MBITO FARMACUTICO

Apoptosis: muerte celular programada

En todo organismo multicelular adulto debe existir un equilibrio entre la generacin o proliferacin y la desaparicin o muerte de las clulas que lo componen, con el fin de mantener un tamao constante.La alteracin de este equilibrio conduce a situaciones patolgicas como el cncer, cuando la proliferacin se encuentra aumentada, o las enfermedades degenerativas, cuando los procesos de muerte celular estn incrementados.

esde el embrin hasta el orga- nismo adulto fisiolgicamenteD

sano, millones de clulas mueren sin dejar cicatrices ni activar clulas inflamatorias. Este fenmeno no tiene lugar de una forma aleatoria, sino que se trata de un proceso acti- vo, bien definido genticamente, en el que las clulas estn destinadas a morir en un tiempo fijado. As, los episodios que rodean a la muerte celular programada entran a formar parte de los procesos fisiolgicos que resultan necesarios para el funciona- miento normal de un organismo.Durante la historia, la muerte celular fisiolgica ha sido conocida por varios nombres. Virchow, en1858, fue el primer investigador en describir los procesos de muerte celular y, basndose slo en parme- tros macroscpicos, los defini como degeneracin, mortificacin y necro- sis. En 1879, utilizando observacio-

nes microscpicas se introducen los trminos Karyorhesis y Karyolysis, que hacen referencia a la desintegracin y desaparicin del ncleo. Diez aos ms tarde, Arnheim, propone los trminos piknosis y marginacin de la cromatina. Flemming, estudiando los folculos de los ovarios de los mamferos, observ y describi la desaparicin de clulas, denominan- do a este proceso chromatolisis, trmi- no que fue reutilizado por Grper, en 1914, como antnimo de los pro- cesos de mitosis. Pero no fue hasta1972 cuando Kerr, Wyllie y Currie implantan el trmino apoptosis, ampliamente utilizado en nuestros das, que evoca a la cada de las hojas desde los rboles en otoo o la de los ptalos de las flores. En la ltima dcada, hemos sido testigos de un crecimiento exponencial de los tra- bajos de investigacin realizados sobre los procesos que rodean a la

muerte celular y parece que se ha llegado al consenso de englobarlos en dos grandes grupos: necrosis y apoptosis.El trmino necrosis rene los procesos violentos y catastrficos, donde la degeneracin celular es pasiva sin un requerimiento de energa en forma de ATP. Aparece frecuentemente como consecuencia de un dao traumtico o por la exposicin a toxinas. En ella tiene lugar la prdida aguda de la regula- cin y de la funcin celular que con- lleva un proceso osmtico desmesu- rado y finaliza con la lisis de la membrana celular, liberando el con- tenido intracelular. Este fenmeno conduce a las clulas vecinas tam- bin hacia la muerte, atrayendo, al mismo tiempo, a las clulas inflama- torias, lo que hace que en las reas donde se observan clulas necrticas sea frecuente encontrar nuevas clu-

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las que desarrollan este tipo de muerte celular, adems de originar una reaccin de inflamacin y una cicatriz fibrosa que deforma el tejido y el rgano afectado.El segundo tipo de muerte celular es conocido como apoptosis o muer- te celular programada. En este pro- ceso las clulas se autodestruyen sin desencadenar reacciones de inflama- cin ni dejar cicatrices en los tejidos. La apoptosis es por tanto considera- da como una muerte natural fisiol-

Tabla 1. Diferencias entre los procesos de necrosis y apoptosis

Necrosis Apoptosis

Condiciones Patolgica Fisiolgica Alteraciones patolgicasTamao celular Edema RetraccinMembrana citoplasmtica Lisis, rotura Expresin de glucoprotenasMitocondria Hinchazn, rotura Funcional Degradacin del ADN Aleatoria Ordenada Requerimiento energtico No S Reaccin inflamatoria S Nogica, resultando en un mecanismo de eliminacin de clulas no desea- das, daadas o desconocidas y que desempea un papel protector frente a posibles enfermedades.Las rutas apoptticas, por tanto, intervienen en algunos procesos fisiolgicos, a saber:

