ana cecilia ribeiro cruz instituto evandro …...biologia molecular rt-pcr, clonagem secueciación...
Post on 03-May-2020
8 Views
Preview:
TRANSCRIPT
INSTITUTO EVANDRO CHAGAS INSTITUTO EVANDRO CHAGAS ––
IEC/SVS / MSIEC/SVS / MS
anacecilia@iec.pa.gov.branacecilia@iec.pa.gov.br
ReuniReunióón de los Centros Colaboradores de la OPS/OMS y Laboratorios n de los Centros Colaboradores de la OPS/OMS y Laboratorios Nacionales de Referencia para Dengue en la RegiNacionales de Referencia para Dengue en la Regióón de las Amn de las Amééricasricas
10 al 12 de junio de 200810 al 12 de junio de 2008Ciudad del Saber, PanamCiudad del Saber, Panamáá
Ana Cecilia Ribeiro CruzAna Cecilia Ribeiro Cruz
Diretor
Recepción, Registro y
Distribuiciónde la muestra
biológicas
Laboratóriocultivo decélulas y
Aislamiento
LaboratórioAislamiento
enanimales
Serología I(IH, FC NT)
Producción de
Sueros yantígenos
Serología II(ELISA)
Producción de
antígenos
Biologia MolecularRT-PCR,Clonagem
secueciación
Entomologia
Administración Biotério
Area de Desinfección,
lavado yesterilización
Centro Colaborador de la OPS/OMS para Investigación, Diagnóstico, Referencia y Entrenamiento en Arbovirus.
Las Investigaciones de ARBOVIRUS en BRASIL Las Investigaciones de ARBOVIRUS en BRASIL
1954/2007: 1954/2007: 11.00011.000 aislamientos/ aislamientos/ 196196 tipos de tipos de
vvíírus/ rus/ 161161 aislados por primeira vez en Brasil/ aislados por primeira vez en Brasil/
100100 nuevos para la ciência/ nuevos para la ciência/ 3434 asociados con asociados con
las enfermadades en los seres humanos.las enfermadades en los seres humanos.
0º
10º S
70º W 50º W60º W
Região Norte
Atlant
ic Oce
an
Oceano Atlântico
0 500 1,000Kilometers
Brasil
América do Sul
DEN1 e 4; Alto Alegre,Cantá
Rio Preto, Balbina e Uatuma
Iaco, Moriche,
Purus, Sena Madureira, Xiburema Minaçu
Serra do Navio, Araguari, Amapari,
Ieri, Cupixi 176 diferentes arbovírus (DEN 2 e3, Ilheus, SLE, FA, Grupo C, Oropouche, Mayaro, Una, EEE, WEE, etc.)
AM
PA
AP
RO
AC
RR
TO
ARBOVÍRUS AISLADOS EN IEC
Ariquemes
Fonte: IEC, SEARBFonte: IEC, SEARB
1954 – A partir de los estudios: 30 arbovírus se describe ao mundo;
Hoy: 534 diferentes arbovírus registrados, 196 aislados en IEC (34%)
Bunyaviridae
Reoviridae
Rhabdoviridae
Togaviridae
Flaviviridae
Arenaviridae
P icornaviridae
Herpesviridae
Poxviridae
Orthomyxoviridae
Paramyxoviridae
Coronaviridae
Unclassified
Family ( nº )(70)
(65)(15)
(09)(08)
(03)
(03)(02)
(01)
(01)(01)
(01)
(01)
Sorotipos Circulantes no Brasil, 2008
Fonte: SVS/MS
RR AP
AMPA MA
PI
TO
BA
CERN
SE
ES
RJ
MG
SPPR
MS
GO
MT
ROAC
PB
SC
RS
ALPE
Fonte: MS/SVS/DEVEP/CGDT/COVEV
1997 2001 2007
EndemicaTransición
Áreas de riesgo de FA en Brasil
Libre, con riesgo potencialLibre
Evolución de las areas de Riesgo de Fiebre Amarilla en Brasil, 1997-2007
Distribución de municipios con registros de muertes de monos, epizootias por fiebre amarilla selvática y casos humanos (dez/07 a mar/08)
América do Sul
Sout
hAtla
ntic
OceanSo
uth
Paci
fic O
cean
0 500 1,000Kilometers
Para
Roraima
Amazonas
Amapa
Mato Grosso
Acre
Rondonia Tocantins
Maranhao
Brasil
Panamá
Peru
Iquitos
(1992-93-94-95-97-98)
Puerto Maldonado (1993)
Bejuco (1989)
Oriximina (1996)Barcelos (1980)
Novo Airao (1996)
Manaus (1980-81)
Ariquemes ,
Ouro Preto do Oeste (1991)
Mazagão (1980)
Vitória do Xingu, Brasil Novo (1996)
Serra Pelada (1994)
Porto Franco (1988)
Goias
EPIDEMIAS DE FEBRE DO OROPOUCHE, 1980 - 2006
Tocantinópolis (1988)
Xapuri, 1996 Parauapebas (2003)
Mag. Barata, Ig. Açú, Maracanã e
Vizeu(2006)
Porto de Moz (2004)
Aucayacu (1995)
South America
Sout
hAtla
ntic
OceanSo
uth
Paci
fic O
cean
0 500 1,000Kilometers
Brazil
Para
Roraima
Amazonas
Mato Grosso
AcreTocantins
Maranhao
Peru
Goias
Amapa
Guama (1955)c
Belterra (1978)
Benevides (1991)
c
Conceicao do Araguaia (1981)
Itaruma (1987)
Peixe (1991)
MAYARO BROTES EN REGIÓN AMAZONIA
1955-2008
Huanuco(1995)
Tumbes(1995)
Santa Barbara (2008)
Flujo del diagnóstico
Avaliação clínica
Sorologia Isolamento /RT-PCR0-5 dias i.s.>5 dias i.s.
