pigmento azul-verde escuro que se funde ao meio.
Micrococcus luteus em meio MH
M. luteus apresentam pigmentação amarela
tanto em meio AN, quanto em MH.
Método:
![Page 27: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/27.jpg)
3° - Ressemear, por esgotamento, todas as amostras crescidas
e isoladas em meio agar nutriente 24h 37°C
Método:
Meio Agar Nutriente
4° - Teste bioquímico
A investigação das atividades metabólicas das bactérias “in vitro” é chamada de
Provas Bioquímicas e servem para auxiliar o microbiologista a identificar grupos ou
espécies de bactérias
![Page 28: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/28.jpg)
4° - Teste bioquímico
Meio TSI, meio SIM, meio citrato de Simons, Meio úreia.
5° - Preparo para estoque
Semear em placa, com swab, as amostras cultivadas no caldo
6° - Estoque
NEXT
Método:
![Page 29: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/29.jpg)
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
APOSTILA DE AULAS PRÁTICAS – DISCIPLINA:
BACTERIOLOGIA. PROFESSOR ALOYSIO
CERQUEIRA, UFF.
Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos
Exames Microbiológicos – ANVISA.
Protocolos para Preparo de Meios de Cultura da
Embrapa Agrobiologia, 1999.
Biossegurança em Laboratórios Biomédicos de
Microbiologia - 3.a edicao, 2006.
![Page 30: Conceitos Basicos de Microgiologia](https://reader036.vdocuments.mx/reader036/viewer/2022081800/55792260d8b42a9c578b4b7e/html5/thumbnails/30.jpg)