Las etapas de desarrollo donde se pro- ducen clulas en exceso. En el refinamien- to de la inervacin al retirar aquellas neuronas menos capacitadas, a modo de seleccin celular darwiniana en el sistema nervioso, en la apertura de los orificios en el tubo digestivo, en la formacin de rganos como los rio- nes o en la remodelacin de los huesos y cartlagos y durante la morfognesis de los dedos en la eliminacin de las reas interdigitales. Como dato curio- so, mencionaremos que los procesos de apoptosis son los responsables de que los humanos tengamos cinco dedos en cada extremidad y que su ausencia, por ejemplo, en las aves pal- mpedas les hace conservar su caracte- rstica pata palmeada. La seleccin de linfocitos. Al mediar en la eliminacin de aque- llos que reconocen antgenos pro- pios y en la eliminacin de clulas infectadas o tumorales por histli- sis y tambin, en los mecanismos de defensa frente a tumores en que intervienen clulas que incluyen los linfocitos T citolticos, las natural killer y los macrfagos.

No obstante, dependiendo de la etiologa, los procesos apoptticos pueden resultar perjudiciales, siendo responsables de diversas afecciones (ver tabla) y su desregulacin conduce a situaciones patolgicas. As, aumen- tos en reas del sistema cardiovascular como el nodo sinusal, pueden causar arritmias paroxsticas en el nodo AV o en el haz de His pueden originar blo-

queos o reentradas y en el miocardio contrctil conducir a miocardiopatas dilatadas o displasia arritmognica. En los vasos con lesiones arterioscler- ticas, un aumento de los procesos apoptticos, puede ocasionar inestabi- lidad de las placas y contribuir, asimis- mo, en la respuesta a la lesin postan- gioplastia y originar una displasia fibromuscular focal y degeneracin de la capa media de las arterias coronarias. En pacientes con enfermedades neuro- degenerativas se ha observado una dis- minucin en el nmero de clulas en determinadas poblaciones neuronales, por ejemplo, en la enfermedad de Alz- heimer (EA) aparece una deplecin en neuronas colinrgicas del hipocampo, amgdala y corteza. En la enfermedad de Parkinson (EP) son las neuronas dopaminrgicas de la sustancia nigra y ganglios basales las afectadas, mien- tras que en enfermedades como la de Huntington son las neuronas de los ganglios basales y del tlamo y, por ltimo, en la esclerosis lateral amio- trfica (ELA) se han descrito dismi- nuciones en la poblacin de moto- neuronas. Esta prdida neuronal se refleja en la aparicin de disfunciones como alteraciones en los procesos de memoria y lenguaje en la EA, modifi- cacin en el control y la coordinacin del movimiento en la EP, disminucin en las capacidades intelectuales y apa- ricin de movimientos irregulares e involuntarios de las extremidades o de los msculos de la cara en la enferme- dad de Huntington y la progresiva paralizacin de los msculos que intervienen en la movilidad, el habla, la deglucin y la respiracin en la ELA.

Caractersticas morfolgicas

Los procesos apoptticos se caracteri- zan por cambios morfolgicos como:

Aumento brusco de la densi- dad intracelular. El retculo endo- plasmtico se dilata, formando vesculas y fusionndose con la membrana plasmtica, eliminando as su contenido al medio extrace- lular. Esta rpida, pero selectiva, salida de fluidos de iones intrace- lulares se encuentra mediada por transportadores inicos (cotrans- portador cloro-potasio-sodio, que inhibe la prdida de agua y sodio de las clulas afectadas). Incremento moderado, pero sostenido, de la concentracin de calcio libre citoplasmtica ([Ca+2] ), diferencia clara frente a los proce- sos de necrosis, donde su aumento es drstico.i

