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Isolate: Chromobacterium violaceum
Agar: Mueller Hinton Agar
Incubation Conditions: 24 hours at 37C + 24 hours at Room Temperature
Created by: Michelle Vu, Research Associate, BS Microbiology.
fuente: https://www.facebook.com/asmfan?fref=photo
BIOSEGURIDAD
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Tormenta de ideas
Infección
microorganismo
salud microbiología
procedimiento
enfermedades
ambiente
laboratorio
bacterias
virus peligro cuidado
• Definición
• Conceptos de epidemiología:
Tríada de la enfermedad
Cadena epidemiológica Agente etiológico: definición, tipos, cepas;
patogenicidad y virulencia
(morbilidad, mortalidad, letalidad)
Fuente de infección
Puerta de salida
Vía de transmisión: modos (TD, TI)
Vector
Puerta de entrada
Profilaxis
Hospedero específico
Hospedero accidental
Especificidad de especie
Riesgo
• Clasificación de microorganismos según grupos de riesgo
• Contención: Primaria y secundaria
• Criterios para clasificar a los laboratorios en niveles de bioseguridad
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BIOSEGURIDAD
• Triada de la enfermedad, según epidemiología médica
SALUD ENFERMED
AD
HOSPEDADOR
AMBIENTE AGENTE ETIOLÓGICO
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• Triada de la enfermedad + factor tiempo: Tríada 3 D
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Tiempo
Ambiente
Agente
etiológico
Hospedador
Triada de la enfermedad + factor tiempo: Tríada 3 D Aplicada a Microbiología Agrícola
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Tiempo
Ambiente
Agente etiológico
Hospedador
¿por cuanto tiempo la planta se
expuso a las condiciones adversas
y al patógeno? C
Hay condiciones edáficas, climáticas,
de manejo, que favorecen el estado
de salud. En sentido opuesto hay
condiciones ambientales que debilitan
a la planta (estrés hídrico, estrés
térmico, exceso de agua) facilitando la
infección y desarrollo de
enfermedades
Cada taxón microbiano (bacterias, hongos)
está integrado por diversas cepas, algunas
mas virulentas que otras: El virus de la
enfermedad de Rio Cuarto
Para el mismo taxón de una
planta, se presentan natural
ó artificialmente (por
biotecnología) cepas mas ó
menos resistentes a
distintas enfermedades
contagiosas
• Cadena epidemiológica
Fuente de
infección
Puerta de
salida
Vía de
transmisión: Directa ó
Indirecta
Puerta de
entrada
Reservorio
Hospedador
susceptible
infectado
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Hospedador
susceptible
susceptible
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Cadena epidemiologica de interés agrícola:
El caso de pudrición del tomate por Fusaarium
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Cadena epidemiológica de interés agrícola:
El caso de micotoxinas en maíz por Fusarium graminearuim
Factores del hospedador
Estrés hídrico
Estrés por altas temperaturas
Competencia por limitados
nutrientes
Factores del agente infeccioso:
Cepa toxigenica y virulenta del
Fusarium
Factores ambientales de manejo:
Ausencia de rotación de cultivos
Concentración del agente en el suelo
Enfermedad Salud
(producción de
micotoxinas en la planta)
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Ambiente: otros animales, ejemplo aves migratorias
Clasificación de microorganismos en grupos de riesgo
(Para un laboratorio ubicado en la Patagonia Argentina)
Grupo de
riesgo
Riesgo
individual
Riesgo
poblacional
Ejemplo
I bajo bajo
II moderado bajo
III elevado moderado
IV elevado elevado
• Lactobacillus casei;
• Virus Junin;
• Virus Ébola;
• Virus del complejo mancha de asfalto del maíz: Phyllacora maydis, Monographella
maydis y Coniothyrium phyllacorae.
• Virus del mal de rio cuarto (afecta al maíz) • Botrytis cinerea
• Saccharomyces cerevisae
• Análisis de aguas contaminadas con materia fecal, mediante cultivo microbiano
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Criterios para la clasificación de laboratorios en niveles de bioseguridad:
-Epidemiología del agente motivo de estudio: transmisión, presencia de vectores, resistencia del agente a factores físicos y químicos
-Grupo de riesgo al que pertenece el agente en estudio
-Patogenicidad y virulencia
-Posibilidad de tratamiento eficaz
-Posibilidad de profilaxis
-Acción desarrollada en el laboratorio con el agente: identificar la presencia, multiplicarlo, generar aerosoles?
