astaxanthin from yeast affect on increasing the red color rate of male guppy
Post on 19-Oct-2014
5.100 views
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
สาร สาร astaxanthin astaxanthin จากจากยี�สต์มี�ผลต์�อการเร�งส�แดงยี�สต์มี�ผลต์�อการเร�งส�แดงของปลาหางนกยี�งเพศผ��ของปลาหางนกยี�งเพศผ��
นายชลรวี� หาญล�ายวีงนายชลรวี� หาญล�ายวีงนายวีงศกร เหมพั�นธ์�นายวีงศกร เหมพั�นธ์�นายอธ์�ษฐ์� ช�ตวีรากรนายอธ์�ษฐ์� ช�ตวีรากร
โรงเร�ยนมห�ดลวี�ทยาน�สรณ์�โรงเร�ยนมห�ดลวี�ทยาน�สรณ์�
อาจารยีที่��ปร�กษาในการอาจารยีที่��ปร�กษาในการที่!าโครงงานที่!าโครงงาน
อาจารย�ท�"ปร$กษา อาจารย�ท�"ปร$กษา : : อาจารย�อาร�ย� ส�กย�%มอาจารย�อาร�ย� ส�กย�%ม
ท�"มาและควีามส�าค�ญท�"มาและควีามส�าค�ญ ปลาหางนกย)งปลาหางนกย)ง
ช*"อทางวี�ทยาศาสตร� : Poecilia reticulata
ปลาต�วีผู้),ม�ขนาด 3 -5 เซนต�เมตร Family : Poecidae
ที่��มีาและความีส!าค&ญ ที่��มีาและความีส!าค&ญ ((ต์�อต์�อ))
ส�ส�นของปลาส�ส�นของปลา
Phaffia rhodozymaPhaffia rhodozyma
ที่��มีาและความีส!าค&ญ ที่��มีาและความีส!าค&ญ((ต์�อต์�อ))
ท�"มาและควีามส�าค�ญ ท�"มาและควีามส�าค�ญ ((ต/อต/อ)) สาร สาร astaxanthinastaxanthin
ว&ต์ถุ)ประสงคว&ต์ถุ)ประสงค ศ$กษาสาร ศ$กษาสาร astaxanthin astaxanthin ในย�สต� ในย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ม�ม�ผู้ลต/อการเร/งส�ในปลาหางนกย)งเพัศผู้),ผู้ลต/อการเร/งส�ในปลาหางนกย)งเพัศผู้),
อ)ปกรณ์และสารเคมี�อ)ปกรณ์และสารเคมี�ชื่,�อสารเคมี�ชื่,�อสารเคมี� บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์GlucoseGlucoseชื่,�ออ)ปกรณ์ชื่,�ออ)ปกรณ์ บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์ขวีดเล�%ยงเซลล�ขนาด ขวีดเล�%ยงเซลล�ขนาด 250 250 ม�ลล�ล�ตรม�ลล�ล�ตร
™NUNCLON ™NUNCLON DDDDDDDDDD DDDDDD DDDDDDD DDDDDD(250 ) DDDDDD DDDDDDD DDDDDD(250 )
หลอดป2" นเหวี�"ยงขนาด หลอดป2" นเหวี�"ยงขนาด 1010 ม�ลล�ล�ตรม�ลล�ล�ตร ® ... ® ... (Oak Ridge Centrifuge tube (Oak Ridge Centrifuge tube11 0ml) 0ml)
อาหารปลาอาหารปลา ไฮเกรดไฮเกรด
อ)ปกรณ์และสารเคมี� อ)ปกรณ์และสารเคมี� ((ต์�อต์�อ))ชื่น.ดเคร,�องมี,อชื่น.ดเคร,�องมี,อ บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์บร.ษ&ที่ผ��ผล.ต์กล,องถ่/ายภาพัด�จ�ตอลจากม*อถ่*อกล,องถ่/ายภาพัด�จ�ตอลจากม*อถ่*อ NOKIANOKIA(Nokia N70)(Nokia N70)เคร*"องน$"งควีามด�นฆ่/าเช*%อจ�ลเช*%อจ�ลล�นทร�ย�เคร*"องน$"งควีามด�นฆ่/าเช*%อจ�ลเช*%อจ�ลล�นทร�ย� HIRAYAMA, HIRAYAMA,
JAPANJAPAN (Autoclave)(Autoclave)เคร*"องป2" นเหวี�"ยงเคร*"องป2" นเหวี�"ยง CECILCECIL(C(Centrifugeentrifuge)) ต),ปลอดเช*%อต),ปลอดเช*%อ SCIENCETECH COMPANYSCIENCETECH COMPANY(Incubator)(Incubator)Incubator ShakerIncubator Shaker PANAPOLY TECHPANAPOLY TECH
ว.ธี�ที่!าการที่ดลองว.ธี�ที่!าการที่ดลอง การเพัาะเล�%ยงย�สต� การเพัาะเล�%ยงย�สต� Phaffia Phaffia rhodozymarhodozyma ท�าอาหารเล�%ยงเช*%อส)ตร PDB
น�าย�สต�ปร�มาณ์ 1 ม�ลล�ล�ตร ไปเล�%ยงในขวีดร)ปชมพั) /ขนาด 250 ม�ลล�ล�ตร ซ$"งม�ประมาณ์อาหารเล�%ยงเช*%อส)ตรPDB อย)/
150 ม�ลล�ล�ตร