Cambios en la composicin de la membrana celular. Translocacin de grupos glicanos a la superficie celular que van a actuar como seal de reco- nocimiento, permitiendo la unin de fagocitos y, de esta manera, evitando la liberacin del contenido celular y la posible reaccin de inflamacin. Alteracin en la conformacin de elementos del citoesqueleto. Como consecuencia aparece una deformacin, resultado de la acti- vidad de las proteasas, modificn- dose el transporte intracelular retrgrado de factores de creci- miento y de protenas. Aumento y activacin de la sntesis de determinadas protenas necesarias en las rutas metablicas de los procesos de muerte celular. Condensacin y fragmentacin de la cromatina, por accin de endo- nucleasas endgenas, en fragmentos denominados oligonucleosomas.

Tcnicas de determinacin

Las tcnicas utilizadas para la deteccin de la participacin de los

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procesos de apoptosis estn basadas,

descritos en el apartado anterior. Entre ellas, las ms utilizadas son:

El uso de fluorocromos capaces

Ligando

Receptor

permiten visualizar, gracias a la ayuda del microscopio, la morfolo-

tes, como el etidio, propidio y

Genes endonucleasas

Segundos mensajeros

cia en citometra de flujo y aplica- ciones como la hipoploida hacen

Ncleo Mitocondria La microscopia electrnica que de la cromatina sin necesidad detincin especfica. La electroforesis en geles de

o de cultivos celulares que, teidos con colorantes como el yoduro de

Complejos enzimticos

Marcadores

Fagocitosisetidio, permiten el anlisis de la integridad del genoma.

Fig 1. Rutas celulares activadas durante los procesos apoptticos. La tincin TUNEL, basada en la capacidad que presentan los extremos del ADN hidrolizados por la endonucleasa a unirse a una cadena de dioxigenina dUTP. El uso de tcnicas immunolgicas permite su identificacin posterior. El marcaje de fostatidilserina en el lado extracelular de la mem- brana citoplasmtica con la prote- na annexina V.

Durante los procesos de muerte celular se pueden distinguir tres etapas: activacin, propagacin y ejecucin.

Fase de activacin

Los procesos apoptticos pueden ser activados bien por una induc- cin negativa (como la prdida de una actividad supresora, la falta de factores de crecimiento o la dismi- nucin de los contactos con las clulas que la rodean) o por una induccin positiva como es el resultado de la unin de un ligan- do a un receptor o la recepcin de seales conflictivas. Por otro lado, los mamferos presentan mecanis- mos que permiten al organismo dirigir a clulas individuales a la autodestruccin, apoptosis ins- tructiva, especialmente impor- tante en el sistema inmunolgico.

ReceptoresLocalizados preferentemente en la membrana citoplasmtica, los recep- tores establecen conexiones con el espacio extracelular y reciben conti- nuamente seales desde el exterior y de las clulas vecinas. Los receptores que participan en los procesos de muerte celular se pueden clasificar en dos grupos: aquellos cuya activa- cin siempre conduce a la muerte de la clula, conocidos como recepto- res de muerte receptor Fas y receptor del factor de necrosis tumo- ral (TNF) y aquellos que desem- pean una funcin fisiolgica, pero su sobreactivacin puede conducir tambin a la muerte (receptores de glutamato, de trombina y canales inicos dependientes de voltaje).Los receptores de muerte se caracteri- zan por presentar un dominio extrace- lular, rico en cistena y un segundo dominio de localizacin citoplasmtica conocido como el dominio de la muerte que es el responsable de la activacin de la maquinaria apopttica. Una vez activados, los receptores trans- fieren la informacin al interior celular mediante un sistema complejo de inte- racciones protena-protena que activan diversas cascadas intracelulares.La protena transmembrana Fas, en su porcin intracelular, enlaza con FADD (factor associated death domain), activando las caspasas 8 y10. Este receptor y su ligando

