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9 8 J . S . SHARPEA . Two d a y s l a t e r .

( 1 ) N e p h e l o m e t r i c ( r e a d i n g o f s t a n d a r d . . . . . . 6 0m e t h o d , , , , s a m p l e ( a v e r a g e ) . . . 8 1 J

- 1 4 - 8 0 / f a t t y a c i d s .( 2 ) B y S o x h l e t ' s e x t r a c t i o n ... . . . . . . -4 - 7 0 / , ,B . C h i l d w i t h r i c k e t s .r e a d i n g o f s t a n d a r d . . . 6 0( 1 ) B y n e p h e l o m e t e r a

, , , , s a m p l e ( a v e r a g e ) 5 9 J= 2 0 - 3 0 / f a t t y a c i d s .( 2 ) , , S o x h l e t ' s e x t r a c t i o n . . . =19.9

( 3 ) , , e t h e r e a l e x t r a c t i o n a f t e r l i b e r a t i o n o f t h ef a t t y a c i d s b y H O i . . . . . . . . . 2 0 - 00/.B . Tw o d a y s l a t e r . r e a d i n g o f s t a n d a r d 6 0( 1 ) B y n e p h e l o m e t e r s a m p l e ( a v e r a g e ) 6 5

- 1 8 4 0 / f a t t y a c i d s .( 2 ) , , S o x h l e t ' s e x t r a c t i o n . . . . . . . . . - 1 7 - 9 0 / , , ,( 3 ) , , e t h e r e a l e x t r a c t i o n a f t e r l i b e r a t i o n o f t h ef a t t y a c i d s b y H C l . . . . . . . . . - 1 8 0 0 /I t w i l l b e s e e n t h a t t h e r e s u l t s a r e w e l l w i t h i n t h e l i m i t s o f e x p e r i m e n t a l

e r r o r .F o r a c c u r a t e w o r k i n c l o u d r e a d i n g t h e n e p h e l o m e t e r i s i n d i s p e n s a b l e .N e s s l e r i s i n g t u b e s may h o w e v e r b e s u b s t i t u t e d , a n d w h e n u s e d w i t h c a r eg i v e a f a i r d e g r e e o f a c c u r a c y . When u s i n g t h e c o m p a r i s o n t u b e s a l l t h a t i sn e c e s s a r y i s t o p r o d u c e t h e c l o u d i n a s i m i l a r q u a n t i t y o f t h e s a m p l e , a s d e -s c r i b e d a b o v e , a n d , u s i n g a s e c o n d t u b e , r u n i n f r o m a b u r e t t e t h e s t a n d a r df a t t y a c i d s o l u t i o n , d i l u t e d i f n e c e s s a r y , u n t i l t h e d e n s i t i e s o f t h e c l o u d s a r e

a l i k e . From t h e n u m b e r o f c c . u s e d t h e q u a n t i t y o f f a t t y a c i d s i n t h ef a e c e s c a n r e a d i l y b e f o u n d .E x a m p l e :

( a ) c c . o f s t a n d a r d s o a p s o l . u s e d = 4 ' 0 ; 2 0 - 0 % f a t t y a c i d s .( b ) , , , , , , , , = 3 7 : 1 8 - 7 %By S o x h l e t ' s e x t r a c t i o n . . . . . . 1 9 . 9 % ,

( 2 ) S o a p s . ( i ) S o d i u m a n d p o t a s s i u m s o a p s ( s o l u b l e s o a p s ) .F o r t h e e s t i m a t i o n o f t h e s o l u b l e s o a p s i t i s o n l y n e c e s s a r y t o e x t r a c t w i t h

d i s t i l l e d w a t e r a n d p r o c e e d e x a c t l y a s a b o v e . O f c o u r s e a l a r g e r q u a n t i t yo f t h e s a m p l e m l i s t b e t a k e n a s t h e r e i s a v e r y s m a l l p e r c e n t a g e o f f a t c o m b i n e d

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ESTIMATION OF FATTY ACIDS AND SOAPSi n t h i s f o r m . T h e a v e r a g e a m o u n t i n t h e s a m i p l e s I h a v e e x a m i n e d i s a b o u t0 - 2 % c a l c u l a t e d a s f a t t y a c i d .( i i ) C a l c i u m a n d m a g n e s i u m s o a p s ( i n s o l u b l e s o a p s ) .T h e r e i s n o d i r e c t n e p h e l o m e t r i c m e t h o d f o r t h e e s t i m a t i o n o f t h e s ei n s o l u b l e s o a p s i n t h e f a e c e s . I t i s n e c e s s a r y t o know t h e e t h e r - s o l u b l ef a t t y a c i d s , a s w e l l a s t h e t o t a l f a t t y a c i d s a n d t h e w a t e r - s o l u b l e s o a p s .E x a m p l e : S a m p l e A S a m p l e B

