teórico 16 enterovirus virologÍa 2012. relaciones filogenéticas entre cepas prototipo del género...

Teórico 16

Enterovirus

VIROLOGÍA 2012

Relaciones filogenéticas entre cepas prototipo del

género enterovirus, basadas en la región codificante de P1

(proteínas de cápside)

Estructura

Virus pequeño (30 nm) desnudoSimetría icosaédricaResistentes a bajos pH y a solventes orgánicos

RNAss polaridad positivaProteín VPg unida covalentemente al genoma

RdRp NO estructural

Ciclo de multiplicación

Adsorción

Penetración y desnudamiento

Traducción dependiente de 5´Cap

Traducción dependiente delSitio interno de entrada al ribosoma:

IRES

Traducción

Regulación de la traducción celular

Traducción y procesamiento de proteínas

ARN viral (poliovirus)

Proteínas celularesProteínas virales

RdRp viral

Síntesis de RNA

Asociada a membrana

ARN viral (poliovirus)

RdRp viral

Síntesis de RNA

Primer dependienteVPg pUpU

Sitio de entrada, replicación y diseminación

Viremia

Mucosa orofaríngea/intestinal

Agmídalas/Placas de Peyer

SRE

SNC

Nodulos linfáticos cervicales

Nodulos linfáticos mesentéricos

Rta inmune innata

Rta inmune adquiridacelular citotoxica

Rta inmune adquiridahumoral AC

Rta inmune innata

Infección asintomática (90%). Poliomielitis abortiva (5%). Poliomielitis no paralítica (3-4%). Poliomielitis paralítica (1-2%):

Poliomielitis espinal. Poliomielitis bulbar.

Infecciones por poliovirus

DiabetesConjuntivitis hemorrágica

: Enterovirus

MUESTRAS RECOLECCION

LCR Tubo estéril

Materia Fecal Frasco limpio

Hisopados Rectal, faríngeo.

Tubo c/medio de transporte viral

Biopsias, Necropsias

Tubo c/medio de transporte viral

Líquido Pericárdico

Tubo estéril

DIAGNOSTICORecolección y conservación de las muestras

Diagnostico por cultivo

BEV-specific

duplication

Hypervariableregion

►

◄►

VP4 VP2 VP3 VP1 2A 2B 2C 3A 3B 3C 3D

3'NTR3'NTR5'NTR5'NTRcapsidcapsid

AAnn

PCR1PCR1

PCR2PCR2Semi-nested PCRSemi-nested PCR

Diagnostico molecular

CULTIVO RT-PCR

ENTEROVIRUSENTEROVIRUS

LCR

TIPO VIRAL

NEUTRALIZACIONCON POOL LBM

SECUENCIACION GENOMICA PARCIAL DE VP1

Identificación de los enterovirus

TEST DE NEUTRALIZACION

• Respuesta tipo-específica• Se mantienen de por vida

FIJACION DE COMPLEMENTO

• Respuesta de Grupo• Baja sensibilidad• Desaparecen en 1-2 años.

DETECCION DE IGM ENTEROVIRAL

• Poco sensible• Puede persistir por muchos meses después de una infección enteroviral y puede detectarse en individuos sanos asintomáticos• La presencia de IgM enteroviral no puede siempre establecer la causalidad de la enfermedad en cuestión

Serología

Vacunas atenuada e inactivada

IPV

Killed polio vaccine (Salk)

Live polio vaccine (Sabin)

Days Vaccination

Rec

ipro

cal v

irus

antib

ody

titer

512

128

32

8

2

1

Serum IgG

Serum IgG

Serum IgM Serum IgM

Nasal and duodenal IgA

Nasal IgA

Serum IgA

Serum IgA

Duodenal IgA

Vaccination

48

4896 96

Comparación de los tipos de respuesta inmune inducida porvirus replicativos vs inactivados

Vacuna atenuada: Ej. Polio 3 - SabinInvestigación de las bases genéticas de su atenuación

Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - SabinBases genéticas de su atenuación

VIRUS MUTACIÓN

(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCLEOTÍDICA)

P1 Sabin 5´UTR (480) VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481) VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472) VP3 (3091)

Regiones no codificantes

Regiones reguladorasReplicación

TranscripciónTraducción

Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - SabinBases genéticas de su atenuación

VIRUS MUTACIÓN

(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA)

P1 Sabin 5´UTR (480)

VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481)

VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472)

VP3 (3091)

Regiones codificantes:

Proteínas de cápside

Otras proteínas?

1994

2003

1988

2000

Países libres de Polio salvajePaíses endémicos Países No endémicos

Reducción de la incidencia de poliomielitis

Casos de Polio - 2011

Brote Polio en Isla Hispaniola

Vigilancia de Poliovirus

VDPVs se dividen en: − iVDPV: asociados a personas inmunodeficiencias primarias. − cVDPV: asociados a transmisión sostenida persona a persona y pueden causar brotes.-aVDPVs: ambiguos, no se pueden definir como iVDPVs o cVDPVs. Recuperados del medio ambiente.

Clasificación de poliovirus de acuerdo al porcentaje de similitud en VP1:

- 0.0-0.9% Poliovirus Sabin relacionado.- 1.0-14.9%. Poliovirus Sabin derivado (VDPV).- mayor a 15%. Poliovirus Salvaje.

Tratamiento antiviral

PLECONARYL

Bibliografía

• Fields Virology. David M. Knipe and Peter M. Howley. Fifth edition. Lippincott Williams and Wilkins. 2007.

• Principles of Virology. Molecular Biology, Pathogenesis, and Control of Animal Viruses. S.J.Flint, L.W.Enquist, V.R.Racaniello, A.M.Skalka. Third edition. ASM PRESS. Washington, D.C. 2009.

• Kew OM, Wright PF, Agol VI, Delpeyroux F, Shimizu H, Nathanson N, Pallansch MA. Circulating vaccine-derived polioviruses: current state of knowledge. Bull World Health Organ. 2004 Jan;82(1):16-23