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ))
น�าไปเพัาะเล�%ยงใน SHAKER ควีามเร8วี 150 รอบต/อนาท� อ�ณ์หภ)ม�ไวี,ท�" 30
องศาเซลเซ�ยส เป:นเวีลา 7 วี�น
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ)) การการสก�ดย�สต�สก�ดย�สต�
น�าย�สต�ท�"อย)/ในอาหารเล�%ยงเช*%อส)ตร PDBใส/หลอดป2" นเหวี�"ยง 10 ม�ลล�ล�ตร
น�าไปป2" นเหวี�"ยงด,วียควีามเร8วี 3000 รอบต/อนาท� เป:นเวีลา 15 นาท� แล,วีร�นอาหาร
เล�%ยงเช*%อท�%ง
น�าสารละลายย�สต�ท�"ได,ไปป2" นเหวี�"ยงด,วียควีามเร8วี 3000 รอบต/อนาท� เป:นเวีลา
15 นาท� ร�นเก8บเฉพัาะส/วีนท�"เป:นย�สต� จนได,ย�สต�ปร�มาณ์ตามท�"ต,องการ
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ)) การผู้ล�ตอาหารซ$"งม�ส/วีนผู้สมของ การผู้ล�ตอาหารซ$"งม�ส/วีนผู้สมของ
astaxanthin astaxanthin น�าอาหารปลาส�าเร8จร)ปชน�ดเม8ดเล8ก มาคล�กก�บสารละลาย ย�สต� ปร�มาณ์ 50, 100 และ 200 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม
น�าไปอบแห,งด,วียเตาอบ อ�ณ์หภ)ม� 60 องศาเซลเซ�ยส เป:นเวีลา 24 ช�"วีโมง เก8บ
ไวี,ในท�"อ�ณ์หภ)ม�ห,อง แห,ง และม*ด
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ)) การเล�%ยงปลาหางนกย)งการเล�%ยงปลาหางนกย)ง
เล�%ยงปลาหางนกย)งจ�านวีน 180 ต�วีท�"ม�ส�ใกล,เค�ยงก�น ในถ่�งเล�%ยงจ�านวีน 12 ถ่�ง แต/ละบ/อจะม�ปลาจ�านวีนบ/อละ 15 ต�วี
ก�าหนดบ/อท�" 1 เป:นบ/อควีบค�ม บ/อท�" 2, 3 และ 4 ให,อาหารท�"ม�ส/วีนผู้สมของ astaxanthin 50, 100 และ 200
ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มตามล�าด�บ จ�านวีน 3 ซ�%า เป:นระยะเวีลา 21 วี�น
ท�าการบ�นท$กผู้ลของส�ปลาหางนกย)งท�กๆ 7 วี�น
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ)) การบ�นท$กส�การบ�นท$กส�
บ�นท$กภาพัปลาหางนกย)งท�ละต�วี เพั*"อน�าไปวี�เคราะห�ส�โดยใช,โปรแกรม MVH PC
image V.8
น�าค/า %R, %G และ%B มาเปล�"ยนเป:นค/า R G B เพั*"อเข,าส)ตรค�านวีณ์ค/าเบ�"ยงเบนส�แดง ER2G2B22
วี�เคราะห�ค/า E วี/าม�ค/าเบ�"ยงเบนไปจากส�แดง R 255 G0 B0 เท/าไร
ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ว.ธี�ที่!าการที่ดลอง ((ต์�อต์�อ)) การบ�นท$กส�การบ�นท$กส� วี�ธ์�การค�านวีณ์หาค/าเบ�"ยงเบนจากส�แดง วี�ธ์�การค�านวีณ์หาค/าเบ�"ยงเบนจากส�แดง ((E)) จากสมการ จากสมการ ER2G2B22
R = (R สาร – R standard) R สาร = %R x 255
G = (G สาร – G standard) G สาร = %G x 255
B = (B สาร – B standard) B สาร = %B x 255
R standard = R ของส�แดง = 255
G standard = G ของส�แดง = 0
B standard = B ของส�แดง = 0
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดควีบค�ม ช�ดควีบค�ม (( ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ))อ�ตราการตาย อ�ตราการตาย 0.33 0.33 ต�วีต/อวี�นต�วีต/อวี�น
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดควีบค�ม ช�ดควีบค�ม (( ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ))
วี�นท�" 1
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดควีบค�ม ช�ดควีบค�ม (( ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ))
วี�นท�" 8
