determination of inorganic ions in seawater using capillary zone electrophoresis

19

Bull. Soc. Sea Water Sci., Jpn., 67, 19－ 32 （2013）Bulletin of the Society ofSea Water Science, Japan

特集「塩及び海水の分析法及び信頼性向上の最近の展開」（総説）

キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量

福士　惠一＊，服部　考成＊，日高　祐一郎＊

Determination of Inorganic Ions in Seawater Using Capillary Zone Electrophoresis

Keiichi FUKUSHI＊, Takanari HATTORI

＊, Yuichiro HIDAKA＊

　Innovative applications of capillary zone electrophoresis (CZE) for determining of inorganic ions in seawater were comprehensively reviewed. Other highly saline samples, such as brine water, formation water, cooking salts, and jellyfish were also included. Emphasis was placed on covering almost all references published from the beginning to the present for seawater analysis using CZE. The procedures for minor and major anions and cations introduced were tabulated for the purpose of facilitating the method selection. References published from 1993 to January 2013 were summarized in this review.

Key Words : Analysis, Capillary zone electrophoresis, Inorganic ions, Seawater,

＊ 神戸大学大学院海事科学研究科（〒 658-0022 兵庫県神戸市東灘区深江南町 5-1-1） Kobe University Graduate School of Maritime Sciences, 5-1-1 Fukaeminami-machi, Higashinada-ku, Kobe 658-0022, Japan

1．緒　　言

地下資源の乏しい日本では，海水溶存成分及びマンガン団塊，熱水性硫化物鉱床等，深海底の鉱物資源が将来の金属資源の一つとして注目されている 1 -3）．熱水中の BaやCaなどのアルカリ土類元素は，SO4

2－と塩を生成し硫酸塩鉱物として沈殿し，また，二酸化炭素濃度の高い熱水と地核が反応すると，リンは岩石から取り除かれ，熱水に濃集すると言われている．したがって，海水溶存成分等を資源として利用する場合，海水中の主要及び微量無機イオンを定量することは重要である．一方，平成 24年版環境白書 4）

によれば，平成 16年に初めて青潮の発生が確認されて以来，昨年まで毎年，発生が確認され，依然として富栄養化は世界的にも問題となっている 5 -12）．また，最近，フェノールの海水中における光分解において，NO2

－，HCO3－，

CO32－，Br－等が影響することが示された 13）．したがって，

海洋環境保全の観点からも海水中無機イオン成分濃度を把握する必要性が高い．海水中の金属成分定量法としては，高周波誘導結合プラズマ質量分析法（Inductively coupled plasma mass spec-trometry， ICP-MS）14 -16）等，優れた分析法が確立されている．しかし，これらの方法は装置が高価であり，一般に，共存成分から分析目的成分を分離濃縮するために前処理を必要とする 17）．一方，陰イオン定量法としてはイオンクロマトグラフィー（IC）による方法が提案されている．海水中では，ほとんどすべての元素がイオンとして存在しており，高濃度塩類の妨害を防ぐ必要があるが，ICを海水

分析に利用することは理にかなっていると考える．たとえば，海水中の Br－，NO3

－，I－ 18），海水及び食塩中の I－ 19, 20），海水中の Br －21）の定量等が報告されている．最近，Itoら 22）

は，非常に高感度，高精度な IC法を開発し，海水中のNO2－，

NO3－，Br－，I－を同時定量した．さらに，同グループ 23）は，

海水中の NO2－，NO3

－，NH4＋の選択的同時定量法を開発

した．また，Wangら 24）は，海水中の NO2－，NO3

－，PO43－，

SO42－，F－，Br－を同時定量するために，cycling-column-

switching法を開発した．一方，IC以外のイオン分析法としては，より汎用性の高いキャピラリーゾーン電気泳動法（capillary zone elec-trophoresis，CZE）がある．我々は，CZEにより，海水中無機イオン定量に関する研究を行ってきた．そこで，本総説では，我々の開発した分析法も含め，海水，かん水，地層水，食塩，クラゲ等の高塩分試料中の無機イオン分析に関して現在に至るまでに発表された CZEに関する論文をまとめた．これにより，CZEの海水分析への応用研究に対して今後の展望が得られるとともに，CZEが実際に海水分析の場で利用されるようになれば幸いである．なお，海水分析も含め CZEの応用 25 -33），感度不足を改

善するための各種濃縮法 34 -44）に関する総説はこれまで多数，報告されている．また，CZEにおける濃縮法としては最高の濃縮率が得られる動電過給前濃縮法 45 -50）についても多くの報告がある．さらに，最近，CZEの長所及び短所について詳細に述べた総説 51）も報告された．CZEに関する理解をより深めるためにはそれら総説を参照されたい．

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）20

2．キャピラリーゾーン電気泳動法

2.1　装置と原理 52）

Fig. 1に装置の概略を示す．まず左右の泳動液（Back-ground electrolyte，BGE）容器に BGEを満たす．試料（Sample）容器の反対側 BGE容器を減圧（あるいは，試料側 BGE容器を加圧）することにより，内径 50～ 100μmのガラスでできた細い管（Capillary，キャピラリー）にBGEを満たす．次いで試料側のキャピラリー端を試料容器に挿入する．一般的な試料導入法としては，圧力差法（Hydrodynamic or hydrostatic injection）と電気的導入法（Electrokinetic or electromigration injection）がある．圧力差法では，試料容器と反対側 BGE容器との間に圧力差を設け，時間により導入量を調節する．圧力差法には，試料容器を反対側 BGE容器より高く保つ落差法，試料容器を加圧する加圧法，試料容器の反対側 BGE容器を真空に保つ真空吸引法がある．電気的導入法は，試料容器の反対側BGE容器中の白金電極（Pt electrode）極性を分析目的成分の極性と反対に保ち，試料成分を電気的に導入する方法である．いずれかの方法で試料をキャピラリー内に導入する．次いで，試料側のキャピラリー端を再び BGE容器に戻し，高電圧電源（High voltage）により，左右の BGE容器中の Pt electrodeに高電圧を印加する．試料中の各成分は，キャピラリー内で発生する電気浸透流及び電気泳動（後述）によりキャピラリー内を移動し，電気泳動移動度（後述）の違いによって分離され，一般的には吸光度検出器（UV-Vis detector）により検出される．分析目的成分が UV吸収を持つ場合には，直接検出される（直接吸光法）が，持たない場合には，UV吸収を持つ成分を BGEとして使用し，UV吸収を持たない分析目的成分を負のピークとして検出する間接吸光法 53, 54）が用いられる．なお，近年，イオン分析では電気伝導度検出器が用いられるようになってきた．また，ポータブルタイプの電気泳動装置も開発されている 55）．

2.2　電気浸透流と電気泳動 52）

キャピラリーが BGEで満たされるとキャピラリーの内壁は負に帯電し，BGE中の陽イオンが引きつけられ，電気二重層と呼ばれる部分が形成される．その結果，内壁とBGEとの境界面において電位差が発生する．この状態において，両電極間に電圧をかけると，電気二重層を形成している陽イオンは陰極方向に移動し，これに伴い，BGE全体の陰極方向への流れが生ずる．これが電気浸透流（Electroosmotic flow，EOF）である．一方，分析目的成分が陰イオンの場合には陽極に，陽イオンの場合には陰極に電気的に引きつけられて移動する．この現象が電気泳動と呼ばれる．したがって，分析目的成分は EOFと電気泳動の両方によりキャピラリー内を移動する．この際，イオンの種類によって電気泳動による移動しやすさ（この指標が電気泳動移動度と呼ばれる）が異なるので，それぞれのイオンは分離される．なお，一般に陰イオン分析の場合には，泳動時間を短縮するために，BGEに陽イオン界面活性剤を添加し，EOFの向きを陰極から陽極に反転することが行われる．

2.3　一時的等速電気泳動 36）

キャピラリー内において，試料ゾーンと BGEゾーンとの電場の差を作り出す（たとえば試料を希釈する，Field-amplified sample stacking 56），FASS）等により，泳動中に分析目的成分を濃縮する（試料ゾーンの幅を狭くする）方法をオンライン濃縮法という．一時的等速電気泳動もその一つである．等速電気泳動（Isotachophoresis，ITP）とは以下のような現象をいう．まず，キャピラリー内において，試料中のいずれの分析目的イオンよりも移動度の大きなイオン（リーディングイオン）を含むリーディング電解液（Leading electrolyte，LE）と小さなイオン（ターミナルイオン）を含むターミナル電解液（Terminating electrolyte，TE）との間に試料を挟み込み，電圧を印加する．分析目的イオン濃度がリーディングイオンおよびターミナルイオン濃度より低い場合，分析目的イオンは濃縮され，定常状態に達するとすべてのイオンは等速で泳動する．この現象を利用した分析法を等速電気泳動法（ITP）という．CZEにおいて，分離開始前に一時的に ITP状態を作り出して分析目的イオンを濃縮し，その後ゾーン電気泳動状態に移行し，各分析目的イオンを分離，検出するのが一時的等速電気泳動（Tansient isotachophoresis，tITP）である．現在，海水のような高塩分試料に対して適用可能な唯一のオンライン濃縮法である．

3．海水中陰イオン

3.1　微量陰イオン一般に，海水中の主要陰イオンとは，Cl－，SO4

2－，HCO3

－，Br－，B（OH）4－（B（OH）3），F－を指し，それ以外

の成分が微量陰イオンとされているが 57），本総説では，便宜上，Br－を含み上記以外の陰イオンを微量陰イオンとFig. 1　Basic components of a CZE system