desempean un papel importante en modelos apoptticos como son la supresin perifrica de las clu- las T maduras al final de una res- puesta inmune, la muerte de clu- las diana (clulas infectadas por virus), la destruccin de clulas cancerosas mediada por clulas T citotxicas y por natural killer, as como la eliminacin de las clulas inmunes reactivas a tumores que expresan constitutivamente el ligando de Fas.El receptor para el TNF conecta con complejos como el TRADD (TNFR-associated death domain) que acta como una plataforma de adap- tacin para reclutar molculas de sealizacin, como la protena de interaccin con el receptor, y activa factores de transcripcin (NFk B y el JNK/AP-1). A diferencia de Fas, el receptor de TNF raramente activa pro- cesos de apoptosis, a menos que la sn- tesis de protenas se encuentre bloquea- da, sugiriendo la existencia de factores celulares que suprimen los estmulos apoptticos generados por el TNF.El factor de crecimiento nervioso (NGF) es una neurotrofina que desempea un papel crucial en el desarrollo de determinadas reas del sistema nervioso. Sus acciones estn mediadas por receptores unidos a cinasas de tirosina (TrKA) y por el receptor p75. Este ltimo posee un dominio de muerte que activa rutas

Tabla 2. Inductores de la apoptosis

Fisiolgicos Asociados al dao celular Terapia Toxinas TNF Golpe trmico Quimioteraputica Etanol Ligando de Fas Infeccin viral (cisplatino, doxorubicina, Betaamiloide TGF-beta Toxinas bacterianas pleomycina, cyticina Veratridina Neurotransmisores (glutamato, dopamina) Oncogenes: myc, rel, E1A arabinosida, metotrexato, 6-OHDA Ausencia de factores de crecimiento Factores de transcripcin: p53 vincristina) 3-NP Prdida de fijacin de la matriz Linfocitos T citotxicos Radiacin Metanfetamina Ca2+ Agentes oxidantes Radiacin UV Glucocorticoides Radicales libres Retirada de nutrientes- antimetablicos

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paralelas, como la cascada de cinasas conocidas genricamente como cinasas de protenas activadas por estrs, o el factor de transcripcin NF-kB, conjuntamente con la cas- cada de caspasas y en algunos mode- los es mediada por la ceramida.Por ltimo, los receptores del ami- nocido neurotransmisor glutamato participan en ms del 80% de las sinapsis excitadoras del SNC y se han relacionado con los procesos que rodean a la memoria y a la transmi- sin nerviosa. Sin embargo, su sobreestimulacin puede desencade- nar la muerte neuronal excitoto- xicidad descrita en los procesos como isquemia/reperfusin, infarto, esclerosis lateral amiotrfica o enfer- medad de Parkinson.

Rutas de sealizacinEntre los segundos mensajeros que participan en los procesos de muerte celular ms estudiados se encuentran el calcio y las especies reactivas del oxgeno, aunque recientemente estn adquiriendo gran importancia otros como la ceramida y algunas protenas tales como factores de transcripcin (p53) y oncogenes (c-myc, familia de bcl). La activacin de estos segundos mensajeros suele condu- cir a la disfuncin de las organelas citoplasmticas, como la mitocon- dria y el retculo endoplsmico, o la regulacin de la actividad de complejos enzimticos como cina- sas y fosfatasas que a su vez regu- lan la funcin de otras protenas.Durante el procesamiento normal de seales (la contraccin de la fibra muscular, la secrecin de neuro- transmisores) tienen lugar aumentos transitorios de la [Ca2+] . Sin embar- go, incrementos aberrantes pueden producir dao celular y en algunos casos su muerte. En estos procesos,i

