clase 3 zigo y hialo
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Criterios macro y Criterios macro y
micromorfológicos básicos para micromorfológicos básicos para
la identificación la identificación
Mgster María de los Angeles SosaMgster María de los Angeles SosaMicrobiología GeneralMicrobiología General
UNNEUNNE
CultivoCultivoMedios de cultivo utilizados: Agar saboureaud glucosado (ASG)Agar papa glucosado (APG)Agar papa glucosado + cicloheximida (APG + Cicloheximida)Agar infusión cerebro corazón (ABHI)
Procedimientos:
Macrocultivo o colonia gigante: Cultivo en placa de PetriMicrocultivo o cultivos en láminaPico de flauta (En tubo de ensayo con tapón de algodón o a rosca) Examen Microscópico.Montajes directos : Azul de lactofenol cinta scotch
Siempre debo observar estructuras reproductivas!!!
Colonia Gigante o Macrocultivo
Cultivo en Lámina o Microcultivo
soporte
fragmento de micelio
portaobjeto
agar
MacromorfológicosMacromorfológicosCOLONIACOLONIA•Grado de Crecimiento: Grado de Crecimiento: rápido, moderado, rápido, moderado, lento.lento.•Textura:Textura: aterciopelada, algodonosa, granular, laxa. aterciopelada, algodonosa, granular, laxa.•Color: Color: Micelio – Conidios – AscocarposMicelio – Conidios – Ascocarpos•Topografía:Topografía: rugosa, verrucosa, crateriforme, rugosa, verrucosa, crateriforme, cerebriforme.cerebriforme.•Pigmentos: Pigmentos: Solubles – InsolublesSolubles – Insolubles•ExudadosExudados
ESTRUCTURAS SEXUALES Y ASEXUALESESTRUCTURAS SEXUALES Y ASEXUALES (lupa estereoscópica)(lupa estereoscópica)
COLONIA: Grado de CrecimientoCOLONIA: Grado de Crecimiento
COLONIA: Textura - ColorCOLONIA: Textura - ColorAterciopelada - BajaAterciopelada - Baja
Flocosa - AltaFlocosa - Alta
Laxa - AltaLaxa - Alta
AlgodonosaAlgodonosa
Rala o Rala o rizoidalrizoidal
Granulosa – Granulosa – Micelio vegetativo Micelio vegetativo
hialinohialino
Densa – Micelio Densa – Micelio Vegetativo oscuroVegetativo oscuro
Color de los Color de los Conidios – Conidios –
CleistoteciosCleistotecios
Pigmentos InsolublesPigmentos Insolubles
Pigmentos SolublesPigmentos Solubles
ExudadoExudado
Colonia RadiadaColonia Radiada
Colonia sulcadaColonia sulcada
Observaciónmicromorfológica
ObservaciónMinuciosa!!!!!
MicromorfológicosMicromorfológicos- Micelio vegetativo:-Tipo de Hifa ( sepatada o aseptada)
-Pigmentación (hialina o dematiacea)
- Micelio de reproducción:
- Disposición Disposición - SuperficieSuperficie- PigmentaciónPigmentación
-TamañoTamaño- MorfologíaMorfología- SuperficieSuperficie- PigmentaciónPigmentación- DisposiciónDisposición
Característica del conidióforoCaracterística del conidióforo
Característica de los conidiosCaracterística de los conidios
Característica del cuerpo de Característica del cuerpo de fructificaciónfructificación
Tipos de conidiosTipos de conidios
Grupos taxonómicos:Grupos taxonómicos:Zigomicetes Zigomicetes y y
HialohifomicetesHialohifomicetes
ZigomicetesZigomicetesHongos de micelio hialino no tabicado o cenocítico de Hongos de micelio hialino no tabicado o cenocítico de crecimiento rápido e invasivo.crecimiento rápido e invasivo.Hifas hialinas predominantemente anchas, de mas de 8 µm Hifas hialinas predominantemente anchas, de mas de 8 µm de diametro.de diametro.Tabiques transversales ausentes o muy escasos (cultivos Tabiques transversales ausentes o muy escasos (cultivos envejecidos)envejecidos)Reproducción sexual por Reproducción sexual por zigosporaszigosporas..Reproducción asexual por esporangiosporas producidos en Reproducción asexual por esporangiosporas producidos en esporangiosesporangiosAquí pueden hallarse hongos tan frecuentes como el moho Aquí pueden hallarse hongos tan frecuentes como el moho negro del pan.negro del pan.Géneros principales:Géneros principales:
RhizopusRhizopus LichtheimiaLichtheimia MucorMucor
Ciclo asexual de zigomicotaCiclo asexual de zigomicota
Ciclo sexual Zigomicota
Características generalesCaracterísticas generales
Hifas predominantemente anchas, de más de 8 µm de diámetro.