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 21

して扱うこととする．現在までに提案された CZEによる陰イオン分析法について，分析目的成分，分析条件，検出限界（Limit of detection，LOD），相対標準偏差（Relative standard deviation，RSD）等を Table 1にまとめたが，詳細は各文献を参照して頂きたい．汽水等で塩分が極端に低い場合 58）を除き，UV吸収を有する海水中微量陰イオンを UV検出－ CZEにより定量する場合，共存する高濃度 Cl－（0.56 mol/l 57））も UV吸収を持つため，移動度が Cl－と同程度の分析目的成分ピークを検出できない．そこで，Sakaiら 59）は，Cl－の影響を打ち消すために，BGEとして 750 mmol/l Cl－を用い（EOFを反転），海水試料中の NO3

－を検出することに初めて成功した．同様に，Songら 60）は，EOFを反転するために 2.0 mmol/l塩化セチルトリメチルアンモニウム（Cetyltrimethyl- ammonium chloride，CTAC）を添加した 100 mmol/l NaCl溶液をBGEとし，高濃度NaClを含む地下水を希釈し，NO3

－，I－，SCN－を定量した．著者ら 61）も，EOFを反転せず，10倍に希釈した人工海水 62）（Br－を含まない）を BGEとする方法を開発し，試料中塩分の増加に伴い，Br－の濃度は同じでも，そのピーク高さは直線的に減少するが，泳動時間及びピーク面積はほぼ一定であることを示した．さらに，表面及び海底付近の海水試料を 10倍に希釈し，Br－を定量したところ，検量線法と標準添加法による結果は一致した．Kocatürkら 63）は，ポリエチレンイミン（PEI）でコーティングしたキャピラリーを用いて EOFを反転し，BGEに 20 mmol/l NaClを添加し，さらに試料を 20倍に希釈し，海水中の Br－を 2分以内に定量した．Dingら 64），Carouら 65）も同様の考えに基づき，BGEに 1.5 mol/l NaClあるいは Na2SO4を添加し，海水中や 0.5 mol/l硫酸ナトリウム溶液中の Br－，NO3

－を定量した．Timerbaevら 66）も BGEとして 18-crown-6を添加した 100 mmol/l KClを用い，10倍希釈した海水で調製したモデル試料中の陰イオンを分離した．

10倍希釈した人工海水をBGEとする著者らの方法では，海水試料も 10倍希釈する必要がある．しかし，一般的に，海水中の NO2

－及び NO3－は低濃度であり，希釈すると検

出が困難になる．そこで，BGEとして希釈しない人工海水を用い，海水試料も希釈せずに分析したところ，比較的高 濃 度 の NO2

－（90－130μg/l NO2－-N），NO3

－（130－1160μg/l NO3

－-N）を定量できた 67）．本法では，試料中の塩分の増加とともに，NO2

－，NO3－の濃度は同じでも，

それらのピーク高さは直線的に減少するが，泳動時間，ピーク面積はほぼ一定であることを示した．すなわち，ピーク面積を用いれば，定量結果は試料中塩分の影響を受けないため，同様に，Br－を含まない人工海水を BGEとし，海水及び河川水中の Br－，NO2

－，NO3－，雨水中の NO2

－，NO3

－を定量した 68, 69）．この方法では，海水中の低濃度NO2

－，NO3－を定量できないため，高感度化するために，

著者らは tITPをオンライン濃縮法として利用する方法を

開発した．この場合，BGEとして用いる人工海水中の Cl－

がリーディングイオンとして働く．初めに，ターミナルイオンとして過塩素酸イオンを試料中に添加する方法 70, 71），次いで，試料導入後，TEとして 600 mmol/l酢酸ナトリウム溶液を導入する方法 72），ターミナルイオンとして150 mmol/l SO4

2－と 10 mmol/l BrO3－の二種類を 10倍希釈

した試料（FASS）中に添加する方法 73）が開発された．さらに，試料を希釈せずに tITPにより，NO2

－，NO3－を高

感度，高精度で定量するために，リン酸バッファーで pH 3.0に調整した人工海水（Br－を含まない）を BGEとする方法が提案された 74）．この場合，試料導入後，TEとして600 mmol/l酢酸ナトリウム溶液を導入した．海水中の栄養塩類定量のための標準試料（MOOS-1，National Research Council of Canada （NRC）より入手，この時点では標準試料として認定されていない）を分析した結果，NO2

－定量結果及び NO2

－と NO3－の定量結果合計は，表示されてい

る許容範囲内であった．さらに，本法により，大阪湾沿岸で採取した表面及び海底付近の海水中 NO2

－，NO3－を定量

したところ，ナフチルエチレンジアミン吸光光度法（Naph-thylethylenediamine spectrophotometry）75）（NO2

－）及び銅－カドミウムカラム還元－ナフチルエチレンジアミン吸光光度法 76）（NO3

－）による結果と良く一致した．著者ら 77）は，人工海水（Br－を含まない）BGEに CTAC

を添加し，I－とイオン対を形成させて I－の移動度を低下させ，共存する Br－，NO2

－，NO3－から分離し，酢酸イオ

ンをターミナルイオンとする tITPを利用して海水中の I－

を定量する方法を開発した．さらに，BGE中のCTAC濃度，ターミナルイオン及び検出波長について検討し，海水中のI－及び IO3

－の同時定量法を開発し 78），それを用いて大阪湾沿岸で採取した表面及び海底付近の海水を分析し，採水場所の特徴を反映していると考えられる興味深い定量結果を得た 79）．廣川らもシミュレーションを併用して tITPの最適条件を確立し 80），沿岸表面海水及び深層水中の I－を定量し，ICによる結果と良く一致することを示した 81）．この場合，ターミナルイオンとして，2-（N-モルホリノエタンスルホン酸（2-（N-morphorino）ethanesulfonate，MES）が用いられた．また，CTAC濃度等を検討し，ターミナルイオンを電気的に導入する等，分析条件を改良し，I－，IO3

－同時定量法を確立し，海水中これら成分定量結果は，ICによる結果と同様であることを示した 82）．同グループ 83）

は，キャピラリー内に還元剤（220 mmol/l塩化ヒドロキシルアミン（Hydroxylamine hydrochloride）を含む 300 mmol/l NaCl溶液）導入した後，試料を導入し，試料中の還元されやすい種の Iをキャピラリー内において I－に還元し，全無機態ヨウ素（Total inorganic I，TII）濃度を求めた．また，0.03％ H2O2を添加した試料に 300 W水銀ランプの紫外線を 2時間照射し，有機態ヨウ素化合物（Organic io-dinated compounds，OIC）を酸化した後，CZE分析を行い，全ヨウ素（Total iodine，TI）濃度を求め，TIと TIIとの差

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）22

Table 1　CZE procedures for anionic analyses

Anions Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

NO3－ Seawater 750 mmol/l NaCl and 0.5 mmol/l

CIA-Pak OFM Anion-BT （to reverse EOF, Waters）; direct UV （214 nm）

Standard addition method ［59］ Sakai et al. （1993）

NO3－,

I－, SCN－

Subterranean water

Dilution （1:2-1:10）

100 mmol/l NaCl and 2 mmol/l cetyltrimethylammonium chloride （CTAC）; direct UV （214 nm）

Recovery, 91-113％ ［60］ Song et al. （1995）

Br－ Seawater Filtration, dilution （1:10）

10-fold diluted artificial seawater （without Br－）, pH 7.0; direct UV （200 nm）

Limit of detection （LOD, S/N＝3）, 0.46 mg/l; relative standard deviation （RSD） of peak area, 1.4％

［61］ Fukushi et al. （1998）

Br－ Seawater Dilution （1:20） Polyethyleneimine （PEI）-coated capillarys were used to reverse the EOF; 20 mmol/l tris （hydroxymethyl）aminomethane （Tris, pH 8.2） and 20 mmol/l NaCl;

direct UV （210 nm）

LOD, 0.45 mg/l; RSD of the analytical results, 3％; recovery, 98-104％

［63］ Kocatürk et al. （2003）

Br－, NO3

－Seawater （purchased from Sigma）, 0.5 mol/l Na2SO4

20 mmol/l borate and 1.5 mol/l NaCl or Na2SO4, pH 8.5; direct UV （214 nm）

Standard addition method ［64］ Ding et al. （1998）

Br－, NO3

－Estuarine water

50 mmol/l borate （pH 9.3） and 1.5 mol/l NaCl; direct UV （200 nm）

Limit of quantitation （LOQ） （S/N＝10）, 28μg/l （Br－） and 19μg/l （NO3

－）; RSD of peak area: 1.76％ （Br－） and 1.32％ （NO3

－）; standard addition method

［65］ Carou et al. （2001）

Br－, I－, NO2

－, NO3

－, SCN－

Model sample prepared using seawater

Filtration, dilution （1:10）

100 mmol/l KCl （pH 4.0） and 20 mmol/l 18-crown-6

［66］ Timerbaev et al. （1999）

NO2－,

NO3－

Seawater Filtration Artificial seawater （pH 7.9） and 3 mmol/l CTAC; direct UV （210 nm）

LOD （S/N＝3）, 70μg/l （NO2－

-N） and 40μg/l （NO3－-N）;

RSD of peak area, 2.4％ （NO2－）

and 1.5％ （NO3－）; recovery,

97-114％

［67］ Fukushi et al. （1999）

Br－, NO2

－, NO3

－

Seawater, river water, rainwater

Filtration Artificial seawater （without Br－, pH 7.9） and 3 mmol/l CTAC; direct UV （210 nm）

LOD, 460μg/l （Br－）, 72μg/l （NO2

－-N）, and 42μg/l （NO3－

-N）; RSD of peak area, 1.1％ （Br－）, 1.5％ （NO2

－）, and 0.97％ （NO3

－）; the analytes can be determined using peak area response in spite of differences in the differences in the salinity of samples

