การสอบเทีียบเครื่ื่อง...
TRANSCRIPT
![Page 1: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/1.jpg)
![Page 2: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/2.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Scope
- Operation qualification, OQ
- Performance qualification, PQ
- Maintanance
![Page 3: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/3.jpg)
DEGASSER SAMPLEPREPARATION
WASTE / CORRECT
COLUMN DETECTOR
INLINE FILTRATION PRE-COLUMN RECORDING SYSTEMDATA HANDLING
INJECTIONSYSTEM
SOLVENTSUPPLY
SOLVENTDELIVERYSYSTEM
รูปที่ แสดงองคประกอบของเครื่องโครมาโทกราฟชนดิของเหลวประสิทธิภาพสูง
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 4: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/4.jpg)
องคประกอบหลกัที่ตองทําการตรวจสอบ
- Pump
- Injector / Autosampler
- Detector
- Software
ความถี่ : 1 ป / ครั้ง หรือตามความเหมาะสม
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 5: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/5.jpg)
Pump
Isocratic pump
- Accuracy
- Precision
- Linearity
Gradient pump
- Proportioning valve
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 6: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/6.jpg)
Isocratic pump
อุปกรณ
- Volumetric flask
- Stop clock
- Flow meter
วิธีการตรวจสอบ
แบบที่ 1 : ใช flow meter
แบบที่ 2 : ใช volumetric flask
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
HP
Water, PE, Shimudzu
![Page 7: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/7.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 8: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/8.jpg)
FLOW METER
WASTE
MIXER
A B C D
PUMP
PROPORTIONING
VALVE
แบบที่แบบที่ 1 : F1 : Flow meterlow meter
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
ขอดี : สะดวก รวดเร็ว ถูกตอง
ขอเสีย : เครื่องมือราคาแพง
ตอง recalibrate
![Page 9: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/9.jpg)
MIXER
A B C D
PUMP
PROPORTIONING
VALVE
แบบที่แบบที่ 22 : : Volumetric flaskVolumetric flask
FLASK
Stop clock
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
ขอดี : อุปกรณราคาถูก มีอยูแลว
ขอเสีย : ใชเวลานาน
![Page 10: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/10.jpg)
Accuracy
จบัเวลาการไหลของ solvent ดวยอัตราการไหลที่ตองการ จน solvent
ถึงขีด คํานวณอตัราการไหล
อตัราการไหล = ปริมาตรของขวด/เวลาที่ใช
Precision
คํานวณ % RSD จากการวัดซ้ํา
Linearity
เขียนกราฟความสัมพันธระหวาง อัตราการไหลที่คํานวณและอตัราการไหลที่ตั้ง คํานวณหาคา correlation coefficient
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters : Methanol; PE, HP : Water
![Page 11: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/11.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 12: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/12.jpg)
รูปขดลวดสราง back pressure
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters : tube ขนาด 3mx0.25mm ; P 500-700 psi
PE : tube ขนาด 20 mx1/32 in ; P 1000 psi
Shimudzu : tube ขนาด 4mx0.1 mm
![Page 13: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/13.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 14: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/14.jpg)
Proportioning Valve
สารเคมีที่ใช
- Propylparaben 5.6 mg/l in methanol, GPV
- 0.5 % Acetone in water
- 0.2,0.4 % Acetone in water
- 0.1 % Acetone in water
วิธีการ
- ทําทีละคู วัดคา absorbance
- ทําทีละคู วัดคา peak height
- ทําทีละคู วัดคาปริมาณ solvent ที่ลดลง
- ทําทีละ 3 valve วัดคา peak height
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters
HP
PEDionex
![Page 15: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/15.jpg)
วิธีการที่ 1: หาทีละคูโดยวัดคา absorbance
. เตรียมสารละลาย propylparaben ใน methanol ใหมีความ
เขมขน 5.6 mg/l กรองใสในขวด B
. บรรจุ methanol ในขวด A
. ทําการไลสารละลายเกาในทอ A และ B ออกใหหมด
. ตอทอจาก pump เขาเครื่อง detector โดยไมผานคอลมัน
. ทําการตั้งโปรแกรมปรับสัดสวนของสารละลาย ตามตาราง
. อานคา absorbances ที่ความยาวคลืน่ 256 นาโนเมตร
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 16: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/16.jpg)
ตารางแสดงขั้นตอนการตั้งอตัราสวนของ solvent
Step % B % A Time (min) Curve
1 100 0 5 11
2 80 20 5 11
3 60 40 5 11
4 40 60 5 11
5 20 80 5 11
6 0 100 5 11
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 17: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/17.jpg)
การคํานวณ
At 0% A, 100% B
Cal. Abs. = Obs. Abs at 100% B - Obs.Abs at 0% B
At 20% A, 80% B
Cal. Abs. = Obs. Abs. at 80% B - Obs. Abs. at 0% B
Absorbance ที่ 80% B คํานวณได ดังนี้
Cal. 80% B = Cal. Abs. at 80% B x 100Cal. Abs. at 100% B
% Difference = (Cal. 80%B - %B) x 100% B
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
100% PP 100 %MeOH
![Page 18: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/18.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 19: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/19.jpg)
At 0% A, 100% B
Cal. Abs. = 0.646 – 0.000
At 20% A, 80% B
Cal. Abs. = 0.518 – 0.000
Absorbance ที่ 80% B คํานวณได ดังนี้
Cal. 80% B = 0.518 x 100 = 80.1858
0.646
% Difference = (80.1858 – 80.000) x 100 = 0.23
80.000
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
ขอดี : ละเอียด สามารถทราบจดุที่ผิดปกติ
ขอเสีย : เสียเวลา การคํานวณคอนขางยุงยาก
![Page 20: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/20.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
วัดคา peak height
![Page 21: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/21.jpg)
วิธีการที่ 2: หาทีละคูโดยวัดคา peak height
. เตรียมสารละลาย propylparaben ใน methanol ใหมีความ
เขมขน 5.6 mg/l กรองใสในขวด C,D
. บรรจุ methanol ในขวด A,B
. ทําการไลสารละลายเกาในทอ A ,B ,C และ Dออกใหหมด
. ตอทอจาก pump เขาเครื่อง detector โดยไมผานคอลมัน
. ทําการตั้งโปรแกรมปรับสัดสวนของสารละลาย ตามตาราง
. อานคา peak height
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 22: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/22.jpg)
ตารางการตั้ง gradient
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 23: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/23.jpg)
รูป การทํา gradient
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
การคํานวณ :
Percent A/C = peak height A/C
peak height full scale
Limited : 10.0 + 0.5ขอดี : ทราบวา valve ไหนมีปญหา
เชน : คํานวณ percent A/C = 9.8
A/D = 10.0
B/C = 9.5
B/D = 10.1
![Page 24: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/24.jpg)
วิธีการที่ 3: ทําทีละคู วัดคาปริมาณ solvent ที่ลดลง
. ใสสาย solvent A และ solvent B ใน graduated cylinder ขนาด 50 ml
. บรรจุ 100 % methanol ในแตละ cylinder 50 ml
. ตัง้ flow 5 ml/min ดวย 50 % A และ 50 % B
. เมื่อ solvent ใน cylinder A ลดลงถึง 25 ml หยุด flow
. คํานวณความแตกตางปริมาตรของ solvent ระหวาง cylinder
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 25: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/25.jpg)
วิธีการที่ 4 : ทําทีละ 3 valve วัดคา peak height
. เตรียมสารละลาย propylparaben ใน methanol ใหมีความ
เขมขน 5.6 mg/l กรองใสในขวด C,D
. บรรจุ methanol ในขวด A,B
. ทําการไลสารละลายเกาในทอ A,B,C และ Dออกใหหมด
. ตอทอจาก pump เขาเครื่อง detector โดยไมผานคอลมัน
. ทําการตั้งโปรแกรมปรับสัดสวนของสารละลาย ตามตาราง
. วัดคา peak height
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 26: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/26.jpg)
รูป การทํา gradient
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 27: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/27.jpg)
ตารางการคํานวณ
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
ขอดี : รวดเร็ว
ขอเสีย : ไมสามารถบอกไดวา valve ไหนมีปญหา
![Page 28: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/28.jpg)
Autosamplerขอกําหนดที่ตองทําการตรวจสอบ
1. Accuracy 2. Precision 3. Linearity4. Carryover
กรณีระบบการฉีดของเครื่อง ไมดดูสารละลายเกินปริมาตรที่กําหนด สามารถหา accuracy, precision และ linearity โดยการชั่งน้ําหนกั
กรณีระบบการฉีดของเครื่องดดูสารละลายเกินปริมาตรที่กําหนด
ทําการตรวจสอบในขั้นตอนการตรวจสอบประสิทธิภาพของเครื่องทั้งระบบ (PQ)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 29: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/29.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
วิธีการ :
1. ชั่งน้ําหนกัน้ําใน vial (w1)
2. inject สารในปริมาตรที่ตั้งไว 6- 10 ครั้ง (n)
3. ชั่งน้ําหนกัน้ําใน vial (w2)
ปริมาตรที่ inject = w2-w1/n
![Page 30: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/30.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Carryover
สารเคมีที่ใช :
- Caffeine 0.25, 0.3 mg/ml in water
- Universal test mix
วิธีการ
Inject sample 6-11 injection -> inject blank (solvent, MP)
คํานวณ peak area จาก chromatogram ของ blank เทียบกบั peak area จาก sample
PE
HP, Dionex
% Carryover = peak area carryover x 100
peak area sample
PE : < 0.02 %
HP : < 0.2 %
Dionex : < 0.1 %
![Page 31: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/31.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Column , sample heater /cooler
วัดความถูกตองของอณุหภูมิโดยใช thermocouple
![Page 32: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/32.jpg)
Detector
หัวขอกําหนดที่ทําการตรวจสอบ
UV-VIS Detector
- Wavelength accuracy
- Linearity
- Baseline noise / Drift
Diode array detector
- Photometric accuracy
- Linearity- Baseline noise / Drift
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 33: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/33.jpg)
สารเคมีที่ใช
- