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Universidad Nacional Autónoma de México

FACULTAD DE QUÍMICA Curso Genética y Biología Molecular

(1630) Ingeniería Genética II

M en C. Gabriele Bigoni Profesor en Formación Programa 121

Licenciatura Químico Farmacéutico Biológico

Dra. Herminia Loza Tavera Profesora Titular de Carrera

Departamento de Bioquímica Lab 105, Edif E

5622-5280 hlozat@unam.mx

PRINCIPIOS DE INGENIERÍA GENÉTICA

Objetivo General El alumno conocerá los principios de la tecnología del DNA recombinante y su potencial para generar organismos genéticamente modificados.

II

EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

¿Qué son las proteínas recombinantes? Proteínas producidas artificialmente a partir de genes clonados.

¿Para que sirven?

Áreas básicas como Biología, Cristalografía, Bioquímica, etc.

Á r e a s a p l i c a d a s c o m o e n S a l u d , Biotecnología, Agricultura.

EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

Características adicionales -  Promotor regulable -  Terminador de la transcripción -  Sitio de reconocimiento para los ribosomas

•  Consiste en fusionar nuestra proteína con una proteína estable en el propio huésped para evitar la degradación.

•  Promotor regulable para evitar que el gen de interés se exprese constantemente en un alto nivel.

•  Etiquetas para poder separar las proteínas al momento de la purificación.

PURIFICACIÓN DE LA PROTEINA Ruptura de las células Permeabilización, congelación/

descongelación, ultrasonido.

Cromatografía de afinidad por iones metálicos

Purificación con el uso de “ m a r c a d o r e s ” C o l a s d e Histidina

EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

PLANTAS TRANSGÉNICAS/PLÁMIDO Ti

PLANTAS TRANSGÉNICAS/BOMBARDEO

El bombardeo con microproyectiles o biolística, es el método alternativo al plásmido Ti más importante para transferir DNA a plantas. La técnica consiste en bañar partículas esféricas de oro con DNA.

PLANTAS TRANSGÉNICAS

PLANTAS TRANSGÉNICAS

¿Qué es el algodón transgénico? Algodón modificado genéticamente mediante técnicas de ingeniería genética, con las que le han agregado genes de organismos lejanos a él. •  La tolerancia a herbicidas. •  La resistencia a insectos.

CLONACIÓN EN CÉLULAS ANIMALES

Quiere decir que a partir de una célula de un individuo se crea otro exactamente igual al anterior

Métodos de selección -  Detección de actividad enzimática -  Resistencia a antibióticos -  Resistencia a inhibidores

CLONACIÓN EN CÉLULAS ANIMALES

ANIMALES TRANSGÉNICOS

Los animales transgénicos son a n i m a l e s q u e h a n s i d o modificados genéticamente, añadiendo genes foráneos, para cambiar alguna característica del animal, sea para añadirle alguna funcionalidad o para bloquear la expresión de algún gen.

RATÓN/GEN DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO

APLICACIONES

•  Farmacia se utilizan para la obtención de medicamentos anticoagulantes y ciertas proteínas humanas como la insulina y la hemoglobina humana.

•  En animales se pueden estudiar ciertas enfermedades, como el cáncer, mediante la inserción de genes para saber como funcionan y probar diferentes tratamientos para curar la enfermedad.

•  En plantas para resistencia a plagas y enfermedades (virus, insectos,

hongos), tolerancia a herbicidas o a condiciones ambientales extremas (sequías, heladas, etc.)

CÉLULAS TRONCALES

CÉLULAS TRONCALES

TERAPIA GÉNICA, A QUE VAMOS..

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