anca saptanmasi ve tani krİterlerİ - klimud.org · sitoplazmada granüller nükleus çevresinde...

39
1 ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ DR. NİLGÜN KAŞİFOĞLU

Upload: others

Post on 31-Aug-2019

10 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

1

ANCA SAPTANMASI VE TANIKRİTERLERİ

DR. NİLGÜN KAŞİFOĞLU

Page 2: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Anti-nötrofil sitoplazmik antikor (ANCA)

ANCA ilişkili vaskülitler

Nötrofil aktivasyonu, endotelial hücre hasarı vevaskülit

2

ANCA ilişkili vaskülitler

Nötrofil aktivasyonu, endotelial hücre hasarı vevaskülit

Page 3: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

1982 Davies, nekrotizan glomerulonefritte antinötrofilotoantikor varlığı; viral enfeksiyon bağlantısı?

1984 Hall, vaskülitli 4 hasta

1985 Wegener antinötrofil sitoplazmik antikor ilişkisi

1988 sistemik vaskülit ve idyopatik nekrotizan vekresent glomerulonefritli hasta serumlarındaperinükleer patern

3

1982 Davies, nekrotizan glomerulonefritte antinötrofilotoantikor varlığı; viral enfeksiyon bağlantısı?

1984 Hall, vaskülitli 4 hasta

1985 Wegener antinötrofil sitoplazmik antikor ilişkisi

1988 sistemik vaskülit ve idyopatik nekrotizan vekresent glomerulonefritli hasta serumlarındaperinükleer patern

Page 4: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

p-ANCA’daki major antijen myeloperoksidaz (ELISA)

2 yıl sonra proteinaz 3, c-ANCA’daki major antijenolarak tanındı.

4

p-ANCA’daki major antijen myeloperoksidaz (ELISA)

2 yıl sonra proteinaz 3, c-ANCA’daki major antijenolarak tanındı.

Page 5: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

5

Page 6: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

6

Page 7: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

ANCA ANCA=Anti-Neutrophil Cytoplasm Autoantibodies Anti-Nötrofil Sitoplazmik Otoantikorlar

7Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller

Page 8: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Etanol fikse granülositler

2 floresan patern;

Granüler floresans, tüm sitoplazmaya yayılmıştır,hücre çekirdeği tutulmamıştır (sitoplazmik tip; c-ANCA)

Hücre çekirdeği çevresinde kurdele şeklinde sarandüzgün floresans (perinükleer tip; p-ANCA)

8

Etanol fikse granülositler

2 floresan patern;

Granüler floresans, tüm sitoplazmaya yayılmıştır,hücre çekirdeği tutulmamıştır (sitoplazmik tip; c-ANCA)

Hücre çekirdeği çevresinde kurdele şeklinde sarandüzgün floresans (perinükleer tip; p-ANCA)

Page 9: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

9

c-ANCA; sitoplazmada p-ANCA; perinükleer

Page 10: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Alkole batırılmadan önce, formalin gibi, proteinlerioldukları yere fikse eden bir fiksatife konmazlarsa(örneğin sadece alkol), MPO, laktoferrin, elastaz,katepsin G ve bazik proteinler gibi solübl granülelemanları, nükleusa doğru kayarak bağlanırlar veperinükleer boyanmaya yol açarlar.

pozitif yüklü granül içerikleri-negatif yüklü nükleer membran

10

Alkole batırılmadan önce, formalin gibi, proteinlerioldukları yere fikse eden bir fiksatife konmazlarsa(örneğin sadece alkol), MPO, laktoferrin, elastaz,katepsin G ve bazik proteinler gibi solübl granülelemanları, nükleusa doğru kayarak bağlanırlar veperinükleer boyanmaya yol açarlar.

pozitif yüklü granül içerikleri-negatif yüklü nükleer membran

Page 11: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

a-ANCA: atipik Sitoplazmik tutulumla beraber perinükleer tutulum da

mevcuttur.

İnflamatuar barsak hastalıkları Romatoid Artrit SLE JRA Sjögren Sendromu PM/Dermatomyozit Reaktif Artrit Relapsing Polikondrit AFS Skleroderma

11

a-ANCA: atipik Sitoplazmik tutulumla beraber perinükleer tutulum da

mevcuttur.

İnflamatuar barsak hastalıkları Romatoid Artrit SLE JRA Sjögren Sendromu PM/Dermatomyozit Reaktif Artrit Relapsing Polikondrit AFS Skleroderma

Page 12: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Patern Hedef antijen İlişkili hastalıklar

c-ANCA Proteinaz 3 Wegener granülomatozis

p-ANCA Myeloperoksidaz Mikroskobik arteritChurg-Strauss sendromuPoliarteritis nodosa

p-ANCA Elastaz Ülseratif kolitCrohn hastalığıPrimer sklerozan kolanjitSistemik lupus eritematozus

p-ANCA Katepsin G Ülseratif kolitPrimer sklerozan kolanjitCrohn hastalığı

12

Ülseratif kolitPrimer sklerozan kolanjitCrohn hastalığı

p-ANCA Lizozim Ülseratif kolitPrimer sklerozan kolanjitCrohn hastalığı

p-ANCA Laktoferrin Ülseratif kolitPrimer sklerozan kolanjitCrohn hastalığıSistemik lupus eritematozusRomatoid artrit

c-ANCA veya p-ANCA BPI Primer sklerozan kolanjitÜlseratif kolitCrohn hastalığı

p-ANCA Bilinmiyor Ülseratif kolitCrohn hastalığı

Page 13: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

c-ANCA ilişkili hastalıklar

Vaskülitler;

