citologie şi histologie practică 2009. scopul cursului familiarizarea cu noţiunile de bază ale...

26
Citologie şi Histologie Practică 2009

Upload: angelina-ramsey

Post on 27-Mar-2015

249 views

Category:

Documents


10 download

TRANSCRIPT

Page 1: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Citologie şi Histologie Practică

2009

Page 2: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Scopul cursului• Familiarizarea cu noţiunile de

bază ale citologiei – Aspectele normale– Modificările inflamatorii– Tumori

• Citologia clinică: absentă din curricula medicală din România

• Criteriile de malignitate celulară • Corelarea noţiunilor citologice cu

cele histologie şi patologie• Aplicarea lor în diagnosticul

patologic• Acumularea noţiunilor: patologia

chirurgicală• Clinicianul: utilizarea informaţiilor

pe care le primeşte de la patolog– buletinul histopatologic– buletinul citologic

Page 3: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Patologia chirurgicală şi non-patologii

• Acurateţea rezultatului depinde atât de clinician cât şi de patolog

• Cunoaşterea de către patolog a datelor clinice, paraclinice şi procedurilor terapeutice

• Avizaţi asupra limitei specialităţii lor

• Examinarea microscopică este uneori subiectivă

Page 4: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Raportul patologic

• Document medical important• Descrierea concisă a aspectelor macro/microscopice

relevante pentru caz• Se vor evita descrierile microscopice exhaustive• Se va evita “jargonul” histologic: nu are consecinţe

clinice• Concentrat pe diagnostic, prognostic, terapie• Importantă colaborarea clinician-patolog

Page 5: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Componentele raportului

• Date clinice, aspect intraoperator, biopsii anterioare

• Decrierea macroscopică (anomalii, localizare, mărime, culoare, dimensiuni, greutate

• Fără comparaţii “plastice” (“cât o cireaşă”)

Page 6: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Componentele raportului• Descrierea microscopică:

– pentru clinician în majoritatea cazurilor inutilă

– neinteresat de tipul nucleilor, caracterul citoplasmei

• Diagnosticul: – cel mai important capitol;– ex: Carcinom ductal infiltrativ (varianta

clasică) G2, pT2N1MX, cod ICD-O: • Comentarii: diagnostic diferenţial,

interpretare, elemente prognostice şi cu impact terapeutic

• Prezent: raportul patologic standardizat pentru fiecare organ şi tip de leziune

BULETIN HISTOPATOLOGIC NR: 4760-6766

Nume: Prenume: Sex :M Vârsta: ani

Domiciliu :.

Diagnostic clinic: Stenoza pilorica

Foaia de observaţie Nr.: 1200

Provenienţa materialului:. Stomac + bulb duodenal Trimis de:Departament: Medic: Data primirii probei : 12.10.1997

Aspect Macroscopic :

Stomac + bulb duodenal cu lungimea de aproximativ 14 cm prezentand la nivelul pilorului o zona stenozanta de 4 cm lungime circumferential ulcerata, cenusie-rozata consistenta crescuta, pe sectiune pereti ingrosati albicios consistenta crescuta care se situeaza la aproximativ 0.5 cm de marginea de rezectie.

4760- limita la 0.5 cm deulceratie, spre duoden 4761- limita spre cardie 4762-4764- zona stenozanta, albicioasa 4765- 3 limfonoduli de la nivelul marii curburi 4766- 6 limfonoduli de la nivelul marii curburi

Orientat: Diagnostic Histopatologic : 6260. Perete duodenal cu prezenta in straturile profunde (seros si muscular) a unui infiltrat tumoral difuz cu celule „in inel cu pecete”. 6261. Perete corp gastric cu aspect de gastrita cronica foliculara, fara infiltrare tumorala. 6262 – 6264. Carcinom gastric difuz cu celule „in inel cu pecete”- G3. Tumora infiltreaza difuz mucoasa, submucoasa, musculara si subseroasa – pT2b. Celulele tumorale au marimi variabile, cele mai multe fiind mari, ovalare, cu citoplasma bogata, ce contine mucine acide (pozitive la colorarea histochimica PAS – albastru alcian) si impinge nucleul la periferie. Stroma tumorii, pe alocuri desmoplazica, contine infiltrat inflamator cronic difuz si nodular. Ulceratie larga si profunda, acoperita de detritus necrotico-grnaulocitar. Reactii vasculo-exudative marcate la nivelul seroasei: edem, hiperemie, extravazate hematice si infiltrat inflamator limfo-plasmocitar si granulocitar. 6265. 3 limfonoduli cu modificari reactive, fara infiltrare tumorala (reactia histochimica PAS – albastru alcian negativa). 6266. 6 limfonoduli cu modificari reactive, fara infiltrare tumorala.

Page 7: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Biopsia

• Fragmentul prelevat pentru examinarea microscopică

• Incizională: prelevă doar o parte din leziune

• Excizională: prelevată întreaga leziune cu strat de ţesut normal

• Biopsia excizională: valoare diagnostică şi terapeutică

• Prelevare: cu bisturiul “rece”, cauterul, acul, endoscopic

• Atenţie la cauter!

Page 8: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Recoltare

• Fragmente multiple: se trimit toate

• Strivire cu pensa, incluzionarea incorectă: artefacte

• Fixarea imediată, fără manipulare de către chirurg

• La multe cazuri sunt necesare metode adiţionale (“speciale”)

Page 9: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Examenul intraoperator(extemporaneu)

• Pentru examenul extemporaneu nu se pun fragmentele în fixator

• Important/dificil• Experienţă, cunoaştere,

capacitatea de a lua rapid decizii

• Limitele metodei• Trebuie sau nu să fac

“extemporaneu”?

Page 10: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

• Practicat pentru:– Prezenţa şi natura leziunii– Diagnosticul marginilor– Prezenţa elementelor

diagnostice în material

• Diagnostic microscopic sofisticat: inutil

• Durata medie: 20 minute• Acurateţea: 89-98.9%• Fals negative: erori de

interpretare, absenţa elementelor diagnostice

• Diagnostic de certitudine la parafină

Examenul intraoperator(extemporaneu)

Page 11: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Prelucrarea primară

• Laborator în proximitatea sălii de operaţie

• Specimen proaspăt, trimis imediat

• Transport: container de plastic

• NU se adaugă lichide!• Întârzierea trimiterii:

păstrare la 4 C (ore, nu zile)

Page 12: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Fixarea

• Întreruperea evoluţiei, previne autoliza, păstrează structurile

• Formalina tamponată 10%• Compatibilă cu majoritatea coloraţiilor speciale• Păstrare specimen perioade îndelungate• Excepţie: IHC, 48 ore• Retracţia: datorată ţesutului muscular, nu formalinei

(e.g. Biopsii colice, retracţie 57%)• Alte soluţii fixatoare: Zencker (B5), Bouin, Carnoy• Volumul de fixator: 10x volumul piesei

Page 13: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Fixarea - proceduri

• T camerei• 4 C (formalina îngheaţă la

-3 C)• Viteza de penetrare a

fixatorului: 1 mm/h• Biopsia: 1,5/0.3 cm• Microunde: 300 MHz-300

GHz, 55 C, 1-2 min (poate induce artefacte)

Page 14: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Marginile de rezecţie

• Identificare• Marcarea marginilor• Suprafaţă netedă,

consistenţă dură: identificare uşoară

• Includ limita periferică de rezecţie a specimenului

• Dacă se găseşte tumoră: precizare anatomică

Page 15: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

1. orientarea 2. măsurarea

3. Marcarea marginilor cu cerneală

4. specimenul, evaluarea ,marginilor

Page 16: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Coloraţii “speciale”

• HE este coloraţia uzuală

• Informaţii interpretate de patolog/citolog

• Subiectivismul examinatorului

• Introduse numeroase metode noi

Page 17: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Metode de colorare

• Morfologice (HE, tricrome)

• Histochimice (PAS, AA, AT)– Histoenzimologice

• Imunohistochimice– Metode cantitative

• Citologice (Papanicolaou, APT-Drăgan, MGG)

Page 18: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Metode histochimice• Reacţia PAS: glicogen,

glicoproteine, fungi, paraziţi, mucine neutre

• Impregnări argentice– fibre de reticulină– celule neuroendocrine– neuroni şi celule gliale

• Coloraţii pentru microorganisme (Giemsa pt HP)

• Coloraţii pentru amiloid (roşu de Congo)

• Coloraţii pentru fibre elastice (orceină)

• Coloraţii pentru mucine (AA, AA-PAS)

– Sialomucine : AA+ la pH 2,5 şi negative la 0,5

– Sulfomucine : AA+ la ph 0,5 şi 2,5

Page 19: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii
Page 20: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Histoenzimologie

• Aplicare considerabil redusă

• Tehnici complexe• Necesită material

proaspăt• Enzimele pot fi

identificate şi IHC• Aplicare:

– Miopatii – Megacolon (Ach-aza)– Seria mieloidă:

cloroacetat esteraza– Fosfataza acidă

Page 21: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Imunohistochimia • Esenţială calitatea procesării

primare• Importantă acurateţea tehnicii• Necesară standardizarea

procedurilor• Preparate control• Stabilirea indicaţiilor :

– în special pentru tumorile slab diferenţiate

– tumori cu origine neprecizată– evaluarea ratei de proliferare– evaluarea receptorilor

• Panel de anticorpi:– Imunofenotipizare primară– Imunofenotipizare secundară

• Semnalează diferenţierea celular tisulară

• Preţ de cost relativ crescut• Utilizare limitată în citologie

Page 22: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

HER-2/neu ER

ChrA Ki67

Page 23: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Metode cantitative

• Măsurarea obiectivă a aspectelor microscopice

• Indexul proliferativ: Ki67• Densitatea celulelor pozitive

pentru receptori hormonali (ER, PR, AR etc)

• Valoare prognostică pentru rata de succes la terapia adjuvantă.

Page 24: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Microscopia electronică• Utilizată în general pentru

cercetare• Identificarea histogenezei şi

diferenţierii• Patologia renală, tegumentară• Contribuţie diagnostică:

– Tu celule granulare– Tu teacă nerv periferic– Histiocitoză Langerhans– Mezoteliom– Carcinoid– Carcinom cu celule mici

Page 25: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Limitele ME

• Examinarea de fragmente foarte mici

• Absenţa criteriilor de mare specificitate

• Erori de interpretare: ţesut non-neoplazic inclus

• Dificultăţi de evaluare spaţială

Page 26: Citologie şi Histologie Practică 2009. Scopul cursului Familiarizarea cu noţiunile de bază ale citologiei –Aspectele normale –Modificările inflamatorii

Cursul următor:

• Diagnosticul citologic.

• Buletinul citologic.

• De unde facem citologie?

• Cum se efectuează un frotiu?

• Criteriile de malignitate celulară.

• Clasificarea Papanicolaou a frotiurilor.