nfkbia deletion in glioblastomas
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NFKBIA Deletion in Glioblastomas
Denise M. Scholtens
Paula Andrea Velásquez Viveros
Medicine UPB 2011
INTRODUCTION
INTRODUCTIONGLIOBLASTOMA
• Tumors are named for the cell types from which they originate.
• Glioblastoma is the general name for a tumor that arises from the glial tissue, which supports and nourishes the brain.
INTRODUCTION
GLIOBLASTOMA
• There are several different kinds of glial cells: astrocytes, oligodendrocytes and ependymal cells.
Oligodendrocytes
Astrocytes
Ependymal cells
INTRODUCTIONGLIOBLASTOMA MULTIPLE
• Is a malignant astrocytoma that contains areas of dead tumor cells.
• Gliosarcoma and giant cell glioblastoma are variants of glioblastoma multiforme. Approximately 50% of astrocytomas are glioblastomas.
INTRODUCTIONGLIOBLASTOMA MULTIPLE
• Glioblastomas contain more than one cell type.
• While one cell type may die off in response to a particular treatment, the other cell types may continue to multiply.
• It makes very difficult the treatment.
INTRODUCTIONEPIDERMAL GROWTH
FACTOR
• Is a small mitogenic protein that is thought to be involved in mechanisms such as normal cell growth, oncogenesis, and wound healing.
• It’s over produced in tumors.
• EGFR pathway actives NFKB.
INTRODUCTION
NFKBIA gen
Encoding nuclear factor of κappa-light polypeptide
gene enhancer inB-cells inhibitor-α
It’s located in 14 chromosome
This gen encodes a protein called L-kappa-B (Inhibitor
of NFkappaB kinase)
This protein inhibits to NF-kappa-B trough a fusion between L-kappa-B -NF-
kappa-B
Which impedes its transfer to the nucleus and the
modification of the genetic expression.
RELATION• When it is inactive, NF-KB is
located in the cytoplasm.
• Whereas, it is active is transported to the nucleus, where it gets in contact with EGFR and increased its action.
• In tumor cells, the NFKB can induce cellular proliferation
RELATION• The increased signal in the
tumor's cells sent by the EGFR actives the NF-kappa-B receptor, causing the appearance of cancer, in this case, the multiple glioblastoma and the chemotherapy resistance.
NFKBIA
NUCLEUS
EGFR
NFKB
WITHOUT NFKB DELETION
NUCLEUS
EGFR
NFKB
NFKB DELETION
GENERAL OBJECTIVE
GENERAL OBJECTIVE:
• Analyze NFKBIA deletion in glioblastomas
MÉTODOS Y MATERIALES
MATERIALES Y MÉTODOS
Muestra
se utilizaron 10 sistemas de estudio
de pacientes con glioblastomas
Tratados entre días 26 de 1989 y 12 de
agosto de 2009
Estudiando los pacientes y
tumores
Tipos de datos:G= Datos del número de copia del gen E= Datos de expresión génica C= Datos clínicos M= O6 metilguanina DNA metiltransferasaS= Secuencia de datos (MGMT)
LÍNEAS CELULARES Y PREPARACIÓN DEL DNA GENÓMICO
Glioblastomas LN229, U87,y U118
PT67 células empaquetadoras
retrovirales
Los cultivos primarios se cultivaron a partir de muestras de glioma
maligno
Las muestras del DNA genómico del tumor y las líneas celulares, se
aislaron y cuantificaron por Espectofotometría
ESPECTOFOTOMETRÍA3. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la
energía es absorbida
4. La energía radiante no puede producir
ningún efecto sin ser absorbida.
1. Método de análisis óptico más
usado en las investigaciones
biológicas.
2. Compara la radiación absorbida de una
solución que contiene una cantidad desconocida
de solutos y una que tiene una cantidad
conocida de la sustancia
INMUNOBLOT
Método donde se separan
proteínas por electroforesis
En poliacrilamida
que se disuelven en nitrocelulosa
Se detectan con anticuerpos que
reconocen los antígenos que
hay en ellas
La separación depende del
tamaño y de la carga
APLICACIÓN DEL INMUNOBLOT
• Se realizó en el estudio para hallar en los pacientes la presencia del gen NFKBIA.
• Se sometieron las líneas celulares en SDS, cargado negativamente.
• De esa manera, se separaron las proteínas según su tamaño y su carga.
RESULTADOS
RESULTADOS
• En la unidad 1, se tomaron 219 glioblastomas, donde el 24,2% poseen deleción a NFKBIA.
• se afecta el cromosomas 14, el brazo corto en el loci 13.
RESULTADOS
• La dosis génica se asigna, según la ubicación del cromosoma.
• La supresión de NFKBIA se asocia a una pérdida significativa de expresión en los 175 glioblastomas en el estudio de un conjunto donde se habían combinado los datos de genes.
RESULTADOS
• Se han distinguido en diferentes estudios, varios subtipos de glioblastomas, como son: clásicos, mesenquimales, neuronales y proneuronales. Donde hay delación en mayor frecuencia en los proneuronales. Las amplificaciones de EGFR son mas comunes en los glioblastomas clásicos. Lo que indica exclusividad para la deleción de NFKBIA y amplificación de EGFR.
RESULTADOSSe miraron 3 pacientes.• Paciente 1: hay disminución en la
acción de NFKBIA.
• Paciente 2: hay un poco de aumento en NFKBIA, sin importar que haya amplificación de EGFR.
• Paciente 3: NFKBIA tiene acción en un 100%, ya que hay presencia de este y EGFR no está amplificándose.
DISCUSSION
DISCUSSIONBredel M “We have observed, in a previous study, that glioblastoma
cells that do not respond to temozolomide chemotherapy have comparatively low expression of NFKBIA14 and, in this study, that increasing NFKBIA expression in these cells sensitizes them to temozolomide.”
Agree
Sethi G “Our findings, together with research showing the role of NFKBIA as a gatekeeper for EGFR signaling.”
Agree
Chakravarti A “And the involvement of EGFR activation in the lack of response of glioblastoma cells to chemotherapy and radiotherapy”.
Agree
The Cancer Genome Atlas ResearchNetwork.
“The limited efficacy of molecular therapies targeting EGFR in glioblastomas suggests that the therapeutic effect of EGFR inhibition can be circumvented through cross-coupled signaling from other growth factor receptors that are mutated, amplified, or overexpressed in these tumors, such as PDGFRA, ERBB2, or MET”.
Agree
CONCLUSSION
CONCLUSSION• NFKBIA deletion allows that NFKB goes to nucleus, and it can
increase EGFR action, enhacing cell proliferation
• Analyzing the four molecular subtypes of glioblastoma, the research found that NFKBIA deletion and EGFR amplification have an special exclusive for only one subtype.
CONCLUSSION• The researches of the NFKBIA gene, whose absence causes biological
situations similar to the increase of EGFR, contributes to the development of possible solutions to glioblastomas and its Resistance to treatment with temozolamide.
• In future researches, It will be taken into account not only the alteration of NFKBIA as an inductor of brain neoplasic processes. It will be taken into account too the fact that the gene alteration can be found in some variety of tumors such as Hodking lymphoma, Multiple myeloma, melanoma or breast, lung and colon cancer, seeking for efective treatments with bortezomib
MAPA CONCEPTUAL
GRACIAS
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