el calcio puede activar enzimas como proteasas y lipasas, inducien- do la produccin de radicales libres, adems de regular y potenciar la expresin gnica al modular la acti- vidad de factores de trasncripcin.El papel de las EROS fue revisa- do con detalle en el trabajo de Paredes y Roca en esta Revista. En condiciones fisiolgicas, las clulas presentan un equilibrio entre la generacin de radicales libres y los sistemas antioxidantes de defensa. En algunos procesos de muerte celular se ha descrito la ruptura de este equilibrio, observndose un aumento en la oxidacin de prote- nas con la formacin de grupos car- bonilo y peroxidacin lipdica, habindose demostrado la existencia de una localizacin compartimenta- da de derivados carbonlicos libres a partir de lpidos, protenas, hidratos de carbono y cidos nucleicos (2,4- dinitrofenilhidracina).La ceramida empieza a ser consi- derada como un segundo mensaje- ro que participa en los procesos de muerte celular. Es un glucolpido sintetizado en el retculo plasmti- co y en las mitocondrias, cuya mayor concentracin se localiza junto a la porcin interna de la membrana plasmtica. Su trasloca- cin a la mitocondria provoca cambios inicos entre la matriz mitocondrial y el citoplasma, pro- duciendo un descenso del poten- cial transmembrana mitocondrial y la formacin del poro de permea- bilidad transitoria mitocondrial, conduciendo a la apoptosis. Los valores de ceramida pueden ser aumentados tanto por factores externos (radiacin UV, agentes oxidantes), como a travs de recep- tores de membrana (FasR y TNFR) o directamente por glucocorticoi- des. Alteraciones no corregidas del

ADN, en especial mutaciones can- cergenas, activan el p53 que pro- voca apoptosis a travs de un meca- nismo mediado por ceramida.Durante algunos procesos de muerte celular es necesaria la snte- sis de novo de protenas. Entre las familias de genes que median la destruccin controlada de la clula, destacan los conocidos como genes de respuesta inmediata, al que perte- necen protenas como c-jun y c-fos. Otros genes que participan activa- mente en los procesos apoptticos son p53, c-myc y la familia de Bcl-2. El gran nmero y diversidad de genes envueltos en la muerte celu- lar muestra la complejidad de los procesos de apoptosis en el mbito gentico (tablas 1 y 2).La protena p53 es un factor de transcripcin que es activado en res- puesta al dao en el ADN. Aumen- tos en los valores p53 conducen a la induccin en la transcripcin de otros genes como p21/WAF1/Cip 1, un inhibidor de protenas cinasas reguladas por ciclinas, inhibiendo la entrada en fase S del ciclo celu- lar. El resultado neto de estas inte- racciones es una parada en fase G1, la cual provee de una barrera cin- tica en la replicacin de un geno- ma potencialmente daado. Si la clula no puede reparar el dao gentico, p53 induce la muerte celular por un mecanismo que todava no se conoce. Se ha postu- lado que este proceso puede estar mediado por aumentos en la snte- sis de Bax, una protena de la familia de Bcl-2 con propiedades proapoptticas. De esta manera, p53 se convierte en el guardin del geno- ma y, por extensin, del organismo, vigilando la correcta reparacin de las alteraciones genticas originadas por diversos factores externos. Un mal funcionamiento del gen p53

puede promover el desarrollo de tumores al permitir la proliferacin de clulas que no han completado la reparacin del ADN.Bcl-2 da nombre a una familia de oncogenes en los que se encuen- tran miembros que favorecen la supervivencia celular (Bcl-X y Bcl-2) mientras que otros (Bid, Bad, Bax) ayudan al suicidio celu- lar. Estas protenas antagonistas forman dmeros unos con otros, siendo su abundancia relativa la que determina el umbral de desen- cadenamiento de la muerte celular.

electroqumico de membrana y cambios del ciclo metablico de xido/reduccin.

