aletheia souza, mv., msc. doutoranda arlindo moura, phd. orientador programa de pós –graduação...
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MALDI-TOFAletheia Souza, MV., MSc.
Doutoranda
Arlindo Moura, PhD.Orientador
Programa de Pós –Graduação em ZootecniaDepartamento de Zootecnia
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O que é MALDI-ToF??
É um método de ionização da amostra
a ser submetida a espectrometria de
massa.
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Espectrometria de MassaFerramenta analítica para determinação da massa molecular
Acurácia de 0,01%
Detecta massa entre 4 – 40.000 Da
Aplicação
Biotecnologia
Farmácia
Clínica
Ambiental
Geológica
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Espectrometria de Massa
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MALDI TOF
Matrix-Assisted
Laser
Desorption/Ionizati
on-Time of Flight
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MALDI TOFAmostras
Termolábeis
Compostos orgânicos não voláteis
Proteínas
Peptídeos
Glicoproteínas
Oligossacarídeos
Oligonucleotídeos
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Mecanismo de ação do Maldi Tof
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Preparo da amostra Dissolução em ácido trifluoroacético (TFA -10pmol/µl)
1-2 µlÁcido sinapínico (proteína)Ac. Alfa-4-ciano-hidroxicinamico (peptídeo)
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Mecanismo de ação do Maldi Tof
1.Etapa: Ionização
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Mecanismo de ação do Maldi Tof
2. Etapa: Análise do tempo de
vôo
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Os íons são separados de acordo com a relação massa/carga (m/z)
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Mecanismo de ação do Maldi Tof
3. Etapa: Detecção dos íons
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Tipos de detectores:
•Multiplicador de elétrons
• Multiplicador de luz
•Placa de microcanais
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Dados fornecidos pelo detector
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Em resumo....
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Gel 2D
Spot selecionado digerido com tripsina
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Eletroforese-2D de proteínas do plasma seminal de ovinos Santa Inês identificadas por Maldi Tof – Parte da
dissertação de João Paulo A. Rego