［68］ Fukushi et al. （2000）［69］ Fukushi and Ishio （2000）

NO2－,

NO3－

Seawater Filtration, addition of ClO3

－ （200 or 600 mmol/l） as a terminating ion

Artificial seawater （without Br－, pH 7.9） and 3 mmol/l CTAC; direct UV （210 nm）

On-line preconcentration by transient isotachophoresis （tITP）; LOD （S/N＝3）,

63μg/l （NO2－-N） and

33μg/l （NO3－-N）; RSD of

peak area, 3.2％（NO2－） and

2.9％（NO3－）

［70］ Fukushi et al. （2000）［71］ Fukushiet al. （2000）

NO2－,

NO3－

Seawater Filtration Artificial seawater （without Br－, pH 7.9） and 3 mmol/l CTAC; terminating electrolyte （TE）, 600 mmol/l acetate; direct UV （210 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 15μg/l （NO2

－-N） and 7.0μg/l （NO3－

-N）; RSD of peak area, 7.3％ （NO2

－） and 0.8％ （NO3－）

［72］ Ishio et al. （2002）

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 23

Anions Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

NO2－,

NO3－

A proposed certified reference material for nutrients in seawater （MOOS-1a）

Filtration, dilution （1:10）, addition of SO4

2－ （150 mmol/l） and BrO3

－ （10 mmol/l） as terminating ions

Artificial seawater （without Br－, pH 7.9） and 3 mmol/l CTAC; direct UV （210 nm）

On-line preconcentration using tITP and field-amplified sample stacking （FASS）; LOD （S/N＝3）, 2.2μg/l （NO2

－-N） and 1.0μg/l （NO3

－-N）; RSD of peak area, 1.9％ （NO2

－） and 1.4％ （NO3

－）; the results almost agreed to the assigned tolerance interval

［73］ Fukushi et al. （2002）

NO2－,

NO3－

Seawater Filtration The capillary was flushed with 0.1 mmol/l dilauryldimethylammonium bromide （DDAB） to reverse EOF prior to sample introduction; artificial seawater （without Br－） adjusted to pH 3.0 with phosphate buffer; TE, 600 mmol/l acetate; direct UV （210 nm）

LOD （S/N＝3）, 2.7μg/l （NO2－

-N） and 3.0μg/l （NO3－-N）;

RSD of peak area, 2.0％ （NO2－）

and 0.75％ （NO3－）; the CZE

results agreed with the results obtained by naphthylethylenediamine spectrophotometry

［74］ Fukushi et al. （2003）

I－ Seawater Filtration Artificial seawater （without Br－, pH 7.9） and 10 mmol/l CTAC; TE, 600 mmol/l acetate; direct UV （225 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 3.0μg/l; RSD of peak area, 2.9％ ; the results obtained by use of the calibration graph were agreed with those obtained by standard addition method

［77］ Yokota et al. （2003）

I－, IO3

－Seawater Filtration Artificial seawater （without Br－,

pH 7.9） and 20 mmol/l CTAC; TE, 2 mol/l phosphate; direct UV （221 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 4.0μg/l （I－） and 5.0μg/l （IO3

－-I）; RSD of peak area, 2.9％ （I－） and 2.3％ （IO3

－）; recovery, 87-112％ （I－） and 93-112％ （IO3

－）

［78］ Yokota et al. （2004）, ［79］ Yokota and Fukushi

I－ Seawater Filtration 500 mmol/l NaCl （pH 2.4） and 25 mmol/l CTAC; TE, 500 mmol/l 2-（N-morpholino）ethanesulfonate （MES, pH 6.0）; direct UV （226 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 0.6μg/l; RSD of peak area, 2.6％; internal calibration method; recovery, 99.6-100.4％; the CZE results agreed with the IC results

［80］ Hirokawa et al. （2003）, ［81］ Ito et al. （2003）

I－, IO3

－Seawater Filtration 500 mmol/l NaCl （pH 2.4） and

12.5 mmol/l CTAC; TE, 500 mmol/l MES （pH 6.5）, electrokinetic injection; direct UV （226 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 0.23μg/l （I－） and 10μg/l （IO3

－-I）; RSD of peak area, 1.0％ （I－） and 1.4％ （IO3

－）; internal calibration method; the CZE results agreed with the IC results

［82］ Huang et al. （2004）

Total inorganic I （TII）, total I （TI）, dissolved organic I （DOI）

Seawater Filtration 500 mmol/l NaCl （pH 2.4） and 12.5 mmol/l CTAC; TE, 500 mmol/l MES （pH 6.5）; direct UV （226 nm）; reducible I species were converted into I－ inside the capillary by hydroxylamine hydrochloride introduced into the capillary before sample introduction; organic I compounds （OIC） were re-mineralized using H2O2 and UV irradiation to reducible I species before CZE analysis

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 0.4μg/l （TI）, RSD of peak area, 1.45％ （TI）; recovery of TI, 83.4-101.1％; the CZE results agreed with the IC results for TII

［83］ Huang et al. （2004）

Table 1　（continued）

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）24

Anions Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

NO2－,

NO3－,

Br－, I－

Artificial seawater

Dilution （1:5） 10 mmol/l phosphate （pH 8.0） and 10, 30 mmol/l 3-（N,N-dimethyldo-decylammonio）propane sulfonate （DDAPS）; direct UV （214 nm）

LOD, 5μg/l （NO2－）, 11μg/l

（NO3－）, 7μg/l （Br－）, and 11

μg/l （I－）; RSD of peak area, 3.1％ （NO2

－）, 7.2％ （NO3－）,

3.5％ （Br－）, and 10.3％ （I－）

［85］ Woodland and Lucy （2001）

I－ Seawater （purchased from Sigma）, cooking salt

Dilution （1:20） Polyacrylamide coated capillaries to ensure the stable EOF; 20 mmol/l KH2PO4 （pH 9.8） and 0.7％ PEI; direct UV （230 nm）

LOD, 0.17μmol/l （diluted seawater） and 89 nmol/l （cooking salt）; RSD of peak area, 0.93％ （diluted seawater） and 1.35％ （cooking salt）

［86］ Pantucková and Krivánková （2004）

I－ Seawater （purchased from Sigma）, cooking salt

Dilution （1:10）,poly（vinyl-pyrrolidone） （PVP） and hydrazine （N2H4） were

added to the samples

Seawater analysis:Leading electrolyte （LE）, 50 mmol/l HCl, 100 mmol/l β-alanine （β-Ala）, 10％ PVP 40, and 2.86 mmol/l hydrazine dihydrochloride （N2H4×2HCl） （pH 3.52）; TE, 8 mmol/l H3PO4, 16 mmol/l β-Ala, 10％ PVP 40, and 5 mmol/l N2H4 （pH 3.85）; BGE, 8 mmol/l HCl, 16 mmol/l β-Ala, 10％ PVP 40, and 2.86 mmol/l N2H4×2HCl （pH 3.2）; direct UV （230 nm）

Cooking salt analysis:LE, 8 mmol/l HCl, 16 mmol/l β-Ala, 10％ PVP 40, and 2.86 mmol/l N2H4

×2HCl （pH 3.2）; TE, 8 mmol/l H3PO4, 16 mmol/l β-Ala, 10％ PVP 40, and 5 mmol/l N2H4 （pH 3.85）; BGE, same as seawater analysis

LOD, 2.8μg/l （seawater） and 4.4μg/l （cooking salt）; RSD of peak area, 7.71％ （seawater） and 0.97％ （cooking salt）

［87］ Pantuckováet al. （2007）

Br－, NO3

－Seawater Filtration 5 mmol/l phosphate （pH 7）, 300

mmol/l NaCl, 10 mmol/l N-tetra- decyl-N,N-dimethyl-3-ammonio-1-propanesulfonate （Zwittergent-3-14）, and 50 mmol/l polyoxyethylene （20） sorbitan monolaurate （Tween 20）; direct UV （215 nm）

LOD （S/N＝3）, 0.8μmol/l （Br－） and 0.6μmol/l （NO3

－）; RSD of peak area, 5.9-7.0％ ; standard addition method

［88］ Mori et al. （2002）

NO3－ Seawater Dilution （1:2.5） 100 mmol/l sodium phosphate （pH

6.2） and 150 mmol/l DDAPS; direct UV （210 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 35μg/l; RSD of peak area, 3.0％; standard addition method

［89］ Tu and Lee （2002）

NO2－,

NO3－,

Br－, I－

Seawater Filtration Enrichment column, 15 cm×250μm AS18-coated polymer monolith column; separation column, 80 cm×75μm AS18-coated capillary; BGE, 120 mmol/l Tris/ClO4

－; direct UV （230 nm）

LOD （S/N＝3）, 3.2 nmol/l （NO2

－）, 0.47μmol/l （NO3－）,

63μmol/l （Br－）, and 75 pmol/l （9.5 ng/l, I－）; RSD of peak area, 8.3％ （NO2

－）, 5.2％ （NO3

－）, 13.7％ （Br－）, and 2.7％ （I－）

［90］ Hutchinson et al. （2005）

Cl－, SO4

2－, NO2

－, NO3

－, F－, PO4

3－

Estuarine water

5 mmol/l chromate and 0.5 mmol/l CIA-Pak OFM-BT, pH 8.0; indirect UV （254 nm）; 10 mmol/l sulfate and 0.5 mmol/l CIA-Pak OFM-BT; direct UV （214 nm）

LOD, 15-157μg/l （hydrostatic injection） and 1.6-7.1μg/l （electromigration injection）; standard addition method

［58］ Jackson and Haddad （1999）

Table 1　（continued）

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 25

を溶存有機態濃度（Dissolved organic iodine，DOI）とした．この際，I－，IO3

－同時定量法 82）により定量したこれら合計濃度は，いずれの試料においても TIIの値より低かったが，理由についてはわかっていない．同グループ 83）及び著者らの方法 78）により，北太平洋（3箇所，水深 0－5500 m）で採取した海水中の I－，IO3

