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  • 8/10/2019 Aula_DNA Odonto Forense

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    Aula DNA Forense

    Arthur Estivalet Svidzinski

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    Odontologia. 1. Percia odonto-legal, peritos, documentos mdicos, laudospericiais, modelos e interpretao, tica odontolgica. 2. Percia odontolgica nosforos civil, penal, trabal ista e administrativo. !. "ocumentao odontolgica. #.

    $arcas de mordidas% metodologias de coleta e estudo comparativo. &. 'rimes deles(es corporais% art. 12) do 'P* e as percias odontolgicas das les(es doaparel o estomatogm+tico. . Os arcos dent+rios na identificao. . stimativado se/o, idade e estatura por meio do estudo dos dentes. 0. *iotipologia. ).cnicas de identificao utili ando o "34. 15. cnicas de biologia molecular%tcnica de P'6, P'6 em tempo real, eletroforese, se7uenciamento de "34. 11.raumatologia forense% energias de ordem mec8nica, energias de ordem fsica,energias de ordem 7umica, energias de ordem fsico-7umica. 12. stimativa dese/o, estatura, idade, fentipo, cor da pele, por meio do estudo do cr8nio. 1!.3o(es de tanatologia. 1#. 9e/ologia forense% estupro e atentado violento aopudor .

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    ). cnicas de identificao utili ando o "34. 15. cnicasde biologia molecular% tcnica de P'6, P'6 em tempo real,eletroforese, se7uenciamento de "34.

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    1.!. *iologia $olecular% transcrio, traduo,replicao, mutao, recombinao e reparo do "34,e/presso g:nica. 1.#. cnicas de *iologia $olecular%tcnica de P'6, P'6 em tempo real, eletroforese,se7uenciamento de "34; tcnicas de identificaousando o "34. 1.&. -?einberg, estrutura de popula(es,an+lise filogentica, padr(es de erana gentica,seleo natural, mutao, deriva, flu/o g:nico.

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    Mendel - 1864

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    Watson e Crick - 1953

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    Bases

    Nitrogenadas

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    Bases Nitrogenadas

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    en!tica " Conceitos #$sicos

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    os outros )0,&ABO "34 no codificante composto principalmentede se7u:ncias altamente repetitivas e aos poucos

    as suas fun(es vo sendo descobertasPor e/mplo, as se7uencias Alu e %1 representam20A do genoma umano

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    Organismo aman o em pb

    Virus Fago &,2 mil

    Escherichia coli #, mil (es

    Homo sapiens !,2 bil (es

    Amoeba proteus 5 bil (es

    &a'an(o do geno'a de di)erentes organis'os

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    *rganis'o N+'ero de cro'osso'os

    "rosfila 0

    $in oca !2=omem #

    *orboleta !05

    N+'ero de cro'osso'os de di)erentes organis'os

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    3o incio do proCeto genoma acreditava-se 7ueo genoma umano codificava algo em torno

    de 155 a 125 mil genes.

    =oCe sabe-se 7ue esse nDmero no passa de25 a !5 mil genes

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    'romossomos omlogos%'romossomos 7ue formamum EparF em espcies

    diplides.

    Gm omlogo de origemmaterna e outro paterna

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    4lelo @ Gma das Evers(esF de um mesmogene

    /emplo% 9istema 4*O 4lelos% H 4, H* e i

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    en,ti o % 'onCunto de informa(esgenticas de um indivduo

    Fen,ti o % 'onCunto de manifesta(esfsicas relacionadas a essas informa(es

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    .o'o/igose % Iuando o indivduoapresenta os alelos iguais% 44, ii, JJ

    .etero/igose % Iuando o indivduoapresenta dois alelos diferentes% 4a, H 4i, JK

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    en!tica " Conceitos #$sicos

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    en,ti o Fen,ti o

    0A0A angue ti o 2A

    0Ai angue ti o 2A

    0A0B angue ti o 2AB

    ii angue ti o 2*

    e' lo

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    en!tica " Conceitos #$sicos

    Cru/a'entos % 4valiao dos possveisgentipos dos descendentes a partir do

    gentipo dos seus genitores.

