Agar T.C.B.S.Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa

Uso Medio selectivo y diferencial para

el aislamiento y cultivo de:

Vibrio cholerae

Vibrio parahemolyticus

Vibrio vulnificus

Otras especies de Vibrio

A partir de heces, aguas y alimentos.

También es conocido con el nombre “Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa”, o como “Agar Selectivo para Vibrios”.

Vibrio Los vibrios son bacterias generalmente

halotolerantes y móviles por flagelo polar que son habitantes naturales del agua salobre y salada en todo el mundo.

La enfermedad intestinal humana se ha asociado con el consumo de agua y mariscos contaminados. Vibrio cholerae es el agente etiológico de una diarrea secretora (cólera), propagada mediante la ingestión de agua y alimentos contaminados y por la vía fecal-oral.

Otras varias especies de Vibrio , por ejemplo, V. parahaemolyticus y V. fluvialis, son la causa de la gastroenteritis aguda.

Además, varias especies de Vibrio , por ejemplo, V. alginolyticus, V. vulnificus y V. damsela se asocian con las infecciones extra intestinales, tales como infecciones de heridas, septicemia, meningitis y otras.

Se ha demostrado que las infecciones de lesiones con Vibrio ocurren en especial si los pacientes tuvieron contacto con agua salada y salobre

Fundamento

El extracto de levadura, la peptona de carne y la tripteína aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano.

La bilis de buey, el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora acompañante, favoreciendo el crecimiento de Vibrio spp.

El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y debido a su alta concentración también contribuye a la selectividad del medio.

La sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el azul de bromotimol y azul de timol son los indicadores de pH que en un ambiente alcalino le otorgan al medio de cultivo el color verdeazulado y viran al color amarillo en medio ácido (por utilización de la sacarosa).

El tiosulfato de sodio es la fuente de azufre y junto con el citrato ferrico permiten la detección de la producción de ácido sulfhídrico por formación de un compuesto color negro. El agar es el agente solidificante.

Características del medio

Color: Verde azulado

pH: 8,6 +- 0,2

Almacenamiento: 2-8°C

Incubación: Aerobia a 35-37°C durante 18-24 horas.

Siembra: Estría, agotando el inoculo

Transporte

Este medio se utiliza para el aislamiento de las especies Vibrio a partir de muestras fecales (en especial si los pacientes han consumido mariscos) o de muestras clínicas extraintestinales si se sospecha la presencia de alguna especie Vibrio.

También se pueden utilizar muestras tales como torundas rectales, vómito y muestras de alimentos, en especial mariscos.

Las torundas deben transportarse en medio de transporte Cary y Blair porque las especies de Vibrio son particularmente sensibles a la deshidratación. Todas las muestras intestinales y muestras de alimentos pueden colocarse en tubos con agua de peptona alcalina para evitar la deshidratación de los materiales y deben transportarse al laboratorio sin demora.

Los tiempos de transporte de más de 8 horas reducen la viabilidad.

No se debe congelar las muestras.

Características de las colonias

Vibrio cholerae: Crecen colonias amarillas de 2-3 mm de diámetro, de borde traslúcido.

Vibrio alginolyticus: Crecen como colonias amarillas mucoides.

Vibrio parahaemolyticus: Crecen colonias con centro verde, borde traslúcido

Vibrio hollisae: Vibrio que no crecen en agar T.C.B.S.

Pseudomona aeruginosa: Inhibido, si crece son colonias color verde azulado.

Aeromonas hydrophila: Inhibido

Enterococcus faecalis: Inhibido, si crece son colonias pequeñas amarillas

Escherichia coli: Inhibido, si crece son colonias pequeñas amarillas

Proteus mirabilis: Crecimiento inhibido, si no es inhibido crecen colonias de centro verde y bordes traslucidos

Vibrio cholerae

Microorganismos fermentadores de sacarosa: colonias amarillas.

Vibrio parahaemolyticus

Microorganismos no fermentadores de sacarosa: colonias del color del medio, con centro verde.

Comparación de colonias

Limitaciones del medio

Realizar identificación bioquímica a las colonias presuntivas de Vibrio spp.

Se recomienda no realizar la prueba de la oxidasa a las colonias de T.C.B.S. Medio porque pueden obtenerse resultados falsos negativos.

Es conveniente sembrar la muestra en paralelo con un medio de cultivo nutritivo no selectivo ya que algunas cepas de Vibrio pueden no desarrollar satisfactoriamente en T.C.B.S. Medio.

Algunas cepas de Vibrio cholerae pueden fermentar lentamente la sacarosa y observarse de color verdoso a las 24 horas de incubación.

Algunas cepas de Proteus y Enterococos pueden crecer y observarse como colonias pequeñas.

El cultivo en este medio no es optimo para pruebas de aglutinación con antisuero

Noticias sobre el genero Vibrio

Catalogado por la prensa como la “bacteria come carne” Vibrio vulnificus esta causando temor en las costa de EEUU, la bacteria que vive en agua cálidas puede penetrar al cuerpo por heridas abiertas.

Mas información:

http://cl.tuhistory.com/noticias/la-terrorifica-bacteria-carnivora-que-ya-devoro-su-cuarta-victima-en-eeuu

http://www.telemundo47.com/noticias/Temor-en-las-playas-por-bacteria-come-carne-vibrio-vulnificus-307876201.html

Bibliografía

Britanialab.comBD.com