nukleinske kiseline - ldap.zvu.hranam/biologija/nukleinske kiseline.pdf · •slijedovi nukleotida...
Post on 11-Mar-2019
234 Views
Preview:
TRANSCRIPT
Nukleinske kiseline
• F. Miesher, 1869. god. otkrio nukleinske kiseline u limfocitima
• Deoksiribonukleinska kiselina (DNA)
• Ribonukleinska kiselina (RNA)
Griffithov pokus s bakterijama Streptococcuspneumoniae; 1931. dokazao da je DNA nositeljica genetske informacije
Nukleinske kiseline –izgrađene od nukleotida(dušična baza-šeder pentoza-fosfatna grupa)
• 1953. god. Watson i Crick razjasnili strukturu dvostruke uzvojnice DNA
• Dušične baze u DNA: adenin, timin, citozin, gvanin
• Dva polinukleotidna lanca, međusobno povezana vodikovim vezama (između komplementarnih purinskih i pirimidinskihbaza)
• Lanci su antiparalelni
• Vanjski skelet čine pentoze i fosfatne skupine a baze su orijentirane prema unutrašnjosti uzvojnice
• Susjedne baze su udaljene 0,34 nm
• Puni zavoj uzvojnice uključuje prosječno 10 nukleotidnih parova
• Slijedovi nukleotida u dva lanca DNA su komplementarni
• Gen: redoslijed nukleotida u molekuli DNA koji sadrži uputu za neku bjelančevinu
Struktura RNA
• Svaka RNA molekula sadrži pirimidin uracil umjesto timina u DNA
• Nukleotidi u RNA sadrže šeder ribozu
• Izgrađena od jednogpolinukleotidnog lanca
• Molekule RNA mnogo su krade od DNA (RNA u eukariota nosi informaciju prepisanu s jednog gena)
Glavne vrste RNA
• Glasnička RNA (mRNA)
• Transportna RNA (tRNA)
• Ribosomska RNA (rRNA)
• Male RNA molekule u jezgri (snRNA): imaju ulogu u obradi mRNA u jezgri nakon transkripcije
mRNA• 1-2% ukupne stanične RNA• Prenosi genetsku informaciju iz jezgre u
citoplazmu prema kojoj de na ribosomima nastati nova bjelančevina
• Geni u stanicama sadrže egzone (kodirajude dijelove nukleotida) i introne (nekodirajudedijelove nukleotida)
• Prilikom sinteze mRNA u jezgri prepisuju se egzoni i introni: primarni RNA transkript (pre-mRNA) – obrada – izrezivanje introna –spajanje krajeva egzona – funkcionalna mRNA
tRNA• 10-15% ukupne RNA
citoplazme
• male molekule (70 do 80 nukleotida), prevode poruku sadržanu u slijedu nukleotida mRNA u slijed aminokiselina
• Svaka tRNA ima na jednom kraju tri baze: antikodon,a na suprotnom kraju veže jednu od 20 aminokiselina
rRNA
• Male molekule
• Sintetiziraju se u jezgrici
• Najzastupljenije u stanici od svih RNA (60-80% ukupne RNA stanice)
• Vezane za proteine! – formiranje ribosoma!
• rRNA se spajaju s ribosomskim proteinima formirajudi ribosomske podjedinice
• Funkcionalni ribosom nastaje kada se dvije ribosomske podjedinice spoje
Gdje je smještena DNA?
… u jezgri…
…točnije, u kromosomima
Kromatin: kompleks DNA i proteina, histona
Osnovna strukturna jedinica kromatina je NUKLEOSOM
Kromatinskavlakna
Replikacija DNA
• Živi organizmi udvostručuju svoju DNA prije svake stanične diobe
• Vedina naših spoznaja o mehanizmu replikacije DNA temelji se na pokusima in vitro
• Osnovni mehanizam replikacije DNA sličan je u prokariota i eukariota
• U bakterija, tijekom replikacije polimerizira se oko 500 nukleotida u sekundi, a u sisavaca oko 50
• DNA molekula je kalup za vlastitu replikaciju; polukonzervativnaili semikonzervativnareplikacija
• Informaciju sadržanu u redoslijedu nukleotidaprenosi iz generacije u generaciju
• Tri osnovna stupnja replikacije DNA:
1. Odmatanje i razdvajanje polinukleotidnihlanaca DNA uzvojnice
2. Komplementarno sparivanje baza
3. Polimerizacija nukleotida
U replikaciji DNA sudjeluju mnogi enzimi:
• Inicijacijski proteini: proteini koji se vezuju na ishodište replikacije i pomažu formiranje replikacijskih rašlji
• Helikaza: otvara DNA uzvojnicu• Topoizomeraze: sprečavaju zaplitanje i napinjanje
dvostruke uzvojnice• SSB proteini: stabiliziraju i izravnavaju jednolančanu
DNA ostavljajudi baze slobodnima• DNA primaza: ugrađuje početnicu (klicu); slijed od 10
RNA nukleotida• DNA polimeraza: katalizira ugradnju
deoksiribonukleotida u 5’ → 3’ smjeru • DNA ligaza: povezuje fragmente DNA u kontinuirani
lanac
• 1. vodedi lanac: lanac koji se sintetizira kontinuirano, u smjeru 5’ → 3’
• 2. lanac se sintetizira sporije, tzv usporeni ili tromi lanac; diskontinuirana sinteza, odvija se u malim fragmentima, dugim 1000 do 2000 nukleotida, tzv: Okazakijevim fragmentima; napreduju u obrnutom smjeru od produbljivanja rašlji, ali u smjeru u kojem se sinteza DNA jedino može odvijati! (5’ → 3’)
• DNA primaza se veže direktno na DNA helikazui gradi PRIMOSOM; primosom produbljuje rašlje i kako se krede sintetizira RNA početnicu ili klicu (engl.primer); kratak slijed od 10 ribonukleotida prema lancu kalupu i tako stvara hibrid DNA/RNA
• DNA polimeraza nastavlja dodavati nukleotide
• Na vodedem lancu DNA primaza ugrađuje početnicu samo jednom
• Na usporenom lancu u eukariota početnice se sintetiziraju u intervalima od 200 nukleotida
• Izrezivanje početnice (a) iz lanca
• Praznine popunjuje DNA ligaza (povezuje 3’ kraj sintetiziranog DNA fragmenta s 5’ krajem prethodnog te tako zatvara pukotinu)
• Pri replikaciji DNA javlja se jedna pogreška na cca 10 9 - 10 10 repliciranih parova baza
• Važnu ulogu pri odstranjivanju pogrešaka ima DNA polimeraza; ona može izrezivati pogrešno sparene baze – “lektorska ili urednička sposobnost!
