SALES DE WOLFRAMIOÁCIDO FOSFOTÚNGSTICO

Pablo CruzMayarling Troncoso

Microscopía Electrónica 2015

Universidad de ChileFacultad de MedicinaDepartamento de Tecnología MédicaEscuela Tecnología Médica

Wolframio-Tungsteno Metal escaso en la corteza terrestre Color gris, altamente duro y denso Reconocido también como tungsteno

InformaciónElectronegatividad 2,36 (Pauling)

Calor específico 130 J/(kg·K)Conductividad eléctrica

18,9 × 106 m-1·Ω-

1

Conductividad térmica 174 W/(m·K)

Propiedades físicasEstado de la materia Sólido

Punto de fusión 3683 K (3410°C)*

Punto de ebullición

6203 K (5930°C)*

Entalpía de vaporización 82456 kJ/mol

Entalpía de fusión 35,4 kJ/mol

Presión de vapor 4,27 Pa a 3680 K

GeneralNombre, símbolo,

númeroWolframio (tungsteno), W,

74Serie química Metal de transición

Grupo, periodo, bloque 6 ,6 , d

Densidad, dureza Mohs 19.250 kg/m3, 7,5

AparienciaBlanco grisáceo,

brilloso

Propiedades atómicasMasa atómica 183,84 gr/mol*Radio medio† 135 pmRadio atómico

calculado 193 pm

Configuración electrónica [Xe]4f14 5d4 6s2

Estados de oxidación (óxido)

6, 5, 4, 3, 2 (levemente ácido)

Estructura cristalina Cúbica centrada en el cuerpo

Propiedades del Wolframio

Ácido Fosfotúngstico

Primer colorante electrónico utilizado en 1945 por Hall y sus colaboradores.

En 1956 se empezó a usar como colorante de rutina.

En una molécula de acido fosfotúngstico se almacenan 12 átomos de tungsteno. Presenta gran peso molecular y resistencia al bombardeo de electrones.

Ácido Fosfotúngstico

Fórmula química W12O40 H3P. Peso molecular es de 2880,17 gr/mol. Normalmente se presenta en forma hidratada. Utilizado como medio de contraste en MET para

virus, nervios, polisacáridos y otros tejidos. Es corrosivo, no especialmente tóxico y

ligeramente irritante.

Comercialmente

Se expende en forma de cristales blanco amarillentos sin olor.

Muy buena solubilidad en agua. Óxidos de tungsteno o fósforo son inflamables se

apaga por agua nebulizada o extintores de polvo seco anhidro carbónico.

Evitar calor en almacenaje

Condiciones de almacenaje-Área de Almacenamiento

Zona de almacenaje general de reactivos y soluciones químicas.Almacenamiento en bodegas y/o cabinas, diseñadas para contener productos químicos con seguridad.Lugar fresco a frío, seco y con buena ventilación.Señalización del riesgo.

-Precauciones Especiales

Almacenar separadamente de condiciones y productos incompatibles.Proteger contra el daño físico.Mantener los envases cerrados y debidamente etiquetados.

Residuos

Se pueden eliminar a través de las aguas residuales, por el desagüe u otra alternativa segura, una vez que se acondicionen de forma tal de ser inocuos para el medio ambiente.

Posibilidades: - Diluir con Agua en una proporción 1:5 y después neutralizar hasta pH

6-8, adicionando una solución de Sodio Hidróxido al 30%. La solución salina resultante se diluye con más agua en una proporción 1:10 y posteriormente se elimina en las aguas residuales o por el desagüe.

- Es importante considerar para la eliminación de residuos, que se realice conforme a lo que disponga la autoridad competente respectiva, solicitándose previamente la autorización correspondiente

Bioseguridad

Riesgos para la salud-Efectos de sobreexposición

-Inhalación Irritaciones moderadas en el tracto respiratorio.-Contacto con La Piel Irritaciones.

Posible efecto corrosivo.-Contacto con los Ojos

Irritaciones.Posible efecto abrasivo.

-Ingestión Nocivo leve.Irritaciones en boca y tracto gastrointestinal en general.Grandes cantidades producen dolor abdominal, vómitos y diarrea.DL50 (oral - rata): 3300 mg/kg.

En caso de emergencia-Inhalación Trasladar a la persona donde exista aire fresco.

En caso de paro respiratorio, emplear método de reanimación cardiopulmonar.Si respira dificultosamente se debe suministrar Oxígeno.Conseguir asistencia médica de inmediato.

-Contacto con la piel

Lavar con abundante Agua, a lo menos por 10 minutos.Utilizar de preferencia una ducha de emergencia en caso de ser necesario.Sacarse la ropa contaminada y luego lavarla.De mantenerse la lesión, recurrir a una asistencia médica.

-Contacto con los Ojos

Lavarse con abundante Agua en un lavadero de ojos, entre 10 y 15 minutoscomo mínimo, separando los párpados.De persistir el daño, derivar a un servicio médico.

-Ingestión Lavar la boca con bastante Agua.Dar a beber abundante Agua.Derivar a un centro de atención médica de inmediato.

- Otros efectos

Riesgo de incendios

-Cancerígeno

No hay evidencias.

-Mutágeno No hay evidencias.-Teratógeno

No hay evidencias.

-Otros Efectos

Daño a riñones.-Condición de Inflamabilidad

No combustible.

-Productos de Combustión Óxidos de Fósforos y Óxidos de Tungsteno.

-Medios de Extinción En general, uso de extintores de Polvo Químico Seco, Espuma Química y/o Anhídrido Carbónico.Aplicar Agua en forma de neblina.

