Analisa Populasi dari Forensically Important Calliphanidae pada Bangkai Babi di Taiwan

SARTIKA PUTRI

Abstrak

• Lalat Callliphoridae (lalat hijau) adalah serangga yang paling berguna untuk mengidentifikasi tanggal kematian korban.

• Untuk memahami distribusi dari spesies lalat hijau yang aktif di Taiwan, kami mengumpulkan sampel forensically important lalat hijau dari bangkai babi selama 2002-2006 di Utara dan Selatan Taiwan pada musim yang berbeda.

• Model Wallman dan Chang yang telah dimodifikasi dalam mengidentifikasi forensic lalat hijau.

• Populasi dari Chrysomya megacephala dan Chryosamya rufifacies adalah dua jenis lalat yang paling dominan di Taiwan.

• Diantara keduanya, Chrysomya megacephala lebih aktif dibandingkan Chrysomya rufifacies di Taiwan Utara.

• Tetapi, Chrysomya rufifacies lebih mendominasi dari Chrysomya megacephala di bagian Selatan.

• Selama musim dingin, Chrysomya pinguis adalah spesies yang paling menguasai dibandingkan Chrysomya megacephala dan Chrysomya rufifacies, hal ini mengeluarkan pendapat bahwa Chrysomya pinguis adalah salah satu lalat important forensically untuk mengestimasi PMI di musim dingin.

• Lucilla dan Hemipyrellia memiliki jumlah yang sangat sedikit dibandingkan Chrysomya selama setahun penuh di Taiwan.

• Dan lebih jauh lagi, Lucilia porphyrina hanya diobservasi di bagian Utara Taiwan pada musim dingin.

• Data - data ini akan menjadi sangat menguntungkan untuk pengaplikasian PMI di Taiwan.

Pengantar

• Lalat Calliphoridae adalah salah satu serangga yang paling berguna untuk investigasi PMI.

• Dalam rangka untuk memahami distribusi spesies dominan lalat hijau pada mayat di Taiwan, kami mengumpulkan sampel important forensically lalat hijau dari Utara dan Selatan Taiwan pada musim yang berbeda.

• Beberapa kunci penting untuk mengidentifikasi lalat hijau sudah pernah dilaporkan, misalnya, kunci Wallman terhadap spesies lalat hijau di bagian Selatan Australia dan kunci Whitewoth digunakan di Amerika Utara.

• Beberapa spesies di Taiwan tidak termasuk dalam kunci mereka.

• Dalam karya ini, kunci morfologi sederhana dimodifikasi dari Wallman dan Chang diusulkan.

Bahan dan Metode

Spesimen • Lalat forensik dari bangkai babi selama tahun

2002 – 2006 di bagian Utara dan Selatan Taiwan di beberapa musim telah dikumpulkan.

• Sebelas percobaan imitasi seluruhnya telah dilakukan dengan membuang mayat babi di daerah yang berbeda, empat di daerah Taipei, enam di Kaoshiang, dan satu di Cha-I.

• Lalat dewasa dikumpulkan dengan menyapu jaring – jaring serangga dan lalu diawetkan dengan 75% alkohol.

Ekstraksi DNA• Dua sampel dari masing-masing spesies yang

dipilih untuk analisis sekuensing DNA. • Jumlah DNA genomik adalah diekstrak dari salah

satu kaki lalat hijau. • Setiap kaki digiling menjadi bubuk menggunakan

alu plastik sekali pakai di dalam 1,5 ml tabung microfuge direndam dalam nitrogen cair.

• DNA diekstrak dari bubuk kaki dengan menggunakan kit DNA QIAamp (QIAGEN Inc, Valencia, CA, USA).

Amplifikasi dan sekuensing• Ekstraksi DNA digunakan sebagai template

untuk reaksi PCR. • Sebelum reaksi sekuensing, produk PCR

dimurnikan menggunakan QIAquick® PCR.• Setiap sampel murni dipulihkan pada bagian

bawah tabung koleksi dan dikeringkan dalam ruang hampa centrifuge.

• Sekuensing DNA otomatis dilakukan pada ABI 3100 sequencer.

Hasil dan Diskusi

• Sebanyak 843 sampel diidentifikasi menjadi lalat hijau sesuai dengan kunci yang dijelaskan di “A manual forensik entomologi”.

• Identifikasi spesies dari lalat hijau ini sesuai dengan kunci kami kebanyakan dimodifikasi dari Wallman dan Chang.

• Kunci ini selanjutnya diperiksa oleh spesies diketahui bahwa sebagian besar disediakan oleh Shiao (Lab Entomologi Departemen National di Universitas Taiwan).

• Pada modifikasi kunci ini, tiga spesies, Chrysomya pinguis, Hemipyrellia ligurriens dan Hemipyrellia pulchra tidak dijelaskan oleh Wallman.

• Sebagai tambahan, beberapa morfologi tertentu tidak dilaporkan oleh Wallman ditambahkan ke kunci ini.

• Langkah pertama, kita dibedakan Chrysomya dari Lucilia dan Hemipyrellia dengan memeriksa dengan atau tanpa dorsal setulose pada pangkal batang-vena.

• Pada koleksi ketiga spesies Chrysomya ditemukan,C. megacephala, C. pinguis, dan C. rufiffcies.

• Bagaimanapun, Chrysomya megacephala dan Chrysomya pinguis sulit dibedakan karena kesamaan morfologi mereka.

• Chang menggambarkan karakteristik terminalia laki-laki untuk membedakan satu dari yang lain, tetapi metode ini perlu menggunakan larutan basa kuat untuk membersihkan teriminalia laki-laki sebelum pengamatan mikroskop, mewujudkan suatu proses yang memakan waktu.

• Kami membedakan kedua spesies terutama oleh warna dari gena dan rambut.

• Chrysomya megacephala memiliki gena kuning dengan rambut kuning tetapi Chrysomya pinguis memiliki abu-abu sampai hitam gena dengan rambut hitam .

• Mereka juga bisa dibedakan dengan warna tubuh dengan hijau untuk Chrysomya megacephala tapi dengan biru-violet untuk Chrysomyapinguis.

• Chrysomya rufifacies sangat berbeda dari dua lalat Chrysomya lainnya .

• Ini bisa menjadi berbeda dari dua Chrysomya lainnya yaitu kuning, warna krim dari anterior ventilator thorax dan genanya oranye-coklat ke hitam dengan debu pucat dan rambut keperakan.

• Perbedaan lainnya adalah dalam mata ommatidia dari Chrysomya megacephala dengan atas dua pertiga diperbesar, dan tajam dibatasi dari kecil yang ada di sepertiga bagian bawah tetapi bahkan distribusi untuk Chrysomya rufifacies

• Dua spesies lalat Lucilia dikumpulkan, dengan morfologi yang jelas berbeda.

• Lucilia cuprina dapat mudah dibedakan dari Lucilia porphyrina oleh ukuran tubuh, warna tubuh, jumlah postsutural acrostichal setae, warna basicosta.

• Lucilia cuprina dan Hemipyrellia ligurriens dapat dibedakan dengan rambut panjang pada saat katatergite dari Hemipyrellia ligurriens tapi ada pubscent pada katatergite dari Lucilia.

• Antena L. cuprinalebih panjang daripada Hemipyrellia ligurriens.

• Rantai marginal biru pada tergite 3 dan 4 dari L. cuprina kecuali pada Hemipyrellia ligurriens.

• Warna tubuh adalah tembaga hijau untuk L. cuprina tetapi hijau untuk Hemipyrellia ligurriens.

• Dasar batang-vena punggung telanjang, calypter bawah telanjang di atas permukaan, Katatergite pubscent, 2 pasang postsutural acrostichal setae, tergite 3 dan 4 tanpa rantai marjinal biru, warna tubuh ungu ke biru adalah karakteristik dari Lucilia porphyrina.

• Untuk memastikan apakah tambahan karakteristik morfologi konsisten antara sampel yang telah terkumpulkan dengan spesies yang sama, kam itelah memeriksa bahwa karakteristik tidak dijelaskan dalam kunci Wallman.

• Hasil penelitian menunjukkan bahwa karakteristik yang sesuai untuk semua dikumpulkan sampel dari spesies yang sama.

• Bagaimanapun, kami melihat yang pucat debu pada gena dari Chrysomya rufifacies sudah konsisten hanya pada percobaan yang baru.

• Pucat debu kadang-kadang hilang dari proses pengawetan alkohol untuk gena dari Chrysomya rufifacies.

• Di sisi lain, rambut keperakan dapat diamati pada gena dari Chrysomya rufifacies untuk kedua kasus, mengungkapkan karakteristik yang konsisten untuk mengidentifikasi spesies ini.

• Spesies Lucilia sericata tidak diperoleh dalam penelitian ini, sehingga pada penambahan karakteristik untuk mengidentifikasi spesies ini kami mengutip dari kunci Withworth.

• Hasil penelitian menunjukkan bahwa 457 sampel diidentifikasi menjadi Chrysomya megacephala, 326 menjadi Chrysomya rufifacies, 29 menjadi Chrysomya pinguis, 19 menjadi Heipyrellia ligurriens, 11 menjadi Lucilia porphyrina, dan 1 menjadi Lucilicia cuprina .

• Rupanya, Chrysomya megacephala dan Chrysomya rufifacies merupakan spesies yang paling umum di Taiwan pada musim yang berbeda.

• Kedua spesies ini (lalat hijau) juga yang paling sering ditemukan di Hawaii, Thailand, Malaysia dan Kolombia.

• Rasio penggabungan dari kedua spesies untuk lalat hijau lain di Taiwan dekat dengan Thailand tetapi lebih tinggi dari Malaysia.

• Membandingkan jumlah kedua lalat hijau, populasi dari Chrysomya megacephala lebih besar daripada Chrysomya rufifacies di Utara Taiwan. Sebaliknya, populasi dari Chrysomya rufifacies lebih besar dari Chrysomya megacephala di daerah Selatan.

• Di sisi lain, Chrysomya megacephala lebih umum ditemukan daripada Chrysomya rufifacies di Hawaii ,Thailand , dan Malaysia .

• Chrysomyapinguis hanya dikumpulkan di Utara Taiwan dalam musim dingin.

• Meskipun itu adalah spesies umum yang diamati di Asia, namun spesies ini langka yang diamati pada mayat di Thailand, Malaysia dan Kolombia.

• Populasinya lebih besar dari Chrysomya megacephala dan Chrysomya rufifacies di musim dingin.

• Hasil ini menunjukkan bahwaChrysomya pinguis dapat menjadi lalat hijau yang penting untuk memperkirakan PMI di Taiwan pada musim dingin.

• Lucilia dan Hemipyrellia jauh lebih sedikit dari Chrysomya. Dan Lucilia porphyrina dikumpulkan hanya di bagian Utara Taiwan di musim dingin. Hasil ini serupa di Thailand, Malaysia dan Kolombia