Tabiques transversales ausentes o muy escasos, que pueden aumentar su número con el envejecimiento del cultivo.
1 Esporangios uniesporados Cunninghamella 1’ Esporangios multiesporados 2 2 Esporangios cilíndricos (merosporangios), esporangiosporas
dispuestas siempre en una hilera Syncephalastrum
2’ Esporangios de otra forma 3 3 Esporangios en forma de botella o florero Saksenaea 3’ Esporangios globosos, esféricos o piriformes, esporangiosporas
irregularmente ordenadas, nunca en una sola hilera 4
4 Esporangios piriformes, columela con apófisis en forma de
embudo, esporangióforos conectados por estolones y rizoides que no nacen opuestos al esporangióforo.
Absidia
4’ Esporangios globosos 5 5 Esporangios sin columela Mortierella 5’ Esporangios con columela 6 6 Rizoides presentes 7 6’ Rizoides ausentes Mucor 7 Esporangios con columela con apófisis, esporangióforos
conectados por estolones, rizoides bien desarrollados que nacen en la base de los esporangióforos
Rhizopus
7’ Esporangios con columela sin apófisis, rizoides presentes o ausentes.
8
8 Termofílicos (crecen a 45 ºC), rizoides y estolones escasos o ausentes
Rhizomucor
8’ No Termofílicos (no crecen a 45 ºC), rizoides y estolones abundantes
Actinomucor
Esporangios multiesporados 2
Esporangios de otra forma 3
Esporangios globosos, esféricos o piriformes, esporangiosporas irregularmente ordenadas, nunca en una sola hilera
4
Esporangios piriformes, columela con apófisis en forma de embudo, esporangióforos conectados por estolones y rizoides que no nacen opuestos al esporangióforo.
Absidia
Claves dicotómicas
Macromorfología de la colonia Macromorfología de la colonia de un zigomicetode un zigomiceto
– Colonia de Colonia de crecimiento rápido, crecimiento rápido, invasiva.invasiva.
– Laxa, al principio es Laxa, al principio es blanca y al madurar blanca y al madurar es gris, verde oliva, es gris, verde oliva, amarilla a café. amarilla a café.
– La superficie se La superficie se cubre con manchas cubre con manchas oscuras cuando se oscuras cuando se desarrollan los desarrollan los esporangios. esporangios.
– El reverso es incoloro El reverso es incoloro o crema.o crema.
rizoides
estolones
Rhizopus
Esporangios-poras
Género Género RhizopusRhizopusMicromorfologíaMicromorfología– Rizoides amarillos o café claros que nacen Rizoides amarillos o café claros que nacen
desde los nodos.desde los nodos.– Esporangióforos café con columelas Esporangióforos café con columelas
hemisféricas, que se originan de nodos hemisféricas, que se originan de nodos adyacentes a los rizoides.adyacentes a los rizoides.
– Esporangios redondos, hialinos con base Esporangios redondos, hialinos con base aplanada. Se tornan oscuros cuando maduran aplanada. Se tornan oscuros cuando maduran las esporangiosporas. las esporangiosporas.
– Esporangiosporas hialinas o café claras, ovales Esporangiosporas hialinas o café claras, ovales a elipsoidesa elipsoides
RhizopusRhizopus
Género Género LichtheimiaLichtheimiaMicromorfologíaMicromorfología– Rizoides internodalesRizoides internodales– Columela cónica (similar a la base de un Columela cónica (similar a la base de un
embudo)embudo)– Apófisis con collarete.Apófisis con collarete.– Esporangios piriformes, frágiles y hialinosEsporangios piriformes, frágiles y hialinos– Esporangiosporas hialinas o amarillas Esporangiosporas hialinas o amarillas
verdosas, redondas u ovales, generalmente verdosas, redondas u ovales, generalmente de paredes lisas y una base plana. de paredes lisas y una base plana.
LichtheimiaLichtheimia
Género Género MucorMucorMicromorfologíaMicromorfología– Ausencia de rizoides.Ausencia de rizoides.– Esporangióforos ramificados hialinos o Esporangióforos ramificados hialinos o
pigmentados.pigmentados.– Esporangios globosos de tamaño variable. Frágil, Esporangios globosos de tamaño variable. Frágil,
cuando madura y se rompe, se observa la columela cuando madura y se rompe, se observa la columela con un collarete en la base. con un collarete en la base.
– Esporangiosporas amarillas o café, ovales o Esporangiosporas amarillas o café, ovales o elipsoides. elipsoides.
– Algunas especies se reproducen sexualmente in Algunas especies se reproducen sexualmente in vitro, produciendo zigosporas.vitro, produciendo zigosporas.