HI (Ig total);IgG ELISA
MAC-ELISA(IgM)
FC
NT
Detecção de
antígenosvirais
HI +;IgG + HI -IgG
IgM + IgM -
NS1 IF ImunoHistoquímica
Sequenciamento
Análise
Avaliação Laboratorial
Avaliação epidemiológica
Diagnóstico finalseguro
2007 2008Amostras Inoculadas 4613 2987
Positivos 677 337
DEN-1 62 26
DEN-2 320 190
DEN-3 295 110
Febre Amarela - 11
2007 2008
Amostras testadas 694 515Positividade 148 48DEN-1 14 3DEN-2 45 45DEN-3 89 0
408
337
265,5
206
461
160
10720
0
100
200
300
400
500
600
700
800
VDEN1 VDEN2 VDEN3 VFA
Antígenos (mL) Producidos Antígenos (mL) Distribuído
Produción y Distribución de Antigenos (mL)/2007
La Capacidade Técnica
Personal Permanente (37)
Estudantes (15)
Contratados e
Terceirizados (10)
Total: 62
Termos de referências
Entrenamiento en pruebas serológicas y aislamientos para arbovirus.
Brasil: • 27 personas de los estados en serología (MAC ELISA
para Dengue y Fiebre amarilla);
Otros países de las América:• Bolivia, Venezuela, Francés Guayana y Colombia, se
ofrecieron formación en serología. Colombia fue tan bien capacitados en otras pruebas como producción de los antígenos e inhibición de la hemaglutinación.
• Pruebas de neutralización mediante la reducción de placas (PRNT).
Entrenamiento en RT-PCR, secuenciación y estudios moleculares
Brasil:• 1 profesional do Estado de Pernambuco (RT-PCR);• 1 investigadora da universidade do Maranhão (RT-PCR
y secuenciación);• 4 estudiantes da universidade do Pará (RT-PCR y
secuenciación);• 4 profesionales da Fiocruz e Adolfo Lutz (RT-PCR y
secuenciación – FNO)
Investigación de brotes y epidemias
Fiebre Amarilla : • Región Amazonia;• Centro Brasil (Góias y Distrito Federal);
Virus Dengue:• Región Amazonia (Pará, Amazonas, Amapá, Tocantins
y Roraima); • Nordeste Brasil (Maranhão, Piauí, Bahia e Rio Grande
do Norte);• Centro Brasil (Goiás y Distrito Federal);
Vírus Oropouche:• Norte de Brasil (Pará)
Otras investigaciones (Pará e Rio Grande do Norte).
Caracterizacione de nuevas cepas de arbovirus
Brasil:• 8 cepas fueran caracterizadas:
Breu Branco - Reoviriade Curionópolis – RhabdoviridaeTacaiúnas – RhabdoviridaeMinaçú – ReoviridaeJuruaçá, Alto Alegre y Canta ( en investigaciónes).
Caracterizacione biológica, físico-químico e molecular. Se hicieron estudios experimentales con algunos virus antes mencionado.
Brasil:• Varios entomologista de los diferentes Estados de Brasil (Tocantins,
Goiás, Mato Grosso y Distrito Federal);•Francés Guayana:• Uno entomólogo ( Colaboracione com INPA) .