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดควีบค�ม ช�ดควีบค�ม (( ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ))
วี�นท�" 15
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดควีบค�ม ช�ดควีบค�ม (( ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ไม/ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma ))
วี�นท�" 21
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 11(( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 50 50 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
อ�ตราการตาย อ�ตราการตาย 0.43 0.43 ต�วีต/อวี�นต�วีต/อวี�น
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 11(( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 50 50 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 1
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 11(( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 50 50 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 8
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 11(( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 50 50 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 15
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 11(( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 50 50 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 21
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�"ช�ดท�" 2 2 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 100 100 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
อ�ตราการตาย อ�ตราการตาย 0.57 0.57 ต�วีต/อวี�นต�วีต/อวี�น
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�"ช�ดท�" 2 2 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 100 100 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 1
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�"ช�ดท�" 2 2 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 100 100 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 8
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�"ช�ดท�" 2 2 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 100 100 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 15
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�"ช�ดท�" 2 2 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 100 100 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 21
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 33 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia Phaffia
rhodozymarhodozyma 200 200 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
อ�ตราการตาย อ�ตราการตาย 3 3 ต�วีต/อวี�นต�วีต/อวี�น
ผลการที่ดลองผลการที่ดลองผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งผู้ลการวี�ดควีามเข,มส�ของปลาหางยกย)งช�ดท�" ช�ดท�" 33 (( ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� ม�ส/วีนผู้สมของย�สต� Phaffia rhodozymaPhaffia rhodozyma