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    en!tica " Conceitos #$sicos

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    4 respeito da nature a 7umica e da funcionalidade do "34, Culgue os itenssubse7Lentes%

    - O conteDdo informacional do "34 reside na se7L:ncia em 7ue suasunidades monomricas esto ordenadas.

    - spcimes de "34 isolados de diferentes tecidos da mesma pessoapossuem a mesma composio de bases.

    - "urante a desnaturao do "34 so 7uebradas as liga(es covalentes

    presentes em sua estrutura.- 3as molculas de "34 dos eucariotos, a ocorr:ncia das bases < M '

    apro/imadamente igual N de M 4.

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    ea7 o de C

    Polimerase ' ain 6eaction

    $todo de amplificao de "34 invitro

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    Ciclo Celular

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    ea7 o de C

    Gtili ada em situa(es em 7ue precisotrabal ar com 7uantidades muito pe7uenasde "34

    4mplifica se7u:ncias especficas de "34Processo reali ado em v+rios ciclos

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    ea7 o de C

    "34 a ser amplificadoPrimers @ or ard e 6eversed3 Ps @ 3ucleotdeos"34 Polimerase

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    ea7 o de C

    ri'ers % Hniciadoresda duplicao de "34

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    ea7 o de C

    oli'erase %"uplica uma fita

    simples de "34

    3ecessita de umase7u:ncia iniciadora

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    ea7 o de C

    &a: oli'erase % n ima polimerase domicro-organismoThermus aquaticus

    emperatura de duplicao de 5 a 2Q'

    4diciona uma adenina ao final da duplicaoda se7u:ncia de "34

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

    1R ase% 47uecimento a mais de )5Q' para aseparao da dupla fita

    9epara tanto a ita de "34 original 7uantoos produtos de amplificao

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

    2R ase% 4nelamento dos primers=ibridi aoemperatura varia entre #5 a 5Q' conforme

    o par de primers"etermina a especificidade da ligao

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

    !R ase% /tenso dos primers @ "uplicaodo "34

    emperatura tima em torno de 2Q'

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

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    ea7 o de C

    4o final da reao, a 7uantidade de "34amplificado em relao ao "34 inicial igual a2n, sendo 7ue nS nDmero de ciclos da P'6

    /emplo% P'6 de 2) ciclos%22)S &! .0 5.)12 cpias para cada fita original

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    ea7 o de C

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    ea7 o de Cfeito Plateau% desvio da 7uantidade tericaPerda da atividade da Polimerase

    4cDmulo de inibidoresTimitao dos componentes

    'ompetio entre produtosPareamento Produto / $olde,'ompetio com anelamento do primer

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    ea7 o de C

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    m uma investigao de estupro seguido de morte, na tentativa de identificao docriminoso por meio da tcnica de reao em cadeia da polimerase UP'6V, osinvestigadores coletaram material Cunto ao corpo da vtima. 4 respeito desse assunto,

    Culgue os itens seguintes%

    - 9angue, cabelo e s:men encontrados no local do crime constituem material compotencial para fornecimento de "34 para a reali ao da tcnica de P'6.

    - 4 tcnica de P'6 possibilita a clonagem de se7L:ncias especficas de "34, deforma r+pida, numerosa e sem a necessidade de uma clula viva.

    - Por ser bastante simples, a tcnica de P'6 dispensa o uso de luvas descart+veis,

    reagentes e solu(es de alta 7ualidade ou micropipetas de uso e/clusivo.- Hndependentemente da tcnica de P'6, a presena de espermato ides do

    criminoso em esfregao vaginal da vtima de estupro possibilita a identificao ine7uvocadeste.

    - 4lm da molcula de "34, o 634 tambm pode ser usado como mo