Fase de ejecucin

Una vez que la clula ha tomado la decisin de morir, en su interior se produce una serie de procesos bio- qumicos que conducen a la degrada- cin de protenas y de la cromatina.La protelisis, a diferencia de la mayora de las modificaciones pos- translacionales, es irreversible y

especficas de tetrapptidos que con- tienen un residuo aspartato. Entre sus sustratos se encuentran: elemen- tos del citoesqueleto (actina, fodrina, protena Tau y catenina), enzimas encargadas de reparar (PARP) o degradar (ADNasa) el ADN celular, factores de transcripcin (retinoblas- toma, HDM2), protenas regulado- ras (protena cinasa C, fosfatasas 2A, cinasas de adhesin focal), as como miembros de la familia del oncogn Bcl-2 (Bid).Las calpanas son cistena protea- sas que requieren Ca2+ para su tras-La expresin de Bcl-xL

es indispen-

quizs por ello es altamente espe-

locacin hasta la membrana cito-sable, por ejemplo, para la supervi- vencia de los linfocitos embriona- rios, mientras que los linfocitos de los ratones que carecen de Bcl-2 perviven con normalidad hasta el nacimiento aunque desaparecen, todos ellos, pocos das despus. La sobreexpresin de bcl-2 y de bcl-xl confiere a las clulas proteccin frente a agentes txicos.Por ltimo, el protooncogn c- myc desempea un papel decisivo tanto en procesos de proliferacin celular como de apoptosis. As, se ha descrito que mientras su abla- cin conduce a la parada de la pro- liferacin celular, su sobreexpre- sin es un estmulo apopttico.

Fase de decisin

Una vez que la clula recibe una seal de muerte, debe decidir si debe sobrevivir o desencadenar los procesos de muerte. En esta fase de decisin se ha situado a la mito- condria como organelo fundamen- tal. La funcin de sta fue objeto de estudio por nuestro grupo de investigacin en una revisin pre- via en esta Revista. Uno de los acontecimientos principales que tienen lugar en la mitocondria es la alteracin de la permeabilidad de sus membranas debido a la for- macin de un complejo multipro-

cfica. Regula fenmenos biolgi- cos crticos en los que se ve involu- crado un grupo reducido de sustra- to. La mayora de las proteasas son sintetizadas como precursores de muy baja actividad cataltica que son activados por procesamiento proteoltico mediado por la unin a un cofactor o por la retirada de un inhibidor.Entre las proteasas implicadas en los procesos de muerte celular se encuentran las caspasas, las calpanas, la granzima B y el complejo multi- proteico denominado proteosoma.Las caspasas son una familia de cistena-proteasas que han sido reconocidas como los homlogos en mamferos del producto del gen proapopttico ced-3 del nematodo C. elegans. stas se engloban en tres grupos: caspasas implicadas en la produccin de citocinas (caspasas1, 4, 5 y 13), caspasas de sealiza- cin o de activacin de otras caspasas (caspasas 2, 8, 9 y 10) y caspasas efec- toras de muerte o ejecutoras (caspa- sas 3, 6 y 7) las cuales hidrolizan sustratos selectivos.La activacin de las caspasas puede tener lugar en respuesta a estmulos tanto extracelulares como intracelu- lares. stas hidrolizan secuencias

Tabla 3. Inhibidores de la apoptosis

plasmtica, rpida autlisis y acti- vacin. Entre sus sustratos se encuentran tambin factores de transcripcin, oncogenes, prote- nas de membrana y del citoesque- leto. stas estn sobreactivadas durante procesos excitotxicos e isqumicos y en patologas como la enfermedad de Alzheimer.