－，TII，TI，DOIが定量され，Iの挙動は，溶存酸素及びケイ素，窒素，リンのような栄養塩濃度変化と相関があり，鉛直分布は生物活動と関連があることが示された 84）．高濃度 Cl－の影響を防ぐ他の方法として，分析目的成分の

移動度を Cl－の移動度より低下させ，分析目的成分ゾーンをCl－ゾーンから離して検出することが考えられる．Woodlandと Lucy85）は，両性界面活性剤である 3-（N,N-ジメチルドデシルアンモニオ）プロパンスルホン酸（3-（N,N-dimethyldo-decylammonio）propane sulfonate，DDAPS）を BGE に添加すると，BGEの電気伝導度を増加せずに NO2

－，NO3－，

Br－，I－の移動度を低下できることを示した．この場合，電流値，すなわちジュール熱の発生が小さく，試料ゾーンの電気的拡散を抑制できる．電気的拡散をさらに低下するために，人工海水試料を 5倍に希釈し，10及び 30 mmol/l DDAPS を添加した BGE を用い，150μmol/lの NO2

－，NO3

－，Br－，I－を含む人工海水試料中のこれら成分を分離検出した．Pantuckováと Krivánková 86）は，BGEに添加した PEIと I－との相互作用を利用して I－の移動度を低下させ，海水（20倍希釈）及び食塩中の I－を Cl－等の共存成分から分離検出できることを示した．同グループ 87）は，切り替え器を介して ITPと CZEを結合した市販装置により，同様の試料中の I－を定量した．すなわち，ITP部にお

いて試料中高濃度 Cl－を除去した溶液を CZE部に送り，I－

の分離，検出を行うシステムである．Moriら 88）は，高濃度Cl－の影響を防ぐために上記二つの方法を併用し，海水中の Br－，NO3

－を定量した．すなわち，BGEに 300 mmol/l NaCl及び両性界面活性剤として N-テトラデシル-N,N-ジメチル-3-アンモニオ-1-プロパンスルホン酸（N-tetradecyl-N,N-dimethyl-3-ammonio-1-propanesulfonate，Zwittergent-3－4），中性界面活性剤としてポリオキシエチレン （20） ソルビタンモノラウレート （polyoxyethylene （20） sorbitan monolau-rate，Tween 20） を添加し，高濃度 NaCl添加による電気伝導度の上昇（試料ゾーンの電気的拡散）を抑制し，同時に両性界面活性剤との相互作用を利用し，NO3

－等の移動度を変化させ，分離の改善を行った．Tuと Lee89）は，BGEへの NaCl及び両性界面活性剤の添加に加え，tITPによるオンライン濃縮法を併用した海水中の NO3

－定量法を提案した．この場合，試料中の Cl－がリーディングイオン，BGE中の H2PO4

－がターミナルイオンとして作用するため，新たに別の溶液を導入しなくて済むという長所がある．

Hutchinsonら 90）は，AS18陰イオン交換ラテックスナノ粒子（Dionex）をコーティングして調製した前濃縮カラム（AS18-coated polymer monolith column）で海水中のNO2

－，NO3－，Br－，I－を濃縮後，溶離し，CZEで定量す

る分析法を開発した．特に I－の LOD（S/N＝ 3）は9.5 ng/l，ピーク面積の RSDは 2.7％であり，高感度，高精度な方法である．上記以外の分析目的成分として，著者らは，オンライン

濃縮法として tITPを用い，BGEとして 2,6-ピリジンジカ

Anions Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

PO43－ Seawater,

certified reference material for nutrients in seawater （MOOS-1a）

Filtration 5 mmol/l 2,6-pyridinedicarboxylic acid （PDC） and 0.01％ hydroxypropylmethylcellulose （HPMC）, pH 3.5; TE, 500 mmol/l MES （pH 3.5）; indirect detection （200 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 16μg/l （PO4

3－-P）; RSD of peak area, 2.6％ ; the results for seawater agreed with those obtained using a conventional spectrophotometric method （molybdenum blue spectrophotometry）; the results for MOOS-1 were very similar to certified values

［91］ Okamotoet al. （2006）, ［92］ Okamotoet al. （2007）

BrO3－ Seawater,

cooking saltFiltration Artificial seawater （without Br－, pH

3.0）; TE, 600 mmol/l aceteate; direct detection （210 nm）

On-line preconcentration using tITP; LOD （S/N＝3）, 30μg/l （BrO3

－-Br）; RSD of peak area, 6.4％ ; recovery （seawater）, 85-105％ ; linear regression equations relating area and height responses to BrO3

－ concentration were obtained using cooking salt samples

［94］ Fukushiet al. （2009）

a（Proposed） certified reference material for nutrients in seawater distributed by the National Research Council of Canada （NRC）.

Table 1　（continued）

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）26

ルボン酸（2,6-pyridinedicarboxylic acid，PDC）溶液を用いた間接吸光法による PO4

3－（海水中では主として HPO42－の

形で存在しているが 57），便宜的に PO43－とした）定量法 91, 92）

を確立した．海水中の栄養塩類定量のための標準試料（MOOS-1，標準試料としてすでに認定済み）及び大阪湾沿岸で採取した海水試料を分析した際のエレクトロフェログラムを Fig. 2に示す．本法によるMOOS-1中の PO4

3－

定量値は，認証値とほぼ同様の値であった．また，海水試料中の PO4

3－定量結果は，モリブデンブルー吸光光度法（Molybdenum blue spectrophotometry）93）による定量結果と良く一致した．さらに，同様の方法による BrO3

－定量法 94）を提案した．海水及び市販食塩調製試料に標準添加を行い，分析したところ，海水試料の場合，回収率は 85－105％であった．食塩調製試料の場合，ピーク面積及びピーク高さの BrO3

－濃度に対する回帰式は，良い直線性を示した．

3.2　主要陰イオン著者らが調べた限り，海水中主要陰イオン（本総説では，

Cl－，SO42－，HCO3

－，B（OH）4－（B（OH）3），F－ を指す）

を CZEで定量した報告はあまり見られない．JacksonとHaddad58）は，下水処理場の放流水出口付近汽水（低濃度Cl－（12.4 mg/l）を含む）中の Cl－，SO4

2－，NO3－を間接

吸光法により定量した．この際，試料導入法として圧力差法を用いたが，電気的導入法を利用すれば，F－，PO4

3－も

定量できることを示した．さらに SO42－を含む溶液を BGE

として用い，NO2－と NO3

－を同時定量した．ただし，電気的導入法は，試料中塩分（電気伝導度）の影響を強く受けるため，定量には標準添加法を用いた．汽水でも塩分が高い場合や汽水以外の海水では，主要陰イオン濃度は高いので，試料を希釈すれば，間接吸光法あるいは電気伝導度検出法により定量できると考える．ただし，分析目的成分の存在形態及び相互分離等に関する検討は必要である．

4．海水中陽イオン

4.1　微量陽イオン一般に，海水中の主要陽イオンとは，Na＋，Mg2＋，Ca2＋，

K＋，Sr2＋を指し，それ以外の成分が微量陽イオンとされているが 57），本総説では，便宜上，Sr2＋を含み上記以外の陽イオンを微量陽イオンとして扱うこととする．現在までに提案された CZEによる陽イオン分析法について，分析目的成分，分析条件，LOD，RSD等を Table 2にまとめたが，詳細は各文献を参照して頂きたい．Liuと Lee95）は，海水試料中の金属成分とトリエチレンテトラミン 6酢酸（triethylenetetramine-hexaacetic acid，TTHA）との錯体を生成した後，電場増幅試料導入法（Field-amplified sample injection，FASI）によりキャピラリーに導入し，金属性分を陰イオンとして検出する方法を開発した．まず，試料導入前に少量の水プラグをキャピラリー内に導入した．次いで，試料中の成分を電極の極性を変えて電気的に導入し，陰陽イオンを濃縮するとともに，EOFにより，大部分の水プラグがキャピラリー内から追い出された後，電圧を印加し，泳動を開始した．本法により，海水中の Pb（II）（1.27 ng/l）と Se（II）（1.65 ng/l）を定量した．Okamotoら 96）は，海水試料中の Na＋をリーディングイオン，Mg2＋

及び Ca2＋をターミナルイオンとし，tITPにより Li＋及びSr2＋を間接吸光法により定量した．本法は，試料中塩分の影響を受けるため，標準添加法を用いる必要があるが，BGEさえ調製すれば，海水中のこれら成分を正確に定量できる簡易な分析法である．

4.2　主要陽イオン海水中主要陽イオンは，UV吸収を持たないが高濃度であるため，主要陰イオンの場合と同様，試料を希釈し，相互分離について検討すれば，間接吸光法あるいは電気伝導度検出法により定量できると考える．Bodenら 97）は，海水試料を 100倍に希釈し，18-crown-6との錯形成を利用して K＋の移動度を低下させることにより，海水中の Na＋，K＋，Mg2＋，Ca2＋が分離可能であることを示した．著者ら 98）

は，海水試料を 100倍に希釈し，BGEに添加したエチレンジアミン四酢酸（ethylenediamine tetraacetic acid，EDTA）との錯形成を利用し，Mg2＋及び Ca2＋を直接吸光法により定量し，検量線法による結果と標準添加法による結果とはよく一致することを示した．Salimi-Moosavi と Cassidy 99）

は，メタノールで調製した BGEを用いることにより，

Fig. 2　 Electropherograms of MOOS-1 and seabed seawater from Nishinomiya Harbor with transient ITP. （A） Sample, MOOS-1; （B） Sample, seabed seawater from Nishinomiya Harbor; sample injection period, 3 s （45 nl）. Electrophoretic conditions: capillary, Ltot.＝97 cm, Ldet. ＝75 cm, 75 µm ID×375 µm OD; BGE, 5 mmol/l PDC containing 0.01％ HPMC adjusted to pH 3.5 with 1 mol/l sodium hydroxide; voltage, 30 kV with the sample inlet side as the cathode; wavelength for detection, 200 nm; terminating electrolyte, 500 mmol/l MES adjusted to pH 4.0 with 1 mol/l sodium hydroxide; vacuum injection period, 30 s （450 nl）. Identification of peaks: a, Cl－ and SO4