Wegener granülomatozis %80-90 Mikroskobik polianjiitis %10-15 Churg-Strauss sendromu %10-20 Poliarteritis nodosa <%5-9

13

Vaskülitler;

Wegener granülomatozis %80-90 Mikroskobik polianjiitis %10-15 Churg-Strauss sendromu %10-20 Poliarteritis nodosa <%5-9

Page 14: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

p-ANCA ilişkili hastalıklar Primer vaskülit Mikroskobik polianjiitis %42-70 Churg-Strauss sendromu %18-60

Kollajenozis SLE %9-25 Romatoid artrit %3-20

Kronik inflamatuvar barsak hastalığı Ülseratif kolit %76 Crohn hastalığı %7

Kronik karaciğer hastalığı Primer sklerozan kolanjit %87 Otoimmun hepatit tip 1/primer biliyer siroz ?

14

Primer vaskülit Mikroskobik polianjiitis %42-70 Churg-Strauss sendromu %18-60

Kollajenozis SLE %9-25 Romatoid artrit %3-20

Kronik inflamatuvar barsak hastalığı Ülseratif kolit %76 Crohn hastalığı %7

Kronik karaciğer hastalığı Primer sklerozan kolanjit %87 Otoimmun hepatit tip 1/primer biliyer siroz ?

Page 15: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

c-ANCA p-ANCA

Etanol fikse

Formalin dirençli Formalin duyarlıFormalin duyarlı Formalin dirençli

Formalin fikse

ANCA

PR3...?

LaktoferrinKatepsin-GElastazBPIAzurosidinα-enolaz...?

MPO...?

BPI...?

Page 16: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

16

Page 17: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Başlangıç dilüsyonu: 1/10

Konjugat: antihuman IgG FITC işaretli

17

Başlangıç dilüsyonu: 1/10

Konjugat: antihuman IgG FITC işaretli

Page 18: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

18

Page 19: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Anti-Proteinaz 3 ELISA (IgG)

Wegener granülomatozisli hastalarda IFA ilekarşılaştırıldığında; Duyarlılık %93.8

Kontrol grubunda; Özgüllük %99.8

19

Wegener granülomatozisli hastalarda IFA ilekarşılaştırıldığında; Duyarlılık %93.8

Kontrol grubunda; Özgüllük %99.8

Page 20: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

20

Page 21: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

21

Page 22: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

Anti-MPO ELISA (IgG)

Mikroskobik polianjiitisli hastalarda IFA (formalindirençli p-ANCA) ile karşılaştırıldığında; Duyarlılık %93.3

Kontrol grubunda; Özgüllük %99.8

22

Mikroskobik polianjiitisli hastalarda IFA (formalindirençli p-ANCA) ile karşılaştırıldığında; Duyarlılık %93.3

Kontrol grubunda; Özgüllük %99.8

Page 23: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

ANA+p-ANCA ve tek başına ANA

23

Page 24: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

ANCA profil ELISA

Proteinaz 3 Laktoferrin Myeloperoksidaz Elastaz Katepsin G BPI

c-ANCA

p-ANCA

24

Proteinaz 3 Laktoferrin Myeloperoksidaz Elastaz Katepsin G BPI c-ANCA

p-ANCA

Page 25: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

IFA daha duyarlı

ELISA özgül IFA ile tarama ELISA ile doğrulama

25

IFA daha duyarlı

ELISA özgül IFA ile tarama ELISA ile doğrulama

Page 26: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

26

Lineblot MPO/PR3/GBM Profile

Page 27: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

27

Page 28: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

28

ÖRNEKLER

Page 29: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

29

Page 30: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

30

Page 31: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

31

Page 32: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

32

Page 33: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

33

Page 34: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

c-ANCA

granulocytes (EtOH) primate liver

34

granulocytes (HCHO) HEp-2 cells

PR3 (EUROPLUS) MPO (EUROPLUS)

Page 35: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

p-ANCA formalin dirençli

granulocytes (EtOH) primate liver

35

granulocytes (HCHO) HEp-2 cells

MPO (EUROPLUS)PR3 (EUROPLUS)

Page 36: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

p-ANCA formalin duyarlı

primate livergranulocytes (EtOH)

36

HEp-2 cellsgranulocytes (HCHO)

PR3 (EUROPLUS) MPO (EUROPLUS)

Page 37: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

ANA & p-ANCA formalin dirençli

primate livergranulocytes (EtOH)

37

HEp-2 cellsgranulocytes (HCHO)

PR3 (EUROPLUS) MPO (EUROPLUS)

Page 38: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

38

Page 39: ANCA SAPTANMASI VE TANI KRİTERLERİ - klimud.org · Sitoplazmada granüller Nükleus çevresinde granüller Etanol fikse granülositler 2 floresan patern; Granüler floresans, tüm

39

Teşekkürler…