Apoptosis

Unaformademuertecelularprogramada:unprogramaintracelularseac4vay,enformacontrolada,llevaalacélulaala

muerte.

Apoptosis≠Necrosis

FuncionesdelaApoptosis1)  Desarrollo:esculpirórganosypartesdel

cuerpo

1)Desarrollodelsistemanervioso

2)SistemaInmume:eliminacióndecélulasinmunesautoreac4vasycélulasinmunesyau4lizadas

FuncionesdelaApoptosis

3)Homeostasis:mantenerelnúmerodecélulas4)Eliminarcélulasdañadasoinfectadas

Apoptosisyenfermedad

Supervivenciacelular/Proliferación

Apoptosis

Apoptosisyenfermedad

Apop

tosis

CáncerEnfermedadesAutoinmunesAp

optosis Desórdenesdegenera4vos

(Alzehimer,Parkinson)SIDA(eliminacióndelinfocitosT)Isquemiayreperfusión

Feno6poapoptó6co•  Reduccióndelvolumencelular•  Degradacióndelaláminanuclear•  “Blebbing”delamembranacelular•  Formacióndecuerposapoptó4cos

Feno6poapoptó6co(marcadoresbioquímicos)

Condensacióndelacroma4na Flip-Flopdefosfa4dilserina

Flip-Flopdefosfa4dilserina

Feno6poapoptó6co(marcadoresbioquímicos)

FragmentacióndelADN

Ac4vacióndeCASPasas

AnálisisdellinagecelularenC.elegans:iden6ficacióndelabasegené6cadelaapoptosis

1090célulassomá4cascigoto

959célulaseneladulto

131célulasmuerenduranteeldesarrollo

RobertHorvitz

VíadelaapoptosisenC.elegans

Egl1(BH3-only)

Ced-9(Bcl-2)

Ced-4(Apaf-1)

Ced-3(Caspase-9)

Apoptosis

TranslocacióncromosomalyLinfomaFolicular

Vauxetal,Nature,1988

CélulasBnormales

CélulasBLF

SinIL-3

LaFamiliadeproteínasBcl-2

Ac4vacióndeCaspasasporproteólsis

Procaspasainiciadora

Procaspasasejecutoras

Proteínas“target”

láminanuclear ProteínasdelcitoesqueletoYdeadhesióncélula-célula

FragmentacióndelADN

Procaspasainiciadora

Procaspasasejecutoras

Proteínas“target”

láminanuclear ProteínasdelcitoesqueletoYdeadhesióncélula-célula

XiaodongWang(UniversityofTexas)

ReproducirinvitroloseventosinicialesdelaApoptosis

Célulasenbufferhipotónico Centrifugacióna100.000xG

ColumnadeFosfoCelulosa

Apaf-1yApaf-3 Apaf-2

Sobrenadante(S-100)

Columnadehidroxipa4ta

Apaf-1 Apaf-3 Liuetal.,Cell,1996

Cadenadetransporteelectrónico

Mitocondria

Célulasenbufferhipotónico Centrifugacióna100.000xG

ColumnadeFosfoCelulosa

Apaf-1yApaf-3 Apaf-2(citocromoC)

Sobrenadante(S-100)

Columnadehidroxipa4ta

Apaf-1 Apaf-3

Apopto4cac4va4ngfactor1(Apaf-1)

CARD:CaspaserecruitmentdomainNBD:Nucleo4cbindingdomainWD40:protein-proteininterac4ondomains

LocalizacióncelulardeApaf-1

Apaf-1

Célulasenbufferhipotónico Centrifugacióna100.000xG

ColumnadeFosfoCelulosa

Apaf-1yApaf-3 Apaf-2(citocromoC)

Sobrenadante(S-100)

Columnadehidroxipa4ta

Apaf-1 Apaf-3

Caspasas:alineamiento

CARD:CaspaserecruitmentdomainDED:Deatheffectordomain

Apaf-3(Caspasa9)

Procaspasainiciadora(Caspasa9)

Procaspasasejecutoras(Caspasa3)

Proteínas“target”

Apoptosis:Víaintrínseca

?

LaFamiliadeproteínasBcl-2

p53

Esjmuloapoptó4co(ej.UV)

VíaExtrínsecadeApoptosisFasL

FasR

Deathdomain

¿Quésucedeconlascélulasapoptó4cas?

Apoptosisenepitelios

AnexinaV-fluorescente Incubación 37 °C 3h

Infección

P. aeruginosa

F-actinaAnexina VP. aeruginosa