amostras em imunoensaios
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Amostras utilizadas em Imunoensaios
Profa. Alessandra Pardini
Disciplina: Imunologia Clínica
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INTRODUÇÃO
- A validação dos imunoensaios é feita com base nosparâmetros de sensibilidade, especificidade, repetitividade,reprodutibilidade e estabilidade
- Problemas no imunoensaio = nova amostra = problema
desaparece
- Os imunoensaios são objeto de padronização e normatização
- Controle de Qualidade pré analítico
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PREPARO E INSTRUÇÕES AO PACIENTE
FATORES INERENTES AO PACIENTE:
Idade
Sexo
Etnia
Gravidez
Período de Ciclo Menstrual
Uso de medicamentos (anticoncepcional,
vitaminas, etc)
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JEJUM
Não tem muita importância para Imunoensaios.
No entanto, concentração excessiva de lipídios pode interferir em
teste de imunoprecipitação e aglutinação.
Evitar coletar amostras até 2h após refeição (almoço, janta) pós-
prandial.
Recomendável je jum padrão de 8h se for realizar também outros
exames. Je jum de 4h, se somente for realizar exames de imunoensaios.
Beber água não invalida o jejum.
Evitar álcool, fumo (afeta os hormônios)
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GRAVIDEZ
Geralmente ocorre resultados
falso-positivos devido mudanças hormonais e protéicos como
aumento de hCG, lactogênio, cortisol e hormônios tireoidianos.
Perguntar a data da última menstruação e a semana
gestacional, principalmente na determinação de hormônios.
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EXERCÍCIO
Exercícios com perda de água e suor
alteram a concentração de parâmetros
bioquímicos e hormônios.
Fazer 30 minutos de repouso no
laboratório antes da coleta.
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IDADE
Importante na determinação de hormônios, proteínas esubstâncias do metabolismo bioquímico.
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CICLO MENSTRUAL ERITMO CIRCADIANO
Deve conter no laudo o dia do ciclo
menstrual.
Cortisol é o parâmetro mais afetado ao
longo do dia. Preconiza-se coletar entre 7:00 e
9:00h da manhã.
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Laboratório de Análises Clínicas
Finalidades:Verificar estágios da condição biológica humanaVerificar ausência de patologias, como parte de algoritmos
médicosex.: Diabetes Mellitus (adulto) Estabelecer diagnósticosFornecer informações para diagnóstico e acompanhamento
de patologias agudas e crônicas
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COLETA DE SANGUE
O tipo de amostra para cada analito é definido por protocolos
internacionais.
Evitar hemoconcetração: não deixar o torniquete por mais de
1minuto.
Evitar hemólise: ruptura de hemácias.
Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato,
heparina, EDTA e inibidor de glicose).
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AMOSTRAS
COLETA-É o primeiro passo para TODAS as análises efetuadas noLaboratório Clínico
-Todas as etapas seguintes dependem da coleta do material
- É importante que o procedimento apropriado
(indicado) seja seguido = para obtenção de resultados exatos
- Utilizar material completamente limpo para evitar falsosresultados
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OBTENÇÃO DE SORO OU PLASMA
É necessário certo tempo para formação do coágulo e
retração ideal.
Não é aconselhável refrigerar a amostra.
Após centrifugação, obtêm o soro ou plasma.
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OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS
NOS IMUNOENSAIOS
URINA
Determinação hormonal ou de drogas
Líquido Cefalorraquidiano (LCR)
Pesquisa de antígenos bacterianos, virais e parasitários
Pesquisa de Ac
LÍ QUID
OAMNIÓTIC
O
Amniocentese procedimento para obtenção de líquido após
16ª. Semana de gestação.
Não deve conter sangue. Pesquisar presença de patógenos.
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OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS
IMUNOENSAIOS
FEZES
Pesquisar a presença de antígenos
SALIVA
Determinação de hormônios livres: cortisol, progesterona, estradiol e
testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam.
SÉMEN
Pesquisa de anticorpos antiespermatozóides.
Manter 3 dias de abstinência sexual.
Após ejaculação aguardar 30 min, e usar o material em até 2h
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Agradecimento:
Profa. Adriana Di Brito, pelo material gentilmente cedido
Bibliografia:
VAZ et al., Imunoensaios Fundamentos e Aplicações,
Guanabara Koogan, 2007.
Internet:
Pesquisa na internet agosto de 2011
Cruz, CF, LACEN/PR