tinciones especiales para histologia
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7/25/2019 Tinciones Especiales Para Histologia
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TCNICA DELPAS (cido
Perydico Schiff
La tcnica de Schiff,es una tincin quese usa comnmente
en Histoqumica
Utiliza PAS, cidoperydico de Schiff,
es un coloranteincoloro pero que setorna rojo estable al
contacto con losgrupos aldehdos.
TECNICA
1 Desparafinar e hidratar (xilol y decrecientesalcoholes)
2 cido perydico 0.5 % 5 min.
3 Lavar en agua .
4 Reactivo de Schiff 15- 30 min.
5 Aclarar en 3 baos de agua sulfurosa 2 min.
6 Lavar en agua corriente.
7 Deshidratar, aclarar y montaje
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TINCIN DE GRAMMODIFICADA
BROWN- BRENN
Es un tipo de tincin que se utilizapara demostrar gram-negativas y
gram-positivos en el tejido
reactivos que seutiliza
Cristal Violeta al 1%Lugol
AcetonaFucsina bsica al 0,25cido Pcrico Acetona
Tecnica
Desparafinar e hidratar al agua destilada
Tincin de Cristal Violeta por 1 minuto
Lavar en agua corriente
Aplicar lugol por 1 minuto
Lavar agua corriente
Decolorar con alcohol-Acetona (saca el e xceso del coloranteCristal Violeta)
Lavar en agua corriente
Tincin con Fucsina bsica durante 3 minutos.
Lavar en agua corriente, y secar levemente la muestra.
Pasar rpidamente por 2 baos de acetona.
Pasar a la mezcla de cido Pcrico solucin acetona al 0,1%hasta que aparezca un color rosado-amarillo en la muestra.
Pasar por 2 cambios de acetona
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Desparafinar e hidratarlos cortes
cido peridico 5%, 10min
Lavar con aguadestilada
Fucsina fenicada, 15 minDecolorar en alcoholcido al 50%
Lavar con aguadestilada
Hematoxilina, 10 minCarbonato de litio,
azulamientoDeshidratar, aclarar ymontar preparaciones
ResultadosBAAR: rojo. Ncleos:
azul semiamarillo.
TECNICA
TINCIN DEZIEHL-
NEELSEN
es una tcnica de tincindiferencial rpida y
econmica, usada parala identificacin de
bacterias cido-alcoholresistentes (BAAR) en
cortes de tejido enparafina.
Fucsina fenicada:0,5 g .fucsina bsica
50 ml agua destilada5 ml etanol absoluto
28,5 g.. cristales defenol derretidos
Alcohol cido 1%:AcidoClorhdrico1ml.Alcohol
ABS99ml.Hematoxilina Acido
peridico al 5 %
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TCNICA DE GRIMELIUS
Tcnica:1.-Desparafinar
hidratar.2.-Solucin de Plata
58 a 60C3Hrs.3.-Lavar en Agua.
4.-Solucin deHidroquinona 40 a 45C1:30Hrs.
5.-Lavar en Agua.6.-Deshidratar, Aclarar
y Montar.
Resultados:Grnulos Argirofilos
(formaciones deproteina ) pardo,
Dorado o Negros..
Impregnacin:Solucin de Plata 1%:
Nitrato de Plata al 1 %...4ml.Buffer de Acetato(0.2mol)10ml.
Agua Bidestilada86ml
Reduccin:
Solucin de H idroquinona.
Hidroquinona1gr. Sulfatode Sodio5gr. AguaBidestilada100ml.
Se utilizanprincipalmente para la
identificacin de lasclulas neuroendocrinas ysus tumores, tambin parala demostracin de fibrasde reticulina, melanina y
calcio
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TECNICADEL ROJO
CONGO
Es considerada como latcnica ms fiable y
prctica para detectaramiloide y tambin se usapara teir preparaciones
microscpicas,especialmente en tinciones
para el citoplasma ylos eritrocitos
Resultados: Elamiloide se tieen rojo claro, y
brilla con luzpolarizada
TECNICA
1.- Cortes por congelacin 10micras.
2.- Colocarlos en solucin de Rojocongo al 1% en agua,- 30 min.
