AVENÇOS EN

REPRODUCCIÓ ASSISTIDA

Dr. Xavier Saura

www.cgo.cat

www.fecunmed.com3 de decembre de 2015

Centres de R.A.: Missió

Diagnòstic de les causes d’esterilitat

• Tractaments per sol.lucionar esterilitat

• amb Medicaments

• amb Cirurgia

• amb Tècniques de Reproducció Assistida

– Inseminació Artificial amb semen de parella (IAC)

– Inseminació Artificial amb semen de donant (IAD)

– Fecundació In Vitro (FIV)

• Tractaments per evitar la transmissió de malalties genètiques o infeccioses a la futura descendència

• Consultes

• Laboratori d’Andrologia

• Laboratori de Fecundació In Vitro

• Quiròfans i hospitalització

• Serveis col·laboradors

Centres de R.A.: Requeriments físics

Consultes

Consultes

Laboratoris d’Andrologia i de FIV

Quiròfans i hospitalització

Centres de R.A.: Requeriments humans

• Ginecòlegs

• Andròleg

• Psicòlegs

• Biòlegs - embriòlegs

• Infermeres

• Personal d’Administració

• Anestesistes

Equip humà multidisciplinar

• Enfocament al pacient (atenció personalitzada)

• Activitat permanent (7 dies a la setmana)

• Formació continuada dels professionals

• Innovació

• Control de Qualitat (ISO, SEP)

Centres de R.A.: Requeriments organitzatius

ISO 9001

Tècniques de R.A.: Indicacions

Esterilitat d’origen femení

Factor tubàric Factor ovàric

Factor uterí

Factor cervical

Tècniques de R.A.: Indicacions

Esterilitat d’origen masculí

-Oligo-asteno-teratozoospèrmies

-Azoospèrmia secretora

-Azoospèrmia obstructiva

-Factor immunològic

-Alteracions genètiques als espermatozoides

-Alteracions de l’ejaculació

•Prevenció de transmissió de malalties genètiques i hereditàries

Síndrome d’X fràgil

Fibrosi quística

Avortaments de repetició

Hepatitis

Hemofília Síndrome de Down

Distròfia muscular

SIDA

Neurofibromatosi

Corea de Huntington

Retinosis pigmentària Altres

•Prevenció de transmissió de malalties infeccioses

Tècniques de R.A.: altres Indicacions

•Reproducció a les dones sense parella masculina

•Tractament de pacients infèrtils

Dona sola Parelles homosexuals

Congelació de semen

•Preservació de la fertilitat

Vitrificació d’oòcits

• INSEMINACIÓ ARTIFICIAL (IA)

Tècniques de R.A.

• FECUNDACIÓ IN VITRO (FIV)

• IAC (amb semen de la parella)

• IAD (amb semen de donant)

Algunes modalitats:

-amb òvuls propis o amb òvuls de donant

-amb o sense Microinjecció espermàtica (ICSI)

INSEMINACIÓ ARTIFICIAL (IA)

Indicacions IAC

Etapes

1. Estimulació ovàrica

2. Capacitació espermàtica

3. Dipòsit del semen dins úter

•Factors seminals no severs

•Hostilitat moc cervical

•Problemes ovulatoris

•Esterilitat idiopàtica

•Altres

Indicacions IAD

•Absència d’espermatozoides

•Problemes genètics als espermatoz.

•Dones sense parella masculina (IAD)

•Altres

Fol.licle dominant

Ovulació

Cicle menstrual en un cicle natural

Regla

IAC / IAD 1.- Estimulació ovàrica

Fol.licles degenerant

Fol.licle ovulatori

Fol.licles degenerats

Cicle menstrual en un cicle ESTIMULAT suaument

Regla

IAC / IAD 1.- Estimulació ovàrica

Fol.licles ovulatoris

Fol.licles degenerats

INSEMINACIÓ

Fol.licles degenerant

Fol.licles dominants

MEDICACIÓ HORMONAL

Resultat

IAC / IAD 2.- Capacitació espermàtica

IAC / IAD 3.- Dipòsit de semen capacitat dins l’úter

IAC / IAD Resultats

0

10

20

30

40

50

60

70

IAM IAD

%Embaràs per cicle

%Embaràs per pacient

FIV (FECUNDACIÓ IN VITRO)

Indicacions

Etapes

1. Estimulació ovàrica

2. Extracció dels òvuls (Punció fol.licular)

3. Obtenció i capacitació d’espermes

4. Unió dels òvuls amb espermes (ICSI)

5. Cultiu embrionari

6. Transferència embrionària

… Criopreservació embionària

•Trompes obstruïdes

•Factors masculins severs

•Endometriosi

•Esterilitat idiopàtica

•Fracàs de les Inseminacions

•Altres

Altres indicacions

•Ús d’òvuls de donant

•Diagnòstic Genètic Preimplantacional

•Infeccioses

•Preservació de la fertilitat

Cicle menstrual en un cicle ESTIMULAT intensament

Regla

FIV 1.- Estimulació ovàrica

Fol.licles ovulatoris

Fol.licles degenerats

PUNCIÓ

FOL.LICULAR

Fol.licles degenerant

MEDICACIÓ HORMONAL

Fol.licles dominants

FIV 2.- Extracció d’òvuls

FIV: Cronologia

DIA 0 DIA +1 DIA +2 DIA +3 DIA +4 DIA +5 DIA +6

2. EXTRACCIÓ DELS ÒVULS1. ESTIMULACIÓOVÀRICA

6. TRANSFERÈNCIA EMBRIONÀRIA

5. CULTIU EMBRIONARI

4. UNIÓ ÒVULS-ESPERMES (ICSI)

3. OBTENCIÓ I CAPACITACIÓ D’ESPERMES

FIV 3.- Capacitació espermàtica

FIV 4.- Unió dels òvuls amb espermes

Exposició convencional òvuls-espermes Microinjecció espermàtica (ICSI)

FIV 5.- Cultiu embrionari

Dia +0 Dia +1 Dia +2 Dia +3

Dia +4Dia +5Dia +6

EMBRYOSCOPE

• L’Embryoscope és un incubador ultramodern especialment adaptat al

cultiu embrionari de FIV que té com a principal novetat tecnològica la

incorporació d’un microscopi al seu interior i un sistema

d’il·luminació i captació d’imatge programable. L’aparell capta i

registra imatges a diferents plans de tots els embrions cada 15 minuts.

L’Embryoscope que és l’incubador pròpiament dit, i pot acollir fins a 6 plaques de

cultiu de diferents pacients, amb 12 embrions a cada placa.

• Està format per 2 mòduls: Embryoscope i EmbryoViewer

L’EmbryoViewer que és el mòdul de magatzematge, processament i anàlisi de les

imatges captades per l’Embryoscope i de les dades de les condicions d’incubació.

Permet fer anotacions cronològicament ordenades de cadascun dels estadis cel·lulars

i fenòmens observats al llarg del desenvolupament.• El sistema requereix una metodologia de treball

i unes plaques de cultiu específiques

Què ens aporta

l’EmbryoScope?

• Condicions ambientals/cultiu embrionari

molt més estables (37ºC i 6% CO2 ,5% O2)

NO manipulació dels embrions

• Informació completa del procés de

divisió embrionària

• Nou concepte i paràmetres de selecció

dels embrions

CINÈTICA EMBRIONÀRIA

• Més informació per a les parelles

EMBRYOSCOPE

FIV 6.- Transferència embrionària

FIV Resultats

0

10

20

30

40

50

60

70

%

<35 35-37 38-40 >40 Donació òvuls

Edat

Taxa d'embaràs segons edat a FecunMed

%Embaràs/Trànsfer

%Embaràs evolutiu

%Avort/Ectòpic

* Resultats auditats per la Sociedad Española de Fertilidad (2009 – 2010)

Podeu consultar aquests resultats a la web: www.sefertilidad.com

• Donant oòcits:

– Edat, quimioteràpia, extirpació

d’ovaris, malalties genètiques,

•Donant semen:

–azoospèrmia, problemes genètics als espermes, dones sense parella masculina…

QUAN ELS GÀMETES PROPIS NO FUNCIONEN…

• Espermatozoides

• Oòcits

• Embrions

CRIOPRESERVACIÓ (Congelació i Vitrificació)

CRIOPRESERVACIÓ (Vitrificació)

-Crioprotector en altes concentracions

-Baix volum del medi de vitrificació (0.25ml)

-Altíssima velocitat congelació: -107 ºC/segon (-196ºC)

Mètode ràpid de congelació:

1-Biòpsia embrionària

DIAGNÒSTIC GENÈTIC PREIMPLANTACIONAL

- 1 sola cèl·lula

-Resultat al mateix cicle

CONSIDERACIONS

-Només sobre embrions de

bona qualitat

-Possibles fonts d’error:

-limitacions de la tècnica

-mosaicisme

En cas d’embaràs, fer Diagnòstic

Prenatal

DIAGNÒSTIC GENÈTIC PREIMPLANTACIONAL

2- CGHa

ADN normalADN problema

Hibridació competitiva

normal

excésdefecte

làser

- Es poden estudiar els 24 cromosomes

- S’estudien diferents zones dels cromosomes

- Sense estudi d’informativitat en reorganitzacions

(si >1MB)

- Cost per embrió o per trams d’embrions

INTEGRITAT DNA ESPERMÀTIC

Què és la FRAGMENTACIÓ del DNA

És un paràmetre independent i complementari als paràmetres tradicionals de

mesura del potencial de fertilitat seminal (concentració, mobilitat i morfologia espermàtica)

Els embrions generats amb espermes que presenten el seu DNA fragmentat tenen

més possibilitats de tenir baixa qualitat i/o baix potencial d’implantació

Com influeix en la fertilitat

És la presència de talls o de pèrdues de material a la cadena del DNA de l’espermatozoide

INTEGRITAT DNA ESPERMÀTIC

Tècnica que permet separar espermatozoides “sans” dels apoptòtics(espermatozoides que han entrat en un procés de “mort cel.lular programada”

i que tenen alta taxa de fragmentació del seu DNA)

Columnes d’Annexina o MACS (Magnetic Activated Cell Sorting)

Espermatozoide apoptòtic

(externalitza Fosfatidilserina a la membrana)

Espermatozoide no apoptòtic

Annexina acoplada a

esferes metàl.liques

(“beads”)

Solució enriquida

d’espermatozoides d’alta qualitat

Gràcies per la vostra atenció !

www.cgo.catwww.fecunmed.com