200 200 ม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�มม�ลล�กร�มต/อก�โลกร�ม))
วี�นท�" 1
ผลการที่ดลองผลการที่ดลอง ผู้ลการวี�ดค/าควีามเบ�"ยงเบนจากส�แดง ผู้ลการวี�ดค/าควีามเบ�"ยงเบนจากส�แดง ((E ) ) จากจาก
ตารางเปร�ยบเท�ยบค/าเบ�"ยงเบนของส�ปลาหางนกตารางเปร�ยบเท�ยบค/าเบ�"ยงเบนของส�ปลาหางนกย)งท�%ง ย)งท�%ง 4 4 คร�%งของ คร�%งของ 4 4 ช�ดการทดลองช�ดการทดลอง
ตารางเปร�ยบเท�ยบค/าเบ�"ยงเบนของส�ปลาหางนกย)งท�%ง 4 คร�%งของ 4 ช�ดการทดลอง
ผลการที่ดลอง ผลการที่ดลอง กราฟเปร�ยบเท�ยบค/า กราฟเปร�ยบเท�ยบค/า E ของช�ดควีบค�ม ช�ดท�" ของช�ดควีบค�ม ช�ดท�" 1 1
และ และ 22 ท�%ง ท�%ง 4 4 คร�%งคร�%ง
160
165
170
175
180
185
1st Qtr 2nd Qtr 3rd Qtr 4th Qtr
ควบค)มี ชื่) ดที่�� 1
ชื่) ดที่�� 2
กราฟ แสดงค�าการเปล��ยีนแปลงของค�าเบ��ยีงเบนแต์�ละชื่)ดการที่ดลองในคร&1งที่�� 1, 2, 3 และ
4
สร)ปและว.เคราะหผลการที่ดลองสร)ปและว.เคราะหผลการที่ดลอง สาร สาร astaxanthin astaxanthin สามารถ่เร/งส�แดงปลาหางสามารถ่เร/งส�แดงปลาหาง
นกย)งเพัศผู้),ได, โดยควีามเข,มข,น โดยสาร นกย)งเพัศผู้),ได, โดยควีามเข,มข,น โดยสาร astaxanthin astaxanthin ท�"มากข$%นจะสามารถ่เร/งส�แดงได,ด�ท�"มากข$%นจะสามารถ่เร/งส�แดงได,ด�ข$%นข$%น
เอกสารอ�างอ.งเอกสารอ�างอ.งการใชื่�สารแอสต์าแซนที่.นจากยี�สต์ Phaffia rhodozyma ก&บก)�งก)ลาด!า Penaeus monodon
Fabricius. [ออนไลน�]. ได,จาก http://shrimpbase.fish.ku.ac.th/display_abs_t.php?id=176ส�ดสายชล หอมทอง. 2541. การผล.ต์ Astaxanthin จากสาหร�ายี Haematococus sp.
ปร�ญญา วี�ทยาศาสตร� มหาบ�ญฑิ�ต (จ�ลช�วีวี�ทยา) สาขาจ�ลช�วีวี�ทยา ภาควี�ชา จ�ลช�วีวี�ทยา มหาวี�ทยาล�ยเกษตรศาสตร�สภาวะที่��เหมีาะสมีในการผล.ต์ Astaxanthin ของยี�สต์ Phaffia Rhodozyma [ออนไลน�]. ได,จาก
http://www.kmutt.ac.th/rippc/biomass.htmผลการที่บของแหล�งแสงที่��มี�ผลต์�อการผล.ต์แอสต์าแซนที่.นโดยีใชื่� Phaffia rhodozyma [ออนไลน�].
ได,จาก http://www.scisoc.or.th/stt/33/sec_b/paper/stt33_B4_B0019.pdfEffect of Feeding Methods on the Astaxanthin Production by in fed-batch Process Phaffia
Rhodozyma [On-line]. Available: http://www.scielo.br/pdf/babt/v48n3/24762.pdf
เอกสารอ�างอ.ง เอกสารอ�างอ.ง ((ต์�อต์�อ))Andrewes et al.1976. (3R,3’R)-Astaxanthin From The Yeast Phaffia rhodozyma,
Phytochemistry 15:1009-1011Gio-Bin Lim, Sang-Yun Lee, Eun-Kyu Lee, Seung-Joo Haam and Woo-Sik Kim. (2002).
Separation of Astaxanthin from red yeast Phaffia Rhodozyma by supereritical carbon dioxide extraction. Biochemical Engineering Journal, 11: 181-187.Guppy [On-line]. Available: http://www.petco.com/caresheets/fish/Guppy.pdfVerlhac V,N’Doye A, Gabaudan J, Troutaud D, Deschaux P. 1991. Vitamin nutrition and fish
immunity: influence of antioxidant vitamins (C and E) on immune response of rainbow trout. En Kaushik SJ, Luquet P (Eds.) Fish Nutrition in Practic. INRA. Paris, Francia. pp. 167-177EricA.Johnson. Phaffia rhodozyma : colorful odyssey. Microbiol(2003) 6:169-174.