2－; b, PO43－

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 27

Table 2　 CZE procedures for cationic analyses

Cations Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

Pb （II）, Se （IV）

Seawater Filtration, off-column complexation with triethylene-tetraminehexa-acetic acid （TTHA）

40 mmol/l sodium dihydrogen phosphate-sodium tetraborate buffer （pH 7.5）, 2.5 mmol/l triethylene-tetramine-hexaacetic acid （TTHA）, and 2 mmol/l sodium dodecyl sulfate （SDS）; direct UV （200 nm）

Samples were loaded under field-amplif ied sample stacking （FASI）; LOD, 0.113 ng/ml （Pb （II）） and 0.337 ng/ml （Se （IV））; RSD, 2.67％ （Pb （II）） and 4.65％ （Se （IV））

［95］ Liu and Lee （1998）

Li＋, Sr2＋

Seawater Filtration 10 mmol/l 4-methylbenzylamine and 1.5 mmol/l citric acid adjusted to pH 4.8 with 2-ethyl-n-butyric acid; indirect （214 nm）

LOD, 0.12 mg/l （Li＋） and 1.3 mg/l （Sr2＋）; RSD of peak area, 4-8％ ; standard addition method; the CZE results agreed well with those of inductively coupled plasma atomic emission spectrometry （ICP-AES） and electrothermal atomic absorption spectrometry （ET-AAS）

［96］ Okamoto et al. （2003）

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Seawater Dilution （1:10） 4 mmol/l 4-methyl-amino-phenol-sulfate and 20 mmol/l 18-crown-6; indirect UV （220 nm）

The separation between Na＋ and Ca2＋ was not enough

［97］ Boden et al. （1994）

Mg2＋, Ca2＋

Seawater Filtration, dilution （1:10）

20 mmol/l sodium tetraborate and 2 mmol/l EDTA; direct UV （200 nm）

LOD, 0.13 mg/l （Mg2＋） and 0.26 mg/l （Ca2＋）; RSD of peak area, 0.8％ （Mg2＋） and 1.2％ （Ca2＋）; the results obtained by the calibration method agreed well with those of the standard addition method

［98］ Fukushi and Hiiro （1996）

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Brine solution

Dilution （1:1000）

20 mmol/l imidazole and 30 mmol/l acetic acid in methanol; indirect UV （214 nm）

［99］ Salimi-Moosavi and Cassidy （1996）

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋, Sr2＋, Ba2＋

Seawater （mixtures

with formation water）, certified reference material BCR CRM 399 Major elements in fresh water （high

contents）

Filtration, dilution （1:100-1000）

5 mmol/l 4-methylbenzylamine, 6.5 mmol/l α-hydroxyisobutyric acid （HIBA）, 6.2 mmol/l 18-crown-6, and 25％ （v/v） methanol, pH 4.8; indirect UV （185 nm）

LOD, 0.14 mg/l （Na＋）, 0.15 mg/l （K＋）, 0.08 mg/l （Mg2＋）, 0.08 mg/l （Ca2＋）, 0.18 mg/l （Sr2＋）, and 0.15 mg/l （Ba2＋）;

Ba2＋ and Sr2＋ in most real samples were below the LOD of the method; the results were in agreement with those of ICP-AES; accuracy was also tested by analyzing a certified reference material; RSD of the analytical results for BCR CRM 399, 0.27-2.6%

［100］ Tangenet al. （1997）

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Seawater Filtration, dilution （1:100）

Positively charged （quaternary amine-coated） capillaries were used; 10 mmol/l imidazole, 6 mmol/l HIBA and 5 mmol/l 18-crown-6, pH 3.91; indirect UV （220 nm）

［101］ Schnierle and Hauser （1997）

NH4＋,

Li＋, Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Ionic-matrix simulated samples

10 mmol/l imidazole and 500 mmol/l 15-crown-5 or 0.75 mmol/l oxalic acid or 200μmol/l PDC, pH 4.5; indirect UV （214 nm）

Ratio of analytes to matrix: 1:500 （Na＋ matrix） and 1:2000 （Mg2＋ or Ca2＋ matrix）

［102］ Cahours et al. （1998）

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）28

Mg2＋，Ca2＋及び 100倍高濃度 Na＋，K＋を含むかん水中のこれら 4成分の完全分離を達成した．Tangenら 100）は，油井から発生する海水と地層水の混合溶液中の Na＋，K＋，Mg2＋，Ca2＋を定量するために，間接吸光法を開発した．その際，過剰の Na＋，Ca2＋の影響を防ぐために，BGE中にメタノール，18-crown-6，α-ヒドロキシイソ酪酸（α-hydroxyisobutyric acid，HIBA）を添加した．本法による

実試料定量結果は，高周波誘導結合プラズマ発光分光分析法（Inductively coupled plasma atomic emission spectrome-try （ICP-AES））の結果と良く一致した．Schnierle とHauser 101）は，第 4級アミンでコーティングしたキャピラリーを使用することにより電気泳動とは逆向きの弱いEOFを発生させ，海水中の Na＋，K＋，Mg2＋，Ca2＋を完全 分 離 し た．Cahours ら 102） は， 錯 形 成 剤 と し て15-crown-5，シュウ酸，PDCを BGEに添加して分離目的成分の移動度を変化させ，500倍高濃度の Na＋，2000倍高濃度のMg2＋あるいは Ca2＋マトリクス中のアルカリ，アルカリ土類金属イオンの分離を達成した．Motellierら 103）は，BGEにシュウ酸を添加し，Mg2＋と Ca2＋の移動度を低下させることにより 5000倍高濃度の Na＋を含む地下水中のこれら 3成分を定量した．著者ら 104）は，採取したミズクラゲ（Aurelia aurita），大型クラゲ（Stomolophus nomurai）をそれぞれ 7ヶ月，4年，密閉状態で室温保存後の上澄み液中の NH4

＋，Na＋，K＋，Mg2＋，Ca2＋を間接吸光法により定量し，NH4

＋以外の成分濃度は，海水中のそれら成分濃度とほぼ同様の値であることを示した．海水及びクラゲ上澄み液を分析した際のエレクトロフェログラムを Fig. 3に示す．さらに，同様の試料を電気伝導度検出法により定量したところ，間接吸光法より高感度であることが判明した 105）．

5．結　　言

主として CZEによる海水中微量陰イオン，主要陰イオン，微量陽イオン，主要陽イオン定量法を紹介した．実際に利用するにあたり必要な詳しい分析条件等については，各文献を参照されたい．今後，高感度化及び高精度化に関する研究が進み，CZEが様々な海水分析の場で利用されることを期待してやまない．

Cations Sample Sample pretreatment

CZE conditions Comments References

Na＋, Mg2＋, Ca2＋

Saline underground water

The samples were acidified on site to ca. pH 3.0, dilution （1:5, 10）

10 mmol/l creatinine, 2 mmol/l oxalic acid, and 1.5 mmol/l 18-crown-6, pH 4.60; indirect UV （214 nm）

The CZE results compared well with IC determinations; K＋ could not be determined because of a too high concentration of Na＋

［103］ Motellier et al. （2000）

NH4＋,

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Jellyfish （Aurelia Aurita and Stomolophus nomurai）

Filtration, dilution （1:100）

10 mmol/l N-methylbenzylamine, 0.5 mmol/l citric acid, and 16 mmol/l 18-crown-6, adjusted to pH 4.8 with 2-ethyl-n-butyric acid; indirect UV （214 nm）

LOD, 0.13-0.34 mg/l; RSD of peak area, 3.2-4.9％

［104］ Fukushiet al. （2006）

NH4＋,

Na＋, K＋, Mg2＋, Ca2＋

Jellyfish （Aurelia aurita and Stomolophus nomurai）

Filtration, dilution （1:500）

25 mmol/l MES, 25 mmol/l L-histidine （HIS）, and 2 mmol/l 18-crown-6; conductivity

LOD, 0.028-0.22 mg/l; RSD of peak area, 2.3-4.8％

［105］ Kan and Fukushi （2011）

Table 2　（continued）

Fig. 3　 Electropherograms of sur face seawater and the supernatant solutions of Aurelia aurita and Stomolophus nomurai. （A） Surface seawater from a small harbor at our university; （B） Aurelia aurita; （C） Stomolophus no-murai. Samples, diluted 100-fold: sample injection period, 1 s （21 nl）. Electrophoretic conditions: capillary, Ltot.＝72 cm, Ldet.＝50 cm, 75 µm ID×375 µm OD; BGE, 10 mmol/l N-methylbenzylamine containing 16 mmol/l 18-crown-6 and 0.5 mmol/l citric acid adjusted to pH 4.8 with 2-ethyl-n-butyric acid; voltage, 20 kV as the sample inlet side as the anode; wavelength for detection, 214 nm. Identification of peaks: a, NH4

＋; b, Na＋; c, K＋; d, Ca2＋; e, Mg2＋

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 29

References 1） H. Takiyama, “Development and Ef fective Utilization

Technology of Resources Dissolved in Seawater”, Bull. Soc. Sea Water Sci., Jpn., 63 （1）, pp. 2-7 （2009）

2） J. Ishibashi, Chem. Chem-Ind., 65 （10）, pp. 758-760 （2012） 3） Y. Hosomomi, Y. Baba, F. Kubota and M. Goto, “Deep-sea

Manganese Nodules as a Novel Resource of Metals”, Bull. Soc. Sea Water Sci., Jpn., 66 （6）, pp. 308-313 （2012）

4） Annual Report on the Environment in Japan 2012, Ministry of the Environment, http://www.env.go.jp/policy/hakusyo/h24/pdf/2_4.pdf

5） Y. Chen, R. Liu, C. Sun, P. Zhang, C. Feng and Z. Shen, “Spatial and Temporal Variat ions in Nitrogen and Phosphorous Nutrients in the Yangtze River Estuary”, Mar. Pollut. Bull., 64 （10）, pp. 2083-2089 （2012）

6） R. W. Fulweiler, N. N. Rabalais and A. S. Heiskanen, “The Eutrophication Commandments”, Mar. Pollut. Bull., 64 （10）, pp. 1997-1999 （2012）

7） L. A. Deegan, D. S. Johnson, R. S, Warren, B. J. Peterson, J. W. Fleeger, S. Fagherazzi and W. M. Wollheim, “Coastal Eutrophication as a Driver of Salt Marsh Loss”, Nature, 490, pp. 388-392 （2012）

8） L. S. Land, “Chesapeake Bay Nutrient Pollution: Contribution from the Land Application of Sewage Sludge in Virginia”, Mar. Pollut. Bull., 64 （11）, pp. 2305-2308 （2012）

9） D. –i. Lim, H. S. Jung, K. T. Kim, H. H., Shin and S. W. Jung, “Sedimentar y Records of Metal Contamination and Eutrophication in Jinhae-Masan Bay, Korea”, Mar. Pollut. Bull., 64 （11）, pp. 2542-2548 （2012）

10） M. A. Burford, A. T. Revill, J. Smith and L. Clementson, “Effect of Sewage Nutrients on Algal Production, Biomass

and Pigments in Tropical Tidal Creeks”, Mar. Pollut. Bull., 64 （12）, pp. 2671-2680 （2012）

11） Y. Wang, D. Liu, Z. Dong, B. Di and X. Shen, “Temporal and Spatial Distributions of Nutrients under the Influence of Human Activities in Sishili Bay, Northern Yellow Sea of China”, Mar. Pollut. Bull., 64 （12）, pp. 2708-2719 （2012）

12） S. Aydin-Onen, F. Kocak and F. Kucuksezgin, “Evaluation of Spatial and Temporal Variations of Inorganic Nutrient Species in the Eastern Aegean Sea Waters”, Mar. Pollut. Bull., 64 （12）, pp. 2849-2856 （2012）

13） P. Calza, D. Vione, A. Novelli, E. Pelizzetti and C. Minero, “The Role of Nitrite and Nitrate Ions as Photosensitizers in the Phototransformation of Phenolic Compounds in Seawater”, Sci. Total. Environ., 439, pp. 67-75 （2012）

14） T. Sumida, T. Nakazato and H. Tao, “Multi-elemental Determination of Trace Elements in Deep Seawater by Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry with Resin Preconcentration”, Bunseki Kagaku, 52 （8）, pp. 619-626 （2003）

15） S. Hirata, T. Kajiya, M. Aihara, K. Honda and O. Shikino, “Development of Determination Methods for Trace Elements in Seawater by On-line Column Preconcentration/ICP-MS”, Bunseki Kagaku, 52 （12）, pp. 1091-1104 （2003）

16） Y. Zhu, A. Itoh, E. Fujimori, T. Umemura and H. Haraguchi, “Multielement Determination of Trace Metals in Seawater

by Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry after Tandem Preconcentration Using a Chelating Resin”, Bull. Chem. Soc. Jpn., 78 （4）, pp. 659-667 （2005）

17） Y. Furusho, M. Ono, M. Yamada, K. Ohashi, T. Kitade, K.

Kuriyama, S. Ohta, Y. Inoue and S. Motomizu, “Advanced Solid Phase Extraction for Inorganic Analysis and Its Applications”, Bunseki Kagaku, 57 （12）, pp. 969-989 （2008）

18） W. Hu, P. R. Haddad, K. Hasebe, K. Tanaka, P. Tong and C. Khoo, “Direct Determination of Bromide, Nitrate, and Iodide in Saline Matrixes Using Electrostatic Ion Chromatography with an Electrolyte as Eluent”, Anal. Chem., 71 （8）, pp. 1617-1620 （1999）

19） L. Rong and T. Takeuchi, “Determination of Iodide in Seawater and Edible Sa l t by Microcolumn Liquid Chromatography with Poly（ethylene glycol） Stationary Phase”, J. Chromatogr. A, 1042 （1-2）, pp. 131-135 （2004）

20） L. Rong, L. W. Lim and T. Takeuchi, “Determination of Iodide in Seawater Samples by Ion Chromatography with Chemically-bonded Poly（ethylene glycol） Stationary Phase”, J. Chromatogr. A, 1128 （1-2）, pp. 68-72 （2006）

21） A. Suzuki, L. W. Lim, T. Hiroi and T. Takeuchi, “Rapid Determination of Bromide in Seawater Samples by Capillary Ion Chromatography Using Monolithic Silica Columns Modified with Cetyltrimethylammonium Ion”, Talanta, 70 （1）, pp. 190-193 （2006）

22） K. Ito, R. Nomura, T. Fujii, M. Tanaka, T. Tsumura, H. Shibata and T. Hirokawa, “Determination of Nitrite, Nitrate, Bromide, and Iodide in Seawater by Ion Chromatography with UV Detection Using Dilauryldimethylammonium-coated Monolithic ODS Columns and Sodium Chloride as an Eluent”, Anal. Bioanal. Chem., 404 （8）, pp. 2513-2517 （2012）

23） H. Ohguni, M. Tanaka, A. Kanesada, S. Fujimoto, T. Hirokawa and K. Ito, “Simultaneous and Selective Determination of Nitrite, Nitrate, and Ammonium Ions in Seawater Samples by Ion Chromatography”, Bunseki Kagaku, 61 （8）, pp. 685-690 （2012）

24） R. Wang, N. Wang, M. Ye and Y. Zhu, “Determination of Low-level Anions in Seawater by Ion Chromatography with Cycling-column-switching”, J. Chromatogr. A, 1265, pp. 186-190 （2012）

25） K. Fukushi, S. Takeda, K. Chayama and S. Wakida, “Application of Capillary Electrophoresis to the Analysis of Inorganic Ions in Environmental Samples”, J. Chromatogr. A, 834 （1-2）, pp. 349-362 （1999）

26） S. M. Valsecchi and S. Polesello, “Analysis of Inorganic Spec ies in Env i r onmenta l Samples by Cap i l l a r y Electrophoresis”, J. Chromatogr. A, 834 （1-2）, pp. 363-385 （1999）

27） A. R. Timerbaev and K. Fukushi, “Analysis of Seawater and Different Highly Saline Natural Waters by Capillary Zone Electrophoresis”, Mar. Chem., 82, （3-4）, pp. 221-238 （2003）

28） K. Fukushi, K. Yokota, Y. Nakayama, N, Ishio and T. Miyado, “Determination of Trace Inorganic Anions in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis with Artificial Seawater as Background Electrolyte”, Bunseki Kagaku, 54 （8）, pp. 665-677 （2005） （Japanese）

29） A. R. Timerbaev and T. Hirokawa, “Recent Advances of Transient Isotachophoresis-Capillary Electrophoresis in the Analysis of Small Ions from High-conductivity Matrices”, Electrophoresis, 27 （1）, pp. 323-340 （2006）

30） P. Gebauer, Z. Malá and P. Bocek, “Recent Progress in Analytical Capillary ITP”, Electrophoresis, 30 （1）, pp. 29-35 （2009）

31） A. R. Timerbaev, “Inorganic Species Analysis by CE－An Overview for 2007－2008”, Electrophoresis, 31 （1）, pp. 192-

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）30

204 （2010） 32） P. Kubán and A. R. Timerbaev, “CE of Inorganic Species－A

Review of Methodological Advancements Over 2009－2010”, Electrophoresis, 33 （1）, pp. 196-210 （2011）

33） A. R. Timerbaev, “Element Speciation Analysis Using Capillary Electrophoresis: Twenty Years of Development and Applications”, Chem. Rev., 113 （1）, pp. 778-812 （2013）

34） M. C. Breadmore and P. R. Haddad, “Approaches to Enhancing the Sensitivity of Capillar y Electrophoresis Methods for the Determination of Inorganic and Small Organic Anions”, Electrophoresis, 22 （12）, pp. 2464-2489 （2001）

35） T. Hirokawa, H. Okamoto, Z. Xu and N. Ikuta, “High-sensitive Analysis by Capillar y Electrophoresis and Microchip Electrophoresis Using On-line Preconcentration Methods”, Bunseki Kagaku, 52 （12）, pp. 1069-1079 （2003）

36） K. Fukushi and S. Takeda, “On-line Sample Concentration in Capillary Electrophoresis”, Bunseki, （2）, pp. 52-58 （2006）

37） Z. Malá, L. Kr ivánková, P. Gebauer and P. Boc ek, “Contemporary Sample Stacking in CE: A Sophisticated Tool Based on Simple Principles”, Electrophoresis, 28 （1-2）, pp. 243-253 （2007）

38） M. C. Breadmore, “Recent Advances in Enhancing the Sensitivity of Electrophoresis and Electrochromatography in Capillaries and Microchips”, Electrophoresis, 28 （1-2）, pp. 254-281 （2007）

39） P. Puig, F. Borrull, M. Calull and C. Aguilar, “Sorbent Preconcentration Procedures Coupled to Capillar y Electrophoresis for Environmental and Biological Applications”, Anal. Chim. Acta, 616 （1）, pp. 1-18 （2008）