Equipos de protección

Tipos de contraste

Contraste Negativo-Soluciones acuosas al 1% p/v, pH 7,0 (ajustado con KOH 1N), T.A. durante 5

minutos.-Muestras (suspensiones) son colectadas sobre una membrana de soporte (mb.

Fomvar), se añade una gota de suspensión, se retira el exceso y se añade una gota de solución de

contraste.

Contraste positivo-Soluciones acuosas 1% p/v, pH entre 2,0 y 4,0, T.A. durante 3 a 5 minutosEj: Ácidos nucléicos: solución 1% p/v, disuelto en etanol 70% a pH 2. Colágeno: solución 1% p/v, disuelto en agua destilada a pH 4,2.-Se utilizan muestras incluidas en resina, por lo que a la grilla con cortes se ponesobre una gota de medio de contraste sobre parafilm en una cámara de tinción

Tinción positiva: iones del metal pesado reaccionan con macromoléculas de la muestra incrementando su contraste.

Tinción Negativa: la macromolécula no es teñida sino rodeada por el contrastante electrón-denso, presenta contraste negativo, es decir electrón-transparente en contraste con un fondo electrón-denso.

Interacciones con el tejido

Tinción positiva: a pH acido (pH 2.0 aprox),el metal se disocia y se comporta como catión uniéndose a proteínas (COO-) o de hidratos de carbono.

Interacciones con el tejido Tinción negativa-Sal de metal pesado se introduce en regiones hidrofílicas de la muestra.-Basado en el principio de no reacción entre tejido y medio de contraste, donde el material se deposita en los alrededores de la muestra-Haz de electrones pasa a través de la muestra pero no por el background metálico

Aplicaciones

Contraste negativo -Suspensiones de virus -Suspensiones de bacterias -Suspensiones de macromoléculas -Cortes de nervios Contraste positivo - Cortes en resina

Suspensiones de virus

Suspensiones bacterias

Suspensiones de membranas

Bibliografía

Técnicas de Microscopía Electrónica en Biología, Santander, Aguilar, S.A de ediciones , 1969.Pag 509-553.

John J. Bozzola,Lonnie Dee. Electron Microscopy: Principles and Techniques for Biologists. 1992.

Ficha de seguridad química winkler, ácido fosfotúngstico.

J. E. SHERIDAN. THE APPLICATION OF ELECTRON MICROSCOPY TO THE STUDY OF SOME INTERESTING SPIRAL MICROORGANISMS FOUND IN POND WATER COLLECTED AT OTARI PLANT MUSEUM, WELLINGTON

WILLIAM P. EFFECTS OF PHOSPHOTUNGSTATE NEGATIVE STAINING ON THE MORPHOLOGY OF THE ISOLATED GOLGI APPARATUS

Ácido fosfotungstico de Wolfarth-Botterman(1956) -primeros usos de colorantes electronicos (1945) Hall et all.Problemas del plomo formación de carbonato de plomo que contaminaba los tejidos sol: aumentar alcalinidad,eliminar aire.Reynols citatro como agente reductor para retener plomo y ste no formara los precipitados de carbonato insoluble. (plomo + dioxido de carbono)Objetivo del contraste con sales, aumentar el contraste de estructuras subcelulares.(poca dif de contraste entre ellas)Factores que afectan la dispersión de electrones: densidad del tejido, espesor y peso atomicco.

La union de Sales pesadas aprovechan el peso atomico de los metales para aumentar el contraste.

Contraste mediante técnica de sombreado. detalles de la superficie y no de la ultraestructura.(se evapora un metal(miligramos) sobre un filamento incandecente de tungsteno. Emisión del vapor en angulo agudo para que los agregados se depociten en un lado del relieve.iluminación lateral.)

Variación del angulo se hace conociendo la altura de la estructura a sombrear y asi poder calcular la longitud de la sombra.

Colorantes según su momento de aplicación Marcacion selectiva de metales para estructuras.: ac.

Fosfotungstico fibras colagenas elasticas y mucina. Glucogeno en secciones oxidadas.

Tinción con acido fosfo tungstico. Fue el primer colorante electroncio qu se utilizo en 1945 por hall y colaboladores. En 1956 se empezo a usar como colorante de rutina. En una molecula de acido dosfotungstuco se almacenan 24 atomos de tungsteno. Gran peso molecular y resistencia al bombardeo de electrones .

Es muy selectivo para estructuras extracelulares como colageno elastina mucopolisacaridos y laminas basales.

Preparación de la solución colorante Sol acuosa o alcoholica (acetona mejor penetracion del colorante) Concentración 0,1-10% comumente 1 y 2 % aumentando tiempo de exposicion

tejido a la sol. Según watson 1958 la solucion es mas efectiva si se alcaliniza con KOH

Procedimiento tinción flotación de rejillas(puede interaccionar con cobre) con los cortes hacia la solucion o por inmersión total. Si el proceso dura varias horas dejar cortees sin rejillas.

Tincion por bloque o despues de la fijación el colorante se va con el proceso de inclusion.

La penetración del colorante puede favorecerse con calor. Tiempo de tinción menos de 10 min a 1-5 horas. Si esta muy concentradose lava con h2o , si es muy diluida se deja secar no mas.

Estructuras que se tiñen. APT acuoso 10% 1 hr colageno APT ALCOHOLICA 0,1-0,5% elastina APT CORTES 2% de H2O2 30 a 60 min y luego 1

% acido peryocio 20-40 min - solucion 5 % en acetona durante 15 min.

Según la guia del minsal los metles pesados son reciduos de peligrosidad categoria 1