T o t a l f a t t y a c i d s b y n e p h e l o m e t e r l . 1 8 - 4 % 2 0 - 3 %F a t t y a c i d s b y S o x h l e t . . . . . . . . 1 7 - 9 % 1 9 - 9 %- T o t a l s o a p s ( b y d i f f e r e n c e ) . . . . . . 0 5 % 0 - 4 %W a t e r - s o l . s o a p s b y n e p h e l o m e t e r . . . 0 - 2 % 0 - 2 %- C a a n d Mg s o a p s ( b y d i f f e r e n c e ) . . . 0 3 % 0 - 2 %

W i t h r e g a r d t o t h e t i m e n e c e s s a r y t o c o m p l e t e a s e r i e s o f t h e s e e s t i m a t i o n si t w a s f o u n d t h a t f r o m e i g h t t o t e n s a m p l e s c o u l d b e u n d e r t a k e n i n a d a y .T h u s t h e p r o c e s s o f f e r s a v e r y g r e a t a d v a n t a g e o v e r t h e t e d i o u s m e t h o d o fe x t r a c t i o n w i t h e t h e r .

A n o t h e r p o i n t i n f a v o u r o f t h e m e t h o d i s t h a t a l l t h e f a t t y m a t e r i a l i se x t r a c t e d w h e t h e r c o m b i n e d a s n e u t r a l f a t s , f a t t y a c i d s o r s o a p s a n d e s t i m a t e da s t o t a l f a t t y a c i d s . T h i s o v e r c o m e s t h e p o s s i b i l i t y o f i n c o m p l e t e e t h e re x t r a c t i o n w h i c h i s a w e l l - k n o w n d i f f i c u l t y .

C O N C L U S I O N S .- B y t h e s a p o n i f i c a t i o n p r o c e s s a n d t h e u s e o f t h e n e p h e l o m e t e r v e r y r a p i d

a n d a c c u r a i t e d e t e r m i n a t i o n s o f t h e f a t t y a c i d c o n t e n t i n f a e c e s c a n b e m a d e .T o e n s u r e g o o d r e s u l t s t h e f o l l o w i n g p o i n t s r e q u i r e a t t e n t i o n .

( a ) T h e c l o u d s i n t h e s a m p l e a n d s t a n d a r d s h o u l d b e p r e c i p i t a t e d a t t h es a m e t i m e .( b ) T h e s a m e a m o u n t o f H C I s h o u l d b e a d d e d t o e a c h .( c ) T h e s a m e t i me ( a b o u t f i v e m i n u t e s ) s h o u l d b e a l l o w e d f o r t h e c l o u d st o f o r m .( d ) A s t a n d a r d s h o u l d b e u s e d w h i c h g i v e s r e a d i n g s f a i r l y c l o s e t o t h o s eo f t h e s a m p l e a n a l y s e d .T h e a p p l i c a t i o n o f t h e m e t h o d t o s u b s t a n c e s o t h e r t h a n f a e c e s i s b e i n gi n v e s t i g a t e d .1 I h a v e e v i d e n c e i n w o r k on f a t m e t a b o l i s m i n r i c k e t s , a s y e t u n p u b l i s h e d , t o s h o w t h a tt h e r e i s v e r y l i t t l e n e u t r a l f a t p r e s e n t i n t h e f a e c e s . T h e f a t t y a c i d s a r e f o r t h e m o s t p a r t f r e e ,

w i t h a v e r y s m a l l q u a n t i t y c o m b i n e d a s s o a p s ( s e e a b o v e ) .

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1 0 0 J . - S . SHARPEI h a v e t o t h a n k P r o f e s s o r N o e l P a t o n f o r t h e a d v i c e h e g a v e me d u r i n gt h i s w o r k . I am a l s o i n d e b t e d t o Mr D a v i d B u r n s w h o p r o v i d e d t h e

n e p h e l o m e t e r f r o m a g r a n t b y t h e C a r n e g i e T r u s t e e s .T h e o t h e r e x p e n s e s c o n n e c t e d w i t h t h e w o r k w e r e d e f r a y e d b y a g r a n tf r o m t h e M e d i c a l R e s e a r c h C o m m i t t e e t o w h om I d e s i r e t o e x p r e s s m yt h a n k s .

REFERENCES.K o b e r a n d G r a v e s ( 1 9 1 5 ) . J. I n d . E n g . C h e m . ( A m e r i c a n ) , 7 , 8 4 3 .Laws a n d B l o o r ( 1 9 1 6 ) . A m e r . . 1 . o f D i 8 e a s e s o f C h i l d r e n , 1 1 , N o . 3 .