Mucor
Zigomicetes
Rhizopus Mucor
Lichtheimia
Infección oportunista aguda caracterizada por la inflamación,
trombosis e infarto vascular debida a la invasión de las paredes y la luz de los vasos sanguíneos por las hifas de
los zigomicetes o infección crónica del tejido subcutáneo.
ZIGOMICOSIS
EpidemiologíaPresentan distribución mundial.
Se los encuentra en el suelo, estiercol, forman parte de la flora ambiental.
Producen infecciones de las vías respiratorias altas (inhalación de esporas) Ej: Rinosinusitis
También producen infección muco cutánea crónica por inoculación traumática Ej: quemaduras
Afectan principalmente a individuos diabéticos e inmunocomprometidos. Ej: Zigomicosis Rinocerebral
Cuadro clínico
Acremonium
Fusarium
ScopulariopsisPenicillium
Scedosporium
Paecilomyces
Crecimiento inicial a 25-28ºCCrecimiento inicial a 25-28ºC
Crecimiento inicial a 25-28ºC
Hialino
Hialino, hifas delgadas
TabicadoCrecimiento
en cicloheximida
Dematiaceos Levaduras
Crec. muy rápido < 3 días
Hifas anchas y sin tabiques
ZIGOMICETOS
Crec. de 3-5 díasHifas hialinas
y tabicadasHIALOHIFOMICETES
HialohifomicetesHialohifomicetesHongos de micelio hialino y tabicado.Hongos de micelio hialino y tabicado.Hifas delgadas de 2 a 5 Hifas delgadas de 2 a 5 µm de diámetroµm de diámetroCrecimiento rápido (3 a 5 días)Crecimiento rápido (3 a 5 días)Colonias algodonosas, vellosas o granulares, de borde Colonias algodonosas, vellosas o granulares, de borde externo liso. Anverso de diversos colores y reverso gris externo liso. Anverso de diversos colores y reverso gris o beige.o beige.Reproducción asexual por esporulación (Reproducción asexual por esporulación (conidiosconidios))Pertenecen a la división Ascomiceto o Deuteromicota.Pertenecen a la división Ascomiceto o Deuteromicota. Reproducción sexual por fusión de una espora “macho” Reproducción sexual por fusión de una espora “macho” con una hifa receptiva “hembra”(o levadura). Las con una hifa receptiva “hembra”(o levadura). Las esporas sexuales (esporas sexuales (ascosporasascosporas) se desarrollan dentro de ) se desarrollan dentro de un saco llamado un saco llamado ascoasco. . Es el grupo con mayor número de especies. Es el grupo con mayor número de especies.
Esporas asexuales o conidiosEsporas asexuales o conidios
Conidiogénesis
Reproduccion asexual externa:*Conidios (toman el nombre de la estructura que les dio origen)
Subgrupos de hialohifomicetesSubgrupos de hialohifomicetes
1- Conidios producidos en cadenas:1- Conidios producidos en cadenas:
• Conidióforos que terminan en una vesícula dilatadaConidióforos que terminan en una vesícula dilatada: : AspergillusAspergillus
• Conidióforos ramificados en un penicilio o pincel: Conidióforos ramificados en un penicilio o pincel: PenicilliumPenicillium
2- Conidios producidos en racimos2- Conidios producidos en racimos:: FusariumFusarium..
Aspergillus
ASPERGILLUSASPERGILLUS
MacromorfologíaMacromorfología– Colonia algodonosas, vellosas, Colonia algodonosas, vellosas,
aterciopelada a granularaterciopelada a granular– Crecimiento rápido (3 a 5 días)Crecimiento rápido (3 a 5 días)– Color inicial blanco, luego verde, Color inicial blanco, luego verde,
amarillenta, gris, café o negra.amarillenta, gris, café o negra.– Reverso blanco, gris pálido o beige, Reverso blanco, gris pálido o beige,
o puede observarse pigmento o puede observarse pigmento amarillo o marfil.amarillo o marfil.
MicromorfologíaMicromorfología
– Hifas relativamente anchas, Hifas relativamente anchas, con ramificación dicotómica en con ramificación dicotómica en 45º. 45º.
– Conidióforos erectos, no Conidióforos erectos, no ramificados, de tamaño ramificados, de tamaño variable. variable.
– Presentan vesícula apical Presentan vesícula apical redondas, achatadas o redondas, achatadas o elipsoides.elipsoides.
– Fiálides nacen directamente de Fiálides nacen directamente de la vesícula (uni o biseriada).la vesícula (uni o biseriada).
– Conidios forman cadenas de Conidios forman cadenas de disposición columnar o radiada.disposición columnar o radiada.