3.- Poner en carbonato de Litio (asaturacin en agua)---15 seg.4.- Lavar en alcohol de 80, hasta
que no arrastre mas colorante.5.- Lavar en agua corriente 15 min.
6.- Teir con hematoxilina.7.- Lavar en agua, deshidratar,
aclarar y montar.
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XILENO: 2x10minALCOHOL AL 100%: 2x5minALCOHOL AL 96%: 2x5min
LAVAR CON AGUA CORRIENTE
PERMANGANATO POTASICO AL 1%: 2minAGUA DESTILADA: 5min
ACIDO OXALICO AL 5%: Hasta que se decoloreLAVAR CON AGUA DESTILADA
ALUMBRE FERRICO AMONIO AL 2%: 2minAGUA DESTILADA: 5min
SOLUCION DE PLATA AMONIACAL: 3minLAVAR CON AGUA DESTILADA RAPIDAMENTE
FORMOL AL 10%: 3minLAVAR CON AGUA DESTILADA
CLORURO DE ORO AL 1/500: 10minLAVAR CON AGUA DESTILADA
HIPOSULFITO SODICO AL 5%: 1min
LAVAR CON AGUA DESTILADAPASAR POR AGUA CORRIENTE
ALCOHOL AL 96%: 2x5minALCOHOL AL 100%: 2x5min
XILENO Y MONTAR
TECNICA
Consisten en fibras muy finas de colgeno tipoIII, muy extendidas en el tejido conectivo.
Las membranas basales secompone principalmente decolgeno tipo IV y laminina.
Demuestran tanto las
fibras reticulares comomaterial de lamembrana basal.
Se trata de una tcnica de impregnacinargntica que utiliza como base fuerte el
hidrxido potsico y como agente reductor elformol. 1- Fijacin: formalina al 10%. 2- Cortes:en parafina, congelacin o en celoidina. 2 - 4
Tinciones deretculo
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Etanol de 50, 70, 80, 90, 96y 100
Hematoxilina frrica de WeigertVerde luzAgua destilada
COMPONENTES
Tincintricrmica de
MassonSe utilizan en combinacin con varios
colorantes aninicos
NCLEOCITOPLASMA
Evaluacin del tipo y cantidadde material extracelular
C O L G E N O
2x10 min en xileno para desparafinar2x10 min en etanol 10010 min en etanol 9610 min en etanol 8010 min en etanol 505 min en agua destilada5 min en Hematoxilina frrica de Weigert (10 min si el colorante lleva ms de 5 das hecho)5 min en agua corriente para diferenciacin.3 min lavado en agua destilada5 min en fucsina-escarlata.2 min lavado en agua destilada15 min en cido fosfomolbdico al 5% en agua destilada.10 min en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de anilina).Unos segundos en agua destilada.3 min de diferenciacin con cido actico al 1% en agua destiladaDeshidratado rpido, unos segundos, en etanol de graduacin creciente: 80, 96 y 1002x10 min en xilenoMontaje
TECNICA
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Hematoxilina alcohlicaHematoxilina ------------------------------------10 gr.A lcohol96 -------------------------------------100 ml
Cloruro frrico al 10 %:Cloruro frrico ----------------------------------10 gr.
A gua destilada ----------------------------------100 ml
Yoduro potsico al 10 %:Y oduro potsico --------------------------------10 gr.
Ag ua destilada ----------------------------------100 mlSolucin de Picrofucsina
Fucsina cida a l 1 % ----------------------------1.3 ml -cido pcrico a saturacin ---------------------- 9.7 ml
PREPARACIN
Sim embargo la tincin de Gieson Verthoeff-van (VVG) es la ms popular porque es rpida
Ambas tcnicas se suelen establecer en el contexto tricrmico.
Ncleos celulares se tien de marrn a negro
Las tcnicas tipo Weiger son bastantes especficas para la elastina, y sonconsideradas por muchos como el mtodo de eleccin para la demostracin de
estas fibras extracelulares
HidratarHematoxilina deVerhieff por 30
minutosLavar
Cloruro frrico al1% una pasadaPicrofucsina una
pasadaDeshidratar conalcohol al 50%Aclarar con xilol
Montar
PROCEDIMIENTO
TINCIN PARA FIBRASELSTICAS
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