amostras em imunoensaios

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 Amostr as utilizadas em Imunoensaios Profa. Alessandra Pardini Disciplina: Imunologia Clínica

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Amostras utilizadas em Imunoensaios

Profa. Alessandra Pardini

Disciplina: Imunologia Clínica

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INTRODUÇÃO

- A validação dos imunoensaios é feita com base nosparâmetros de sensibilidade, especificidade, repetitividade,reprodutibilidade e estabilidade

- Problemas no imunoensaio = nova amostra = problema

desaparece

- Os imunoensaios são objeto de padronização e normatização

- Controle de Qualidade pré analítico

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PREPARO E INSTRUÇÕES AO PACIENTE

FATORES INERENTES AO PACIENTE:

Idade

Sexo

Etnia

Gravidez

Período de Ciclo Menstrual

Uso de medicamentos (anticoncepcional,

vitaminas, etc)

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JEJUM

Não tem muita importância para Imunoensaios.

No entanto, concentração excessiva de lipídios pode interferir em

teste de imunoprecipitação e aglutinação.

Evitar coletar amostras até 2h após refeição (almoço, janta) pós-

prandial.

Recomendável je jum padrão de 8h se for realizar também outros

exames. Je jum de 4h, se somente for realizar exames de imunoensaios.

Beber água não invalida o jejum.

Evitar álcool, fumo (afeta os hormônios)

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GRAVIDEZ

Geralmente ocorre resultados

falso-positivos devido mudanças hormonais e protéicos como

aumento de hCG, lactogênio, cortisol e hormônios tireoidianos.

Perguntar a data da última menstruação e a semana

gestacional, principalmente na determinação de hormônios.

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EXERCÍCIO

Exercícios com perda de água e suor

alteram a concentração de parâmetros

bioquímicos e hormônios.

Fazer 30 minutos de repouso no

laboratório antes da coleta.

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IDADE

Importante na determinação de hormônios, proteínas esubstâncias do metabolismo bioquímico.

 

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CICLO MENSTRUAL ERITMO CIRCADIANO

Deve conter no laudo o dia do ciclo

menstrual.

Cortisol é o parâmetro mais afetado ao

longo do dia. Preconiza-se coletar entre 7:00 e

9:00h da manhã.

 

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Laboratório de Análises Clínicas

Finalidades:Verificar estágios da condição biológica humanaVerificar ausência de patologias, como parte de algoritmos

médicosex.: Diabetes Mellitus (adulto) Estabelecer diagnósticosFornecer informações para diagnóstico e acompanhamento

de patologias agudas e crônicas

 

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COLETA DE SANGUE

O tipo de amostra para cada analito é definido por protocolos

internacionais.

Evitar hemoconcetração: não deixar o torniquete por mais de

1minuto.

Evitar hemólise: ruptura de hemácias.

Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato,

heparina, EDTA e inibidor de glicose).

 

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AMOSTRAS

COLETA-É o primeiro passo para TODAS as análises efetuadas noLaboratório Clínico

-Todas as etapas seguintes dependem da coleta do material

- É importante que o procedimento apropriado

(indicado) seja seguido = para obtenção de resultados exatos

- Utilizar material completamente limpo para evitar falsosresultados

 

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OBTENÇÃO DE SORO OU PLASMA

É necessário certo tempo para formação do coágulo e

retração ideal.

Não é aconselhável refrigerar a amostra.

Após centrifugação, obtêm o soro ou plasma.

 

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OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS

NOS IMUNOENSAIOS

URINA

Determinação hormonal ou de drogas

Líquido Cefalorraquidiano (LCR)

Pesquisa de antígenos bacterianos, virais e parasitários

Pesquisa de Ac

LÍ QUID

OAMNIÓTIC

O

Amniocentese procedimento para obtenção de líquido após

16ª. Semana de gestação.

Não deve conter sangue. Pesquisar presença de patógenos.

 

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OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS

IMUNOENSAIOS

FEZES

Pesquisar a presença de antígenos

SALIVA

Determinação de hormônios livres: cortisol, progesterona, estradiol e

testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam.

SÉMEN

Pesquisa de anticorpos antiespermatozóides.

Manter 3 dias de abstinência sexual.

Após ejaculação aguardar 30 min, e usar o material em até 2h

 

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Agradecimento:

Profa. Adriana Di Brito, pelo material gentilmente cedido

Bibliografia:

VAZ et al., Imunoensaios Fundamentos e Aplicações,

Guanabara Koogan, 2007.

Internet:

Pesquisa na internet agosto de 2011

Cruz, CF, LACEN/PR