40） S. L. Simpson Jr., J. P. Quirino and S. Terabe, “On-line Sample Preconcentration in Capillary Electrophoresis Fundamentals and Applications, J. Chromatogr. A, 1184 （1-2）, pp. 504-541 （2008）

41） M. C. Breadmore, “Unlimited-volume Stacking of Ions in Capillary Electrophoresis. Part 1: Stationary Isotachophoret-ic Stacking of Anions”, Electrophoresis, 29 （5）, pp. 1082-1091 （2008）

42） Z . Malá , A . Š lampová , P. Gebauer and P. Bo c ek , “Contemporary Sample Stacking in CE”, Electrophoresis, 30 （1）, pp. 215-229 （2009）

43） M. C. Breadmore, J. R. E. Thabano, M. Dawod, A. A. Kazarian, J. P. Quirino and R. M. Guijt, “Recent Advances in Enhancing the Sensit iv i ty of Electrophoresis and Electrochromatography in Capillaries and Microchips （2006－ 2008）”, Electrophoresis, 30 （1）, pp. 230-248 （2009）

44） Y. Wen, J. Li, J. Ma and L. Chen, “Recent Advances in Enrichment Techniques for Trace Analysis in Capillary Electrophoresis”, Electrophoresis, 33 （19-20）, pp. 2933-2952 （2012）

45） T. Hirokawa, H. Okamoto and B. Gaš, “High-sensitive Capillary Zone Electrophoresis Analysis by Electrokinetic Injection with Transient Isotachophoretic Preconcentration: Electrokinetic Supercharging”, Electrophoresis, 24 （3）, pp. 498-504 （2003）

46） T. Hirokawa, E. Koshimidzu and Z. Xu, “Electrokinetic Sample Injection for High-sensitivity Capillar y Zone Electrophoresis （Part 1）: Effects of Electrode Configuration and Setting”, Electrophoresis, 29 （18）, pp. 3786-3793 （2008）

47） Z. Xu, E. Koshimidzu and T. Hirokawa, “Electrokinetic Sample Injection for High-sensitivity CZE （Par t 2）:

Improving the Quantitative Repeatability and Application of Electrokinetic Supercharging-CZE to the Detection of Atmospheric Electrolytes”, Electrophoresis, 30 （20）, pp. 3534-3539 （2009）

48） Z. Xu, A. R. Timerbaev and T. Hirokawa, “High-sensitivity Cap i l l a r y and Micr och ip E lec t r ophor es i s Us ing Electrokinetic Supercharging Preconcentration Insight into the Stacking Mechanism via Computer Modeling”, J. Chro-matogr. A, 1216 （4）, pp. 660-670 （2009）

49） Z. Xu, K. Nakamura, A. R. Timerbaev and T. Hirokawa, “Another Approach Toward over 100000-Fold Sensitivity Increase in Capillar y Electrophoresis: Electrokinetic Supercharging with Optimized Sample Injection”, Anal. Chem., 83 （1）, pp. 398-401 （2011）

50） Z. Xu, K. Kawahito, X. Ye, A. R. Timerbaev and T. Hirokawa, “Electrokinetic Supercharging with a System-induced

Terminator and an Optimized Capillary versus Electrode Configuration for Parts-per-trillion Detection of Rare-earth Elements in CZE, “Electrophoresis, 32 （10）, pp. 1195-1200 （2011）

51） M. C. Breadmore, “Capillary and Microchip Electrophoresis: Challenging the Common Conceptions”, J. Chromatogr. A, 1221, pp. 42-55 （2012）

52） K. Fukushi and Y. Yakushiji, “Environmental Friendly Analytical Method for Evaluating Ef fects of Antifouling Agents for Ship Hulls on Marine Environment”, Journal of the JIME, 45 （3）, pp. 64-69 （2010）

53） P. Doble and P. R. Haddad, “Indirect Photometric Detection of Anions in Capillary Electrophoresis”, J. Chromatogr. A, 834 （1-2）, pp. 189-212 （1999）

54） C. Johns, M. Macka and P. R. Haddad, “Enhancement of Detection Sensitivity for Indirect Photometric Detection of Anions and Cations in Capillary Electrophoresis, Electropho-resis, 24 （12-13）, pp. 2150-2167 （2003）

55） M. Ryvolová, J. Preisler, D. Brabazon and M. Macka, “Por tab le Cap i l l a r y -based （Non-ch ip） Cap i l l a r y Electrophoresis”, Trends Anal. Chem., 29 （4）, pp. 339-353 （2010）

56） A. R. Timerbaev, K. Fukushi, T. Miyado, N. Ishio, K. Saito and S. Motomizu, “Analysis of Highly Saline Samples by Capillar y Zone Electrophoresis: Enhanced Direct UV Detection of Inorganic Anions Using On-capi l lar y Preconcentration and Clean-up Techniques”, J. Chromatogr. A, 888 （1-2）, pp. 309-319 （2000）

57） Y. Sorin and K. Isshiki （Eds.）, “Umi to Mizuumi no Kagaku”, pp. 13-165, Kyoto Daigaku Gakujyutsu Shuppankai （2005） （Japanese）

58） P. E. Jackson and P. R. Haddad, “Optimization of Injection Te c h n i q u e i n C a p i l l a r y E l e c t r o p h o r e s i s f o r t h e Determination of Trace Level Anions in Environmental Samples”, J. Chromatogr. A, 640 （1-2）, pp. 481-487 （1993）

59） T. Sakai, T. Takahashi and M. Suzuki, “Two kind of Application Data Using Capillary Ion Analysis （CIA）”, Kan-kyo Kagaku, 3 （2）, pp. 494-495 （1993）

60） L. Song, Q. Ou, W. Yu, L. Fang and Y. Jin, “Determination of the Petroleum Tracers Nitrate and Thiocyanate in Subterranean Waters by Capillary Ion Electrophoresis”, J. Chromatogr. A, 715 （2）, pp. 376-384 （1995）

61） K. Fukushi, K. Watanabe, S. Takeda, S. Wakida, M. Yamane, K. Higashi and K. Hiiro, “Determination of Bromide Ions in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis Using Diluted

福士・服部・日高：キャピラリーゾーン電気泳動法による海水中無機イオンの定量 31

Artificial Seawater as the Buffer Solution”, J. Chromatogr. A, 802 （1）, pp. 211-217 （1998）

62） J a p a n e s e S t a n d a r d s A s s o c i a t i o n , “L u b r i c a n t s－Determination of Rust-Preventing Characteristics”, JIS K 2510: pp. 8-9, Tokyo （1998） （Japanese）

63） N. Kocatürk, N. Öztekin and F. B. Er im, “Direct Determination of Bromide Ions in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis Using Polyethyleneimine-coated Capillaries”, Anal. Bioanal. Chem., 377 （7-8）, pp. 1207-1211 （2003）

64） W. Ding, M. J. Thor nton and J. S. Fritz, “Capillar y Electrophoresis of Anions at High Salt Concentrations”, Elec-trophoresis, 19 （12）, pp. 2133-2139 （1998）

65） M. I. T. Carou, P. L. Mahía, S. M. Lorenzo, E. F. Fernández and D. P. Rodríguez, “Direct Analysis of Inorganic Anions in Samples with High Salt Content by Capillar y Zone Electrophoresis”, J. Chromatogr. Sci., 39 （9）, pp. 397-401 （2001）

66） A. R. Timerbaev, T. Takayanagi and S. Motomizu, “Separation of Inorganic Anions for Analysis of Sea-water by Capillary Zone Electrophoresis”, Anal. Commun., 36 （4）, pp. 139-141 （1999）

67） K. Fukushi, K. Tada, S. Takeda, S. Wakida, M. Yamane, K. Higashi and K. Hiiro, “Simultaneous Determination of Nitrate and Nitrite Ions in Seawater by Capillar y Zone Electrophoresis Using Artificial Seawater as the Carrier Solution”, J. Chromatogr. A, 838 （1-2）, pp. 303-311 （1999）

68） K. Fukushi, N. Ishio, H. Urayama, S. Takeda, S. Wakida and K. Hiiro, “Simultaneous Determination of Bromide, Nitrite and Ni t ra te Ions in Seawater by Cap i l l a r y Zone Electrophoresis Using Artificial Seawater as the Carrier Solution”, Electrophoresis, 21 （2）, pp. 388-395 （2000）

69） K. Fukushi and N. Ishio, “Simultaneous Determination of Bromide, Nitrite and Nitrate Ions in Environmental Waters: Capillary Zone Electrophoresis Using Artificial Seawater as the Background Electrolyte”, CE Advance, 4 （2）, pp. 61-70 （2000）

70） K. Fukushi, N. Ishio, M. Sumida, S. Takeda, S. Wakida and K. Hiiro, “Improvement of Capillary Zone Electrophoresis Sensitivity with Ar tificial Seawater as the Background Electrolyte Utilizing Transient Isotachophoresis for the Determination of Nitrite and Nitrate Ions in Seawater”, Elec-trophoresis, 21 （14）, pp. 2866-2871 （2000）

71） K. Fukushi, N. Ishio, T. Miyado, K. Saito, S. Takeda, S. Wakida and K. Hiiro, “Capillary Zone Electrophoresis with On-column Transient Isotachophoresis for the Determination of Nitrite and Nitrate Ions in Environmental Waters”, In: R. Clemet and B. Burk （Eds.）, Proc. of EnvironAnalysis 2000, p. 125, Ottawa, Canada （2000）

72） N. Ishio, K. Fukushi, K. Michiba, S. Takeda and S. Wakida, “Optimum Conditions for Effective Use of the Terminating Ion in Transient Isotachophoresis for Capillar y Zone Electrophoretic Determination of Nitrite and Nitrate in Seawater, with Ar t i f ic ia l Seawater as Background Electrolyte”, Anal. Bioanl. Chem., 374 （6）, pp. 1165-1169 （2002）