• Gen: dio DNA koji se eksprimira u vidu funkcionalnog produkta (bilo u obliku RNA ili u obliku polipeptida)
• Gen: redoslijed nukleotida u molekuli DNA koji sadrži uputu za neku bjelančevinu
Oštedenja DNA i popravci
Izravni obrat oštedenja DNA
Spontano oštedenje DNA
Oštedenja DNA inducirana zračenjem i kemijskim čimbenicima
Popravak izrezivanjem (ekscizijski popravak)
Popravak sklon pogreškama
• nasljedni karcinom debelog crijeva; mutacije u genima koji su uključeni u popravak krivo sparenih baza
• nasljedni karcinom dojke; defekti u genima koji kodiraju proteine uključene u popravak dvolančanih lomova (BRCA1 i BRCA2)
Veličina genoma različitih skupina organizama
• Genom: ukupna genetička informacija pohranjena u svim kromosomima nekog organizma
• Gen: dio DNA koji se eksprimira u vidu funkcionalnog produkta (bilo u obliku RNA ili u obliku polipeptida)
Gen je izrgrađen od EGZONA i INTRONA
• Introni ne određuju sintezu nekog staničnog proizvoda
• Igraju važnu ulogu u kontroli genske ekspresije
• Prosječan humani gen sadržava cca 9 egzona, 8 introna raspoređen na oko 30 000 parova baza
• Više od 90% prosječnog humanog gena čine introni
• Čine 25% ukupne genomske DNA
Alternativno prekrajanje
• Ponavljajudi (repetitivni) sljedovi DNA –satelitna DNA, od uzastopno ponovljenih nizova nekoliko tisuda kopija kratkih sljedova duljine od 1 do 500 nukleotida.
• U vinske mušice, česti slijed od ACAAACT
• Ponavljaju se milijunima puta u genomu
• Čine oko 10% DNA u vedine viših eukariota
• Ne prepisuju se i ne predstavljaju funkcionalnu genetičku informaciju
• Genom E. coli sadržava 4000 gena, a oko 90% koristi se za kodiranje proteina
• Genom kvasca, oko 2,5 puta je vedi od genoma E.coli; samo 4% gena sadržava introne, oko 70% kvaščeva genoma koristi se za kodiranje proteina
• U C.elegans, 25% genoma čine sljedovi za kodiranje proteina, a u vinske mušice oko 13%
• Genomi viših životinja vedi su oko 20-30 puta od onog u vinske mušice
• Ljudski genom ima oko 30 000-40 000 gena(dvostruki broj od onog u genomima C.elegansi vinske mušice)
• 25% ljudskog genoma čine introni
• Više od 60% od različitih tipova repetitivne DNA
• Samo 1-1,5% sadržava sljedove koji kodiraju proteine!
Funkcije gena u cvjetnice Arabidopsis thaliana, čiji genom sadrži 26 000 gena
• ZAKLJUČAK: Biološka složenost organizma nije funkcija broja gena u njegovom genomu!
Kromosom Telomere
Kromatin: kompleks DNA i proteina, histona
Osnovna strukturna jedinica kromatina je NUKLEOSOM
Kromatinskavlakna
• U interfaznoj jezgri vedinu kromatina čini EUKROMATIN; dekondenziran, geni se prepisuju,a DNA se udvostručuje
• Oko 10% interfaznog kromatina čini HETEROKROMATIN; kondenziran, transkripcijski neaktivan, sadržava visoko ponovljene sljedove DNA poput onih u centromerama i telomerama
Struktura telomera
Telomere imaju značajnu ulogu u održavanju kromosoma
• u čovjeka i ostalih sisavaca slijed telomernih ponavljanja je AGGGTT
•Enzim telomeraza omogudava “staničnu besmrtnost”; inaktivna u normalnim stanicama•Aktivna u zametnom epitelu•U tumorskim stanicama
top related