AULA PRÁTICA 03

ASPECTOS CITOLÓGICOS DO MATERIAL GENÉTICO: CROMATINA SEXUAL E CROMOSSOMOS

INTRODUÇÃO

Cromossomos e cromatina são dois estados morfológicos das mesmas entidades celulares de eucariontes, responsáveis pelo armazenamento, transmissão e expressão das informações do patrimônio hereditário. Antes de Mendel, em 1865, publicasse suas observações sobre a transmissão de certos caracteres, os citologistas já haviam mostrado que durante a divisão celular, surgiram estruturas alongadas, posteriormente denominadas cromossomos. Em 1981, Balbiani descobriu os cromossomos politênicos em células de glândula salivar do díptero Chironomus e Flemming encontrou cromossomos plumados em ovócitos do anfíbio Siredon.

Nos primeiros anos deste século foi estabelecida a Teoria cromossômica da Herança por Sutton e cols. e, desde então, o estudo dos cromossomos expandiu-se enormemente, penetrando em vários outros campos da Biologia, como a Taxonomia, a bioquímica, a Medicina Clínica e Melhoramento Animal e Vegetal. Adaptado de VIDAL & MELLO (1987) e GERRA, (1988).

OBJETIVO PRINCIPAL

Identificar o corpúsculo de Barr em células da mucosa bucal, interpretando a sua ocorrência.

MATERIAL

−água mineral −luvas descartáveis−béquer de 100ml −microscópio óptico−conta-gotas −óleo de imersão−discos de papel de filtro −relógio−espátulas descartáveis −solução de orceína acética a 2%−lâminas −lamínulas−lâminas definitivas de cromossomos humanos−lâminas definitivas de cromossomos vegetais (10mL)

PROCEDIMENTOS

A - Observação do corpúsculo de Barr (cromatina sexual)

1. Bocheche com água potável a fim de limpar a cavidade bucal;2. Como auxílio de uma espátula, raspe a face interna (mucosa) da bochecha;3. Despreze o material mucoso obtido e raspe a novamente, na mesma região;4. Deposite o material coletado em uma lâmina limpa e, em seguida, pingue uma gota de solução de orceína acética sobre a mesma;5. Cubra o material com uma lamínula limpa e deixe corar por 10 minutos;6. Coloque a lâmina entre dois discos de papel de filtro dobrado, e numa superfície perfeitamente plana, proceda ao esmagamento do material, pressionando a lamínula comoo dedo polegar;7. Leve a preparação ao microscópio e movimente a platina, percorra o campo a fim de localizar as células. Faça observações com as objetivas de médio e maior aumentos;8. Observe atentamente o núcleo das células e identifique o corpúsculo de Barr, caracterizando-o.

B - Observação de cromossomos humanos e de vegetais

1. Focalize as lâminas definitivas e observe-as com as objetivas de médio e maior aumento. Percorra o campo e, ao encontrar uma metáfase, examine a preparação com a lente de imersão.2. Identifique os tipos morfológicos dos cromossomos observados e faça desenhos esquemáticos correspondentes aos mesmos.

ATIVIDADES

A partir de suas observações e com base na leitura da bibliografia recomendada, responda às questões que se seguem:

1. Identifique citologicamente corpúsculos de Barr, explicando a sua ocorrência apenas em células fêmeas.2. Classifique o corpúsculo de Barr quanto ao tipo de cromatina.

REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA

1. BORGES-OSÓRIO M. R. & ROBINSON, W. M. Genética humana. 2. ed. Porto Alegre:Artmed Editora, 2001.2. UFES. Roteiro de aula prática: aspectos citológicos do material genético (cromatina sexual e cromossomos humanos). Disciplina Biologia Geral.