adnan menderes Üniversitesi tıp fakültesi enfeksiyon hastalıkları … · 2013. 3. 22. ·...

12
M. Özlem Ersoy, Serhan Sakarya, Necati Günay, Güliz Güleç, Barçın Öztürk, M. Bülent Etuğrul, Serkan Öncü Adnan Menderes Üniversitesi Tıp Fakültesi Enfeksiyon Hastalıkları ve Kl. Mik. A.D

Upload: others

Post on 29-Jan-2021

8 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • M. Özlem Ersoy, Serhan Sakarya, Necati Günay, Güliz Güleç, Barçın Öztürk, M. Bülent Etuğrul, Serkan Öncü

    Adnan Menderes Üniversitesi

    Tıp Fakültesi Enfeksiyon Hastalıkları ve Kl. Mik. A.D

  • Kistik Fibrozis, sindirim sistemi, endokrin ve solunum sistemi gibi birçok sistemi ilgilendiren yüksek mortaliteye sahip otozamal resesif genetik bir hastalıktır.

    Epitelyumde çözünmüş madde transportunun bozulmuş olması en karakteristik patolojidir. Bu patolojiye bağlı olarak hava yollarında oluşan dehidratasyon ve artmış mukus sekresyonu özellikle kronik bakteriyel enfeksiyonların oluşması için çok elverişli bir ortam oluşturmaktadır.

    Özellikle Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, veStenotrophomonas maltophilia gibi aynı veya yakın türlerden oluşan Gram negatif bakteriler bu hastalarda sıklıkla izole edilmektedir.

    KF li hastalardan izole edilen izolatlarda biyofilim oluşturma gibi fenotipik farklılıklar, akla biyofilim yapının kistik fibrozis akciğer enfeksiyonlarında enfeksiyonun eradike edilememesi ve antibiyotik direncinde en etkili virülans faktör olduğunu düşündürmektedir.

  • Kistik fibrozisli (KF) hastalarda oluşan

    P.aeruginosa enfeksiyonlarında

    mikroorganizmanın in vitro ortamda fenotipik

    yapı özelliklerinin araştırılarak;

    1. Aynı fenotipik özellikleri olan mikroorganizmalar mı

    enfeksiyona neden oluyor?

    2. Mikroorganizma enfekte ettikten sonra çevresel

    koşullara bağlı olarak fenotipik yapı mı değiştiriyor?

    Sorusuna cevap bulmaktır.

  • GEREÇ VE YÖNTEM

  • Çalışmamızda green florasan protein (GFP) transfer

    edilmiş P. aeruginosa, normal (BEAS) ve KF (IB3-1)

    bronşiyal, ve normal (1HEA) ve KF (CFTE) trakeal epitel

    hücresi kullanılarak in vitro koşullarda;

    ◦ Aderans: kantitatif (fluorometrik) ve kalitatif (florasan mikroskopik)

    olarak 24 kuyucuklu hücre kültür plaklarına ekilmiş hücreler ile,

    ◦ Büyüme oranları: fluorometrede 37 oC de inkübasyonda 485-535 nm

    dalga boyunda 0, 6, 8, 12 ve 16. saatlerdeki fluoresans değerlerine

    bakılarak,

    ◦ Slime üretimi: Kristal viyole boyama yöntemi ile slime üretimine bakılarak

    belirlendi.

  • Trakeal Bronşiyal0

    10

    20Normal CF

    *

    Ad

    hera

    ns

    (flu

    ore

    san

    Un

    it/1

    mg

    pro

    tein

    )

    p

  • hücre

    0 6 8 12 16

    0

    5

    10

    151HEA CFTE BEAS IB3-1 Kontrol

    saat

    Flu

    ore

    san

    s ü

    nite

  • BEAS

    IB3-

    1

    Cont

    rol

    0.0

    0.5

    1.0

    1.5 *, **A

    bso

    rban

    s (O

    D)

    .*IB3-1 hücresindeki slime üretimi kontrol grubuna göre daha fazladır (p:0.0122).** IB3-1 hücresindeki slime üretimi BEAS hücresindeki slime üretimine göre daha fazladır. (p: 0.0035)

  • SONUÇ

  • P.aeruginosa’nın bronşiyal KF epitelinde aderansı

    azalırken, biyofilm üretiminin artması ve morfolojik

    yapısının değişimi,epitelyum yüzey yapısında oluşan

    yapısal değişiklikler sonucu oluşan olumsuz ortam veya

    bu değişikliklere neden olan genetik uyarının bakteri

    üzerine direkt etkisine bağlı olduğu düşündürmektedir.

    Tedaviye direnç gelişiminde bakterinin bu tür fenotipik

    değişimleri göstermesi direncin temel nedenidir.