-Situación epidemiológica (agente endémico Vs exótico)
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
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Clasificación de laboratorios en niveles de
bioseguridad:
Nivel de laboratorio
Grupo de riesgo del microorganismo
Prototipo de laboratorio
Practicas generales
Contención
I I Enseñanza básica, investigación
TMA; BPL BPL, mechero
II II APS, diagnostico, investigación
BPL, ropa, señalización
CBS
III III Diagnóstico especial investigación
Todo lo anterior y acceso controlado, ropa especial, flujo direccional de aires
CBS
IV IV Unidades de patógenos especialmente peligrosos
Burbuja, ducha, manejo especial de residuos
CBS clase III ó trajes presurizados +CBS II, aire filtrado, autoclave doble puerta
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
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BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
1º: esterilizar el ansa calentándolo con la llama del mechero de Bunsen;
2º: tomar con el ansa esterilizada los microorganismos de interés
3° volver a esterilizar el ansa, para descontaminarla, antes de depositarla
sobre la mesada Pro
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a Laboratorios nivel I de bioseguridad:
La contención, en un
laboratorio de nivel I,
depende principalmente
del cumplimiento de las
buenas prácticas de
laboratorio (cumplir las
técnicas de manejo
seguro de elementos de
riesgo biológico).
Una técnica muy usada es
el flameado en la llama de
un mechero bunsen: se
realiza cuando se usa el
ansa o bien antes de abrir
y antes de cerrar un tubo
estéril o con un cultivo
puro, para evitar
contaminaciones
ambientales
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
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El mechero Bunsen,
que genera una llama
por consumo de gas
(hay versiones de
combustible líquido)
basta como equipo
de contención, en un
laboratorio nivel I
Los laboratorios nivel I son los típicos
laboratorios escuela, donde se trabaja
con microorganismo inocuos
Laboratorios nivel I de bioseguridad:
Una versión mas
segura se encuentra
en el incinerador
eléctrico: no genera
gases de combustión,
no expone a perdidas
de gas, y es ideal
para flujos laminares
verticales
Laboratorios nivel I de bioseguridad:
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
• No se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comidas así como
cualquier otro ítem personal (maquillaje, cigarrillos, etc.) dentro del área
de trabajo.
• Usar bata de manga larga dentro de laboratorio, la cual se pondrá al
momento de entrar y deberá ser quitada inmediatamente antes de
abandonar el laboratorio.
• Asegurarse de no presentar cortes, raspones u otras lastimaduras en la
piel y en caso de que así sea cubrir la herida de manera conveniente.
Normas de bioseguridad:
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Laboratorios nivel I de bioseguridad:
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
• Usar guantes de látex de buena calidad para todo manejo de material
biológico o donde exista, aunque sea de manera potencial, el riesgo de
exposición a sangre o fluidos corporales. Cambiar los guantes toda vez
que hayan sido contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes
limpios.
• No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas. Descartar
los guantes al abandonar áreas o tareas contaminadas, para no
contaminar áreas limpias mediante los guantes contaminados.
• No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con
los guantes puestos.
Normas de bioseguridad:
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Laboratorios nivel I de bioseguridad:
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
• Bajo ninguna circunstancia se pipeteara sustancia alguna con la boca,
para ello se utilizaran peras plásticas o pipeteadores automáticos.
• Lavar las manos con jabón y agua inmediatamente después de realizar
el trabajo. Descartar los guantes de látex en un recipiente con solución
desinfectante o en u recipiente para residuos peligrosos adecuado.
• No detener manualmente la centrifuga, no destaparla antes de que
cese de girar.
• No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no
tengan sus implementos de bioseguridad adecuados.
Normas de bioseguridad:
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Laboratorios nivel I de bioseguridad:
BIOSEGURIDAD Orientada a microorganismos
• Guardar prendas de abrigo y los objetos personales en un armario o
taquilla lejos de las mesadas de trabajo con material contaminado.
• No llevar bufandas, pañuelos largos ni prendas u objetos que dificulten
la movilidad.
• Procurar no circular de un lado para otro sin motivo y, sobre todo, no
correr dentro del laboratorio.
• Disponer sobre la mesa sólo los libros y cuadernos que sean
necesarios.
• Tener siempre las manos limpias y secas.
• En caso de producirse un accidente, quemadura o lesión, comunicar
inmediatamente al responsable.
• Recuerda dónde está situado el botiquín.
• Mantener el área de trabajo limpia y ordenada
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Laboratorios nivel II de bioseguridad
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Laboratorios nivel III de bioseguridad
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Autoclave doble puerta
Laboratorios nivel IV de bioseguridad:
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BIOSEGURIDAD Aplicada a establecimientos agropecuarios
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BIOSEGURIDAD Aplicada a establecimientos agropecuarios
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Barrera de contención en Patagonia: contención contra mosca de los frutos
BIOSEGURIDAD Aplicada a establecimientos agropecuarios
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No usar la totalidad de las medidas de contención necesarias, y
adecuadas en su tipo, es similar a casi no usar ninguna medida de
contención…. Por eso, en caso de tareas de muestreo de campo
programadas, primero se deben conocer los riesgos, luego estudiar
las medidas de contención recomendadas por expertos, apropiarse
de ellas, y recién después emprender el muestreo
Usar un barbijo inadecuado es similar a no usar barbijo Pro
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