Dianas farmacolgicas

Estas diferencias entre apoptosis y necrosis son crticas en la observa- cin del desarrollo de los trata- mientos clnicos. La naturaleza con- trolada de la va apopttica permite la intervencin o interrupcin en la progresin de las patologas dege- nerativas. Sin embargo, en los casos de necrosis, el dao celular es irre- versible e imparable.El conocimiento del mecanismo de sealizacin intracelular, desde la activacin de receptores hasta la fase ejecutora, est permitiendo estable- cer nuevas dianas farmacolgicas en diversas enfermedades como el cn- cer, enfermedades neurodegenerati- vas y el sida. El estudio de estas vas de sealizacin hace posible la inter- vencin y, en algunos casos, la inte-teico (poro de permeabilidad tran- sitoria mitocondrial) que conduce a la liberacin del contenido intra- mitocondrial como el citocromo C, el factor inductor de apoptosis y miembros de la familia de caspa- sas. Otros episodios son alteracio- nes en la cadena transportadora de electrones, prdida del potencial

Inhibidores fisiolgicos Genes virales Agentes farmacolgicos

Factores de crecimiento Adenovirus E1B Inhibidores de las calpanas Matriz extracelular Baculovirus (p35, IAP) Inhibidores de las caspasas CD-40-L Virus Vaccinia Promotores tumorales: PMA Aminocidos neutros Virus Epstein-Barr, Inhibidores de cinasas Cinc BHRF1, LMP1 Estrgenos Virus herpes Andrgenos Virus de la fiebre Antioxidantes porcina africana

VOL 22 NM 6 JUNIO 2003 OFFARM 105BIOQUMICA

Tabla 4. Patologas asociadas con alteraciones en los valores de apoptosis

Exceso Defecto

Enfermedades neurodegenerativas (EA, EP, ELA) Neoplasias malignas Sida Enfermedades autoinmunes Enfermedades autoinmunitarias Enfermedades inflamatorias Isquemia miocrdica Infecciones virales Enfermedades inflamatorias Ictericia obstructiva

rrupcin de la progresin de los procesos de muerte celular.

or go- nesla os 2L b- li- fe- el en do. ti-n y aco n

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as-4. ets ene

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Son varias las lneas abiertas den- tro de este campo de investigacin debido a que la mayora de las clu- las estn programadas genticamen- te para el suicidio, hecho que se encuentra reforzado por los resulta- dos obtenidos con la utilizacin de frmacos inhibidores de la sntesis de protenas que previene a las clu- las frente a determinados estmulos. Otras se centran en el diseo y estu- dio de frmacos que bloquean los incrementos descontrolados de la [Ca2+] en el interior de la clula con el fin de ampliar el abanico de fr- macos utilizados en patologas car- dacas y neurodegenerativas. Desta- can tambin los avances realizados en frmacos antioxidantes o en moduladores de la trascripcin habindose obtenido resultados esperanzadores en modelos experi- mentales. No podemos dejar de lado el gran avance realizado en el campo de las enzimas degradadoras, destacando algunos tetrapptidos sintticos inhibidores de caspasas.Por ltimo, recordaremos que el estudio de los procesos de muerte celular nos permite tambin poder activarla en poblaciones de clulas no deseadas, como es el caso del cncer. La activacin de los recep- tores de muerte para inducir apop- tosis en clulas cancerosas resulta atractiva, ms an cuando, a dife- rencia de la mayora de los agentes quimioteraputicos o la radiotera- pia, los receptores de muerte ini- cian la apoptosis de forma inde- pendiente a la protena p53, que se encuentra mutada en ms de la mitad de los cnceres. La utilidad clnica tanto de TNF como del ligando de Fas ha sido pobre debi- do a sus efectos txicos colaterales. La administracin sistmica de TNF puede ocasionar un sndrome de respuesta inflamatoria que

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recuerda el golpe sptico y, p otro lado, la de un anticuerpo a nista de Fas resulta letal en ratoportadores de tumores, por induccin de apoptosis en l hepatocitos. Sin embargo, Apo o TRAIL, un ligando para los su tipos de receptores de TNF imp cados en apoptosis, presenta di rencias con el propio TNF y con ligando de Fas que le conviert quizs en un agente ms adecua La diferente afinidad por los sub pos de receptores y la expresi diferencial de receptores seuelo de muerte puede convertir Apo2L en un inductor apoptti en clulas tumorales, pero no e clulas normales.

Bibliografa general

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