Practica #10: Efecto de los agentes

químicos sobre el crecimiento de los microorganismos

Equipo 7 Meneses Vázquez JesicaVázquez Pérez Amairani

Objetivo

Evaluar la eficacia de los agentes químicos mediante ensayos de inhibición bacteriana

¿Qué es un agente antimicrobiano?

Sustancias químicas naturales , sintéticas o semisintéticas que son capaces de inhibir el desarrollo o destruir los microorganismos patógenos infectantes.

¿Qué es un antibiótico?

Sustancias químicas sintetizadas por microorganismos que poseen acción antimicrobiana son administrados por ingestión oral y uso tópico.

Tipos de antimicrobianosDesinfectantes Sanitizantes Antisépticos De uso

sistémico

Eliminan carga Disminuyen carga Reducen y controlan Reducen y controlan

microbiana total microbiana total presencia de presencia de

microorganismos microorganismos

patógenos en tejidos

Antimicrobianos de uso sistémico

Clasificación según su:1. Origen Naturales: Hongos, bacterias

Sintéticos: Síntesis químicas

Semisintéticos: Modificaciones químicas de antimicrobianos naturales

2. Efecto Bacteriostático: Complementar los mecanismos

defensivos del huésped.

Bactericida: Acción letal sobre microorganismos

3. Espectro de ActividadAmplio: Gran número de especies microbianas {sean Gram (+) o Gram (-) }

Intermedio: Número limitado de microorganismos

Reducido: Pequeño número de especies microbianas

4. Mecanismo de acción Inhibición de la síntesis de la pared celular:

Pérdida de la rigidez de la célula. Ej. : Penicilinas, cefalosporinas, vancomicina, bacitracina, oxacilina, nafcilina

Alteración de la permeabilidad celular: Salida de cationes de la célula bacteriana. Detergentes, compuestos fenólicos y alcoholes. Ej. : Polimixina, nistatina, anfotericina

Inhibición de la síntesis proteica: Los agentes antimicrobianos se unen a proteínas específicas. Ej. : Aminoglucósidos, cloranfenicol, eritromicina, tetraciclina

Inhibición de la síntesis de DNA y RNA: Interferencia en dicho proceso. Ej. : Rifamicina, actinomicina D, ácido nalidíxico, ciprofloxacina, norfloxacina

Antibiograma Prueba microbiológica que se realiza

para determinar la sensibilidad de una colonia bacteriana a un agente antimicrobiano.

Permite evaluar la eficacia de un antimicrobianoo sobre una bacteria

Halo de inhibición Cada agente antimicrobiano tiene su

halo de inhibición específico y éste depende del tamaño de la molécula del antimicrbiano y su polaridad y así el organismo es reportado como sensible, intermedio o resistente al antimicrobiano testado.

¿Qué nos indica y por qué es importante el halo de inhibición

Su diámetro será directamente proporcional a la potencia del antibacteriano frente a la bacteria en cuestión e inversamente proporcional a la concentración inhibitoria mínima (CIM) del agente antimicrobiano.

Resistencia Capacidad de los microorganismos de modificar su estructura genética

para evitar ser dañados por ciertos antimicrobianos.

Mecanismos de resistencia-Se hallan codificados en el DNA cromosomal o en plásmidos

Disminución de la permeabilidad celular: Generado por cambios en receptores específicos y/o pérdida de la capacidad de transporte activo para una determinada droga. Los antimicrobiano no pueden penetrar en la

célula, o lo hacen en muy pequeñas concentraciones.

Inactivación enzimática de la droga: Enzimas que producen cambios configuracionales o conformacionales en los agentes.

Modificación del sitio blanco donde actúa la droga: Mutaciones cromosómicas, o por la acción de plásmidos, que producen cambios en los sitios activos. El antimicrobiano pierde afinidad por el sitio blanco.

Antimicrobianos contra:BACTERIAS GRAM (+) BACTERIAS GRAM (-)

•Penicilina (beta lactámicos, inhibición de la síntesis de la pared celular )

•Eritromicina

•Glicopétidos

•Lincomicina

•Aminoglucósidos (estreptomicina, espectro limitado, inhibición síntesis de proteínas)

•Tetraciclinas (de amplio espectro, inhibición síntesis de proteínas)

•Ácido nalidíxico

• Cefalosporinas (síntesis de la pared celular)

• Cloranfenicol (inhibe enlaces peptídicos)

Procedimiento 1. Usando hisopos

estériles o asa de cultivo, sembrar masivamente 3 placas de agar nutritivo con cada uno de los microorganismos.

2. Colocar adecuadamente los sendiscos (discos de papel filtro impregnados con las sustancias antimicrobianas) con pinzas estériles sobre las placas de agar nutritivo sembradas.

Sustancias antimicrobianas que se usarán:I. Agentes tenso-depresoresa) Jabonesb) Detergentesc) Sales biliaresII. Metales pesadosIII. DesinfectantesIV. Antibióticos y sulfas

3. 3. Incubar cajas a 37°C(crecimiento de la bacteria y la difusión del antibiótico desde el disco de papel).

4. Medir el diámetro de los halos de inhibición producidos por cada un de los agentes antimicrobianos.

SENSIBLE: Presenta un gran área de inhibición causada por el fármaco.

INTERMEDIO: Halo de inhibición más reducido. RESISTENTE: Presenta muy poco o casi nada de halo.

¡Gracias!