73） K. Fukushi, T. Miyado, N. Ishio, H. Nishio, K. Saito, S. Takeda and S. Wakida, “Determination of Nitrite and Nitrate in a Proposed Certified Reference Material for Nutrients in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis with Artificial Seawater as the Background Electrolyte Using Transient

Isotachophoresis”, Electrophoresis, 23 （12）, pp. 1928-1934 （2002）

74） K. Fukushi, Y. Nakayama and J. Tsujimoto, “Highly Sensitive Capillary Zone Electrophoresis with Artificial Seawater as the Background Electrolyte and Transient Isotachophoresis as the On-line Concentration Procedure for Simultaneous Determination of Nitrite and Nitrate in Seawater”, J. Chro-matogr. A, 1005 （1-2）, pp. 197-205 （2003）

75） Japanese Standards Association, “Testing Methods for Industrial Waste Water”, JIS K 0102: pp. 153-154, Tokyo （1998） （Japanese）

76） Japanese Standards Association, “Testing Methods for Industrial Waste Water”, JIS K 0102: pp. 158-160, Tokyo （1998） （Japanese）

77） K. Yokota, K. Fukushi, N. Ishio, N. Sasayama, Y. Nakayama, S. Takeda and S. Wakida, “Capillary Zone Electrophoretic Determination of Iodide in Seawater Using Transient Isotachophoresis with Artificial Seawater as the Background Electrolyte”, Electrophoresis, 24 （12-13）, pp.2244-2251 （2003）

78） K. Yokota, K. Fukushi , S . Takeda and S. Wakida, “Simultaneous Determination of Iodide and Iodate in

Seawater by Transient Isotachophoresis－Capillary Zone Electrophoresis with Artificial Seawater as the Background Electrolyte”, J. Chromatogr. A, 1035 （1）, pp.145-150 （2004）

79） K. Yokota and K. Fukushi, “Simultaneous Determination of Iodide and Iodate in Seawater by Capi l lar y Zone Electrophoresis”, Bull. Soc. Sea Water Sci. Jpn., 58 （1）, pp.75-79 （2004） （Japanese）

80） T. Hirokawa, T. Ichihara, K. Ito and A. R. Timerbaev, “Trace Ion Analysis of Seawater by Capillar y Electrophoresis: Determination of Iodide Using Transient Isotachophoretic Preconcentration”, Electrophoresis, 24 （14）, pp. 2328-2334 （2003）

81） K. Ito, T. Ichihara, H. Zhuo, K. Kumamoto, A. R. Timerbaev and T. Hirokawa, “Determination of Trace Iodide in Seawater by Capi l lar y Electrophoresis Fol lowing T ransient Isotachophoretc Preconcentration Comparison with Ion Chromatography”, Anal. Chim. Acta., 497 （1-2）, pp. 67-74 （2003）

82） Z. Huang, K. Ito, A. R. T imerbaev and T. Hirokawa, “Speciation Studies by Capillar y Electrophoresis－

Simultaneous Determination of Iodide and Iodate in Seawater”, Anal. Bioanal. Chem., 378 （7）, pp. 1836-1841 （2004）

83） Z. Huang, K. Ito and T. Hirokawa, “Further Research on Iodine Specia t ion in Seawater by Capi l lar y Zone Electrophoresis with Isotachophoresis Preconcentration”, J. Chromatogr. A, 1055 （1-2）, pp. 229-234 （2004）

84） Z. Huang, K. Ito, I. Morita, K. Yokota, K. Fukushi, A.R. Timerbaev, S. Watanabe and T. Hirokawa, “Sensitive Monitoring of Iodine Species in Sea Water Using Capillary Electrophoresis: Vertical Profiles of Dissolved Iodine in the Pacific Ocean”, J. Environ. Monit., 7 （8）, pp. 804-808 （2005）

85） M. A. Woodland and C. A. Lucy, “Altering the Selectivity of Inorganic Anion Separations Using Electrostatic Capillary Electrophoresis”, Analyst, 126 （1）, pp. 28-32 （2001）

86） P. Pantucková and L. Krivánková, “Fast and Simple Method for Determination of Iodide in Human Urine, Serum, Sea Water, and Cooking Salt by Capillary Zone Electrophoresis”, Electrophoresis, 25 （7-8）, pp. 1102-1111 （2004）

87） P. Pantucková, M. Urbánek and L. Krivánková, “Determina-

日本海水学会誌　第 67巻　第 1 号（2013）32

tion of Iodide in Samples with Complex Matrices by Hyphenation of Capillar y Isotachophoresis and Zone Electrophoresis”, Electrophoresis, 28 （20）, pp. 3777-3785 （2007）

88） M. Mori, W. Hu, P. R. Haddad, J. S. Fritz, K. Tanaka, H. Tsue and S. Tanaka, “Capillary Electrophoresis Using High Ionic Strength Background Electrolytes Containing Zwitterionic and Non-ionic Substances and Its Application to Direct Determination of Bromide and Nitrate in Seawater”, Anal. Bioanl. Chem., 372 （1）, pp. 181-186 （2002）

89） C. Tu and H. K. Lee, “Determination of Nitrate in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis with Chloride-induced Sample Self-stacking”, J. Chromatogr. A, 966 （1-2）, pp. 205-212 （2002）

90） J. P. Hutchinson, P. Zakaria, A. R. Bowie, M. Macka, N. Avdalovic and P. R. Haddad, “Latex-Coated Polymeric Monolithic Ion-Exchance Stationar y Phases. 1. Anion-Exchange Capillary Electrochromatography and In-Line Sample Preconcentration in Capillary Electrophoresis”, Anal. Chem., 77 （2）, pp. 407-416 （2005）

91） T. Okamoto, K. Fukushi, K. Yokota, S. Takeda and S. Wakida, “Determination of Phosphate in Seawater by Transient

Isotachophoresis / Capillary Zone Electrophoresis with Suppressed Electroosmotic Flow”, Bunseki Kagaku, 55 （9）, pp. 627-634 （2006） （Japanese）

92） T. Okamoto, K. Fukushi, S. Takeda and S. Wakida, “Determination of Phosphate in Seawater by CZE with On-line Transient ITP”, Electrophoresis, 28 （19）, pp. 3447-3452 （2007）

93） Japanese Standards Association, “Testing Methods for Industrial Waste Water”, JIS K 0102: pp. 175-177, Tokyo （1998） （Japanese）

94） K. Fukushi, R. Yamazaki and T. Yamane, “Determination of Bromate in Highly Saline Samples Using CZE with On-line Transient ITP”, J. Sep. Sci., 32 （3）, pp. 457-461 （2009）

95） W. Liu and H. K. Lee, “Use of Triethylenetetraminehexaace-tic Acid Combined with Field-Amplified Sample Injection in Speciation Analysis by Capillary Electrophoresis”, Anal. Chem., 70 （13）, pp. 2666-2675 （1998）

96） H. Okamoto, Y. Okamoto, T. Hirokawa and A. R. Timerbaev, “T r a c e I o n A n a l y s i s o f S e a Wa t e r b y C a p i l l a r y Electrophoresis: Determination of Strontium and Lithium

Pre-concentrated by Transient Isotachophoresis”, Analyst, 128 （12）, pp. 1439-1442 （2003）

97） J. Boden, T. Ehmann, T. Groh, I. Haumann and K. Bächmann, “Influencing of the Migration Time in CZE”, Anal. Bioanal. Chem., 348 （8-9）, pp. 572-575 （1994）

98） K. Fukushi and K. Hiiro, “Determination of Magnesium and Calcium Ions in Seawater by Capillary Zone Electrophoresis”, Anal. Bioanal. Chem., 356 （2）, pp. 150-154 （1996）

99） H. Salimi-Moosavi and R. M. Cassidy, “Control of Separation Selectivity and Electroosmotic Flow in Nonaqueous Capillary Electrophoretic Separations of Alkali and Alkaline Earth Metal Ions”, J. Chromatogr. A, 749 （1-2）, pp. 279-286 （1996）

100） A. Tangen, W. Lund and R. B. Frederiksen, “Determination of Na＋, K＋, Mg2＋ and Ca2＋ in Mixtures of Seawater and Formation Water by Capillary Electrophoresis”, J. Chro-matogr. A, 767 （1-2）, pp. 311-317 （1997）

101） P. Schnierle and P. C. Hauser, “Prevention of Peak Overlap in the Capillary Electrophoretic Separation of Inorganic Cations by Use of a Positively Charged Coated Capillary”, J. Chro-matogr. A, 779 （1-2）, pp. 347-351 （1997）

102） X. Cahours, P. Morin and M. Dreux, “Quantitative Determination of Inorganic Minor Cations in Sodium-, Calcium-, Magnesium-matrix Simulated Samples by Capillary Electrophoresis”, J. Chromatogr. A, 810 （1-2）, pp. 209-220 （1998）

103） S. Motellier, S. Petit and P. Decambox, “Quantitative Capillar y Electrophoretic Analysis for Calcium and Magnesium in Sodium－Matrix Waters”, Anal. Chim. Acta, 410 （1-2）, pp. 11-23 （2000）

104） K. Fukushi, S. Minami, M. Kitakata, M. Nishijima, K. Yokota, S. Takeda and S. Wakida, “Determination of Ammonium Cations and Alkali and Alkaline Earth Metal Cations in Jellyfish by Capillary Zone Electrophoresis”, Anal. Sci., 22 （8）, pp. 1129-1133 （2006）

105） Y. Kang and K. Fukushi, “Determination of Ammonium Cations and Alkali and Alkaline Earth Metal Cations in Jellyfish by Capillary Zone Electrophoresis”, Abstracts of 31st Symposium on Capillar y Electrophoresis, p. 152, Tsuruoka （2011）

（平成 24年 11月 30日受付Received November 30, 2012）