coloracion de especiales ii uap

COLORACIONES ESPECIALES II

LIC. T.M. RICARDO A. SANTOS SALCEDO

UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS - FILIAL CUSCOUNIVERSIDAD ALAS PERUANAS - FILIAL CUSCO FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE TECNOLOGIA MEDICAESCUELA DE TECNOLOGIA MEDICA

HISTOQUÍMICA

ESTUDIO de las SUSTANCIAS o COMPOSICION QUIMICAS de los TEJIDOS O CORTES (Glucógeno, cationes, lípido, etc.) utilizando Métodos de análisis Variado ( Técnicas Histológicas); ósea permite la identificación y localización en las células y tejidos de compuestos radicales químicas, formando productos insolubles que son coloreados y visualizados por el microscopio.

PRINCIPIOS BASICOS DE LA HISTOQUIMICA:

1. Los COMPUESTOS que deben ser analizados NO SON DIFUSIBLES. Proceso de insolubilización del compuesto que va a ser estudiado.

2. El PRODUCTO DE LA REACCION debe ser INSOLUBLE. Evita su difusión en la solución de los reactivos o migración.

3. El METODO utilizado es ESPECIFICO PARA LA SUSTANCIA o grupo químico que se va analizando. Favoreciendo la interpretación de los resultados obtenidos.

* En algunas Reacciones Histoquímicas la INTENSIDAD del COLOR producido es PROPORCIONAL a la CC. de la sustancia analizada.

PRINCIPALES SUSTANCIAS DEMOSTRABLES HISTOQUIMICAMENTE:

1. CARBOHIDRATOS: Demostración de GLUCOGENO (Polisacáridos) por el Método de COLORACION de PAS (Reacción Acido Peryodico de Schiff), entre otros.

2. LIPIDOS: Demostración de GRASAS NEUTRAS por el Método de COLORACION con SUDAN III o IV entre otros.

3. FOSFOLIPIDOS: Demostración de la presencia de FOSFOLIPIDOS por el Método de SUDAN BLACK (Sudan Negro).

4. AMILOIDES: Demostración de AMILOIDES por el Método de ROJO CONGO BENNHOLD.

5. HIERRO: Demostración de HIERRO TRIVALENTE por el Método de PERLS (Azul de Prusia).

6. CALCIO: Demostración de depósitos insolubles DE CALCIO por el Método de VON KOSSA.

7. PIGMENTOS MELÁNICOS: Demostración de PIGMENTOS MELANINICOS por el Método de MASSON FONTANA.

AMILOIDE

Depósito hialino y trasparente que no es normal.

Formado en enfermedades diversas

Llamado por Romanosky (1842) enfermedad Landacea.

Virchow en 1854 tiñe de azul con una mezcla de iodo y ac. sulfúrico

Es deposito proteico patológico en espacios extracelulares de tejidos y órganos del cuerpo.

Naturaleza Física del amiloide

-Fibrillas no ramificadas.

- Componente P.

Constitución Química

- Proteínas.- fibrilares (91%)

AL

AA

-Glicoproteinas

- Glucosaminoglicanos ácidos

COLORACION METODO DE ROJO CONGO BENNHOLD

I.- OBJETIVO: DEMOSTRACION de AMILOIDE en CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.

II.- RESULTADOS: AMILOIDE PRIMARIO………….......AMARILLO AMILOIDE SECUNDARIO……ROJO O NARANJAAL MICOROSCOPIO DE POLARIZACION……………..VERDE ESMERALDA

COLORACION ROJO CONGO DE BENNHOL

Amiloide primario = Amarillo

COLORACION METODO DEL CARMIN DE BEST

I.- OBJETIVO: DEMOSTRAR la presencia de GLUCOGENO en CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.

II.- RESULTADOS: GLUCOGENO………………………. ROJO; La lamina sometida a digestión con amilasa salival no debe presentar coloración positiva, NUCLEO …………………………..… AZUL

COLORACION SUDAN III O IV

I.- OBJETIVOS: DEMOSTRACION de GRASA NEUTRA en CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.

II.- FIJACION: Tejidos frescos o fijadas por el Liquido de Backer.

III.- MICROTOMIA: 4 – 8 u (congelación)

IV.- REACTIVOSIV.- REACTIVOS- - Solución colorante de sudan Solución colorante de sudan - Alcohol al 70% - Alcohol al 70% - Alcohol al 50 %- Alcohol al 50 %- Solución colorante de hematoxilina de Harris- Solución colorante de hematoxilina de Harris- Gelatina Glicerinada. - Gelatina Glicerinada.

V.- RESULTADOS:V.- RESULTADOS:GRASAS NEUTRAS ………...… NARANJA (Sudan GRASAS NEUTRAS ………...… NARANJA (Sudan III) .GRASASN NEUTRAS………....ROJO (Sudan III) .GRASASN NEUTRAS………....ROJO (Sudan IV )IV )NUCLEOS …………………………..AZULNUCLEOS …………………………..AZUL

Grasa neutra = Naranja (sudan III)Grasa neutra = Rojo (sudan IV)Núcleos : Azules

COLORACION SUDAN III - IV

COLORACION SUDAN III

COLORACION DE VON KOSSADepósitos de calcio = Negro o marrón oscuro

Núcleos = Morado Citoplasma : Rosado

COLORACION DE MASSON FONTANAPigmentos melaninicos y sustancias argentafines = Negro

Núcleos = MoradoCitoplasma = Rosado

METODO DE METODO DE COLORACIÓNCOLORACIÓN

OBJETIVO O OBJETIVO O PROPÓSITOPROPÓSITO

RESULTADOSRESULTADOS

PAS (ACIDO PAS (ACIDO PERYODICO DE PERYODICO DE SCHIFF)SCHIFF)

GLUCOGENO GLUCOGENO

(POLISACARIDOS, (POLISACARIDOS, CELULAS CELULAS MUCOSAS Y MUCOSAS Y MEMBRANA MEMBRANA BASAL)BASAL)

Glucógeno = Rojo a Glucógeno = Rojo a púrpurapúrpura

Mucina y membrana Mucina y membrana basal = Rojo a basal = Rojo a púrpura.púrpura.

Núcleos = AzulNúcleos = Azul

Hongos = Rojo a Hongos = Rojo a púrpurapúrpura

ALCIAN BLUE ALCIAN BLUE

(AZUL ALCIANO)(AZUL ALCIANO)GlucosaminoglicanoGlucosaminoglicanos Ácidos Sulfatados s Ácidos Sulfatados y no sulfatados y no sulfatados

Glucosaminoglicanos Glucosaminoglicanos Ácidos Sulfatados y no Ácidos Sulfatados y no sulfatados = Azul sulfatados = Azul verdosoverdoso

Núcleo = MoradoNúcleo = Morado

HIERRO HIERRO COLOIDAL DE COLOIDAL DE HALEHALE

GlucosaminoglicanoGlucosaminoglicanos Ácidos Sulfatados s Ácidos Sulfatados y no sulfatados y no sulfatados

Glucosaminoglicanos Glucosaminoglicanos Ácidos Sulfatados y no Ácidos Sulfatados y no sulfatados = Azul sulfatados = Azul turquesa intensoturquesa intenso

Núcleos = Azul Núcleos = Azul

Citoplasma = RosadoCitoplasma = Rosado

COLORACIONES HISTOQUIMICA

CARMIN DE BESTCARMIN DE BEST GlucogenoGlucogeno Glucogeno = Rojo Glucogeno = Rojo


SUDAN III ó IVSUDAN III ó IV Grasas neutrasGrasas neutras Grasas neutras = Grasas neutras = NaranjaNaranja

(sudan III)(sudan III)

Grasas neutras = Grasas neutras = RojoRojo

sudan IVsudan IV


SUDAN BLACK B SUDAN BLACK B (SUDAN NEGRO)(SUDAN NEGRO)

Fosfolípidos Fosfolípidos Fosfolípidos = Negro Fosfolípidos = Negro

Núcleos = Rojo Núcleos = Rojo

ROJO CONGO DE ROJO CONGO DE BENNHOLBENNHOL

Amiloide Amiloide Amiloide primario = Amiloide primario = AmarilloAmarillo

Amiloide segundario Amiloide segundario = negativo al color = negativo al color amarilloamarillo

PERLSPERLS Depósito de hierro Depósito de hierro trivalentetrivalente

Depósito de hierro Depósito de hierro trivalente = azul trivalente = azul turquesaturquesa

Núcleos = moradoNúcleos = morado

Citoplasma = rosadoCitoplasma = rosado

VON KOSSA VON KOSSA Depósito Depósito insoluble de insoluble de calciocalcio

Depósito de calcio = Depósito de calcio = negro ó marrón oscuro.negro ó marrón oscuro.

Núcleos = moradoNúcleos = morado


MASSON MASSON FONTANAFONTANA

Pigmentos Pigmentos melaninicosmelaninicos

Pigmentos melaninicos Pigmentos melaninicos y sustancias y sustancias argentafines = negroargentafines = negroNúcleos = moradoNúcleos = morado


FEULGENFEULGEN Ácido Ácido dexosiribonucldexosiribonucleicoeico

Ácido Ácido dexosiribonucleico del dexosiribonucleico del núcleo = rojo púrpuranúcleo = rojo púrpuraCitoplasma = rosadoCitoplasma = rosado

coloracion de especiales ii uap

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