Principales EspeciesPrincipales EspeciesColoniaColonia MicromorfologíaMicromorfología
A. fumigatus A. fumigatus Verde azuladaVerde azulada Vesículas subesférica, fiálidesVesículas subesférica, fiálidesa grisa gris uniseriada y conidios columnar.uniseriada y conidios columnar.
A. flavusA. flavus Amarillo Amarillo Vesículas pequeñas-achatadas y Vesículas pequeñas-achatadas y verdosoverdoso grandes-redondas, fiálides uni o grandes-redondas, fiálides uni o
biseriadas y conidios columnar biseriadas y conidios columnar y radiados.y radiados.
A. nigerA. niger NegraNegra Vesículas grandes y redondas, Vesículas grandes y redondas, fiálides biseriada, conidios fiálides biseriada, conidios
radiadosradiados
A terreusA terreus Canela a caféCanela a café Vesículas subesféricas, fiálides Vesículas subesféricas, fiálides biseriadas y conidios columnar.biseriadas y conidios columnar.
PenicilliumPenicillium
PENICILLIUMPENICILLIUMMacromorfologíaMacromorfología
Colonia de crecimiento Colonia de crecimiento rápido (3 a 5 días)rápido (3 a 5 días)A los 4 días, colonia vellosa, A los 4 días, colonia vellosa, aterciopelada a pulverulenta. aterciopelada a pulverulenta. Color generalmente Color generalmente verdeverde azulada con periferia blanca. azulada con periferia blanca. Algunos pueden ser amarillo, Algunos pueden ser amarillo, verde, café y rojo.verde, café y rojo.Algunos producen pigmentos Algunos producen pigmentos que difunde al medio.que difunde al medio.
PENICILLIUMPENICILLIUMMicromorfologíaMicromorfología
Hifas relativamente delgadas Hifas relativamente delgadas que dan origen a conidióforos que dan origen a conidióforos rectos y septados. Algunos rectos y septados. Algunos pueden ser únicos pueden ser únicos (monoverticilados) o estar (monoverticilados) o estar ramificados (bi o ramificados (bi o terverticilados)terverticilados)Típicamente tiene un penicilio Típicamente tiene un penicilio con métulas y fiálides que con métulas y fiálides que generan conidios.generan conidios.Conidios unicelulares en Conidios unicelulares en cadena. Tienen forma ovoide a cadena. Tienen forma ovoide a elipsoide, de paredes lisas o elipsoide, de paredes lisas o rugosas.rugosas.
FUSARIUMFUSARIUMMacromorfologíaMacromorfología– Crecimiento rápido. Crecimiento rápido. – Entre 3 a 6 días, Entre 3 a 6 días,
colonia inicial colonia inicial aterciopelada, luego aterciopelada, luego algodonosa. algodonosa.
– Gran variedad de Gran variedad de color; blanco, gris, color; blanco, gris, amarillo, café, amarillo, café, violeta, rosado.violeta, rosado.
– Presenta pigmento Presenta pigmento más oscuro hacia el más oscuro hacia el centro de la colonia.centro de la colonia.
FusariumFusariumMicromorfologíaMicromorfología
– Fiálides cortas que nacen Fiálides cortas que nacen directamente de la hifa directamente de la hifa
– Se producen conidios de Se producen conidios de distinto tamaño. Macroconidios distinto tamaño. Macroconidios son fusiformes, curvos con son fusiformes, curvos con extremo aguzados y presentan extremo aguzados y presentan 2 a 11 células.2 a 11 células.
– Microconidios son unicelulares, Microconidios son unicelulares, cilíndricos. Son únicos o en cilíndricos. Son únicos o en racimos (sustancia mucoide).racimos (sustancia mucoide).
FusariumFusarium
Macroconidias fusiformes falcadas (en forma de hoz) que surgen solitarias o agrupadas
HIALOHIFOMICOSISInfecciones oportunistas sistémicas cuyos agentes
etiológicos se presentan en los tejidos del hospedero en forma
de hifas hialinas septadas.
Fusarium Acremonium PaecilomycesPenicillium
Scopulariopsis Scedosporium
EpidemiologíaEpidemiologíaHongos ambientales, de distribución mundial.
Se observa una mayor concentración de esporos en ambientes húmedos, con gran cantidad de plantas, y en el suelo.
Cuando afectan a un individuo inmunocompetente dan lesiones localizadas, pero en inmunocomprometidos producen micosis invasoras, dando formas diseminadas de pronóstico grave.
Sitios comprometidos con mayor frecuencia
Piel
Tejido celular subcutáneo
Senos peranasales
Pulmón Infección de los senos paranasales
Infección pulmonar invasora
Infección de órganos y tejido cutáneo y subcutáneo
Fungemias
Celulitis, endocarditis, peritonitis y lesiones cerebrales
MUY HETEROGÉNEO
Cuadro clínico