En junio de 2008 un programa de capacitación está prevista en dos actividades: la entomología y captura de los monos. Esto será coordinado por el Ministerio de Salud de Brasil
La formación en entomología (A fin de apoyar las actividades epidemiológicas. Identificación
epidemiológica de la fauna, los métodos de captura, identificación de insectos capturados y los intentos de establecer colonias de insectos hematófagos principal)
• Distribución para toda la red brasileño• Laboratório Central de Paraguay: Contra el flavivirus Conjugado 6B6C-1;
peroxidasa sustrato; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue 4, y los anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de virus dengue
• Laboratorio central de Colombia: Normal antígeno para ser utilizados en pruebas de ELISA; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue 4, y un conjunto de anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de dengue virus, antígenos de virus de la fiebre amarilla. El protocolo de IgM ELISA para la fiebre amarilla también fue el envío.
• Laboratorio central de Costa Rica: anticuerpos monoclonales y policlonales para la fiebre amarilla, y también antígenos de la fiebre amarilla. El protocolo de IgM ELISA para la fiebre amarilla es también fue el envío.
La producción de antisuero y antígenos para arbovirus de importancia para la salud pública (Actividad para el desarrollo de arbovirus estudios en diferentes laboratories.To mejorar la capacidad de cada laboratorio en la identificación de arbovirus enfermedades producidas por el más común arbovirus especies en la región)
Fiebre AmarillaRed de Laboratórios
FLUXO DE AMOSTRAS:Isolamento ViralExames HistopatológicoImunohistoquímicaControle de Qualidade
Instituto Adolfo Lutz - IAL/SPLaboratório Colaborador.
Instituto Oswaldo Cruz - FIOCRUZ-RJLaboratório Colaborador.
Instituto Evandro Chagas - IEC/PALaboratório de Referência Nacional
Centro Colaborador da OMSRN
AM
RR
AC
PA
AP
RO
MT
TO
GO
DF
MA
PI
CE
PE
ALSE
BA
ES
RJ
MG
MSSP
PR
SC
RS
PBRN
• 15 cepas de VDEN1 (Genotipo IV)
• 11 cepas de VDEN2 (Genotipo III)
• 10 cepas de VDEN3 (Genotipo III)
• 20 cepas de Oropouche (Genotipos I, II y III)•• 3 cepas los virus Breu Branco
• 2 cepas los virus Melao
Biología molecular caracterización de arbovirus (Para mejorar la capacidad de arbovirus-IEC para la secuenciación
de las cepas de varios arbovirus)
• Fiebre Amarilla: Hamster• Virus Melao: Hamster y Raton• Virus Minaçu: Hamster y Raton• Virus Itacaiunas: Raton • Virus Curionopólis: Raton• Virus Breu Branco: Hamster
Todos fueron analizados por: Biologia Molecular, Histopatologia, Mircroscopia Eletronica de transmición.
Estudios experimentales sobre la patogénesis de algunos arbovirus (Para comprender el potencial de virulencia y patogenicidad de algunos arbovirus)
Conclusione y Perspectivas
1) Intensificación de la cooperación con los laboratorios nacionales de las Américas
2) Continúe colaborando con las actividades desarrolladas por la OPS y OMS
3) Ayudar a los países que necesiten asistencia durante los brotes y epidemias causadas por arbovirus
4) El aumento de ayuda financiera para los centro colaboradores
Colaboración• NACIONALES:
Fiocruz, FMT-TO, UFBA, Univ. de São Paulo, UFPA.
• INTERNACIONALES: • UTMB• CDC/Fort Collin-USA
• INEVH (Pergamino, Argentina)• Instituto Pasteur de Cayenne (Cayenne, French Guyana) y Paris
(France)
El apoyo financiero de las actividades: El apoyo financiero a las actividades de la OMS CC en IEC se ha obtenido del Ministerio de Salud y el Instituto Evandro Chagas, así como de proyectos específicos de investigación.
Laboratory Staff
Dr. Pedro F.C. Vasconcelos (Diretor)
Dra. Sueli G. Rodrigues
Dra. Elizabeth Salbé
Dr. Márcio Nunes
Dra. Nazaré Segura
Dra. Daniele Medeiros
Dra. Livia Caricio Martins
Dra Lívia Casseb
Dra. Eliana Silva
Dra. Tarciana
Dra. Raimunda do Socorro
Dr. José Antonio P. Diniz
FinanciadoresSVS - MS
CNPqFAPESPA –PaUTMB – NIH
Comunidade Européia
Campus Belém
IEC- 1936
Campus Ananindeua (Nuevo)
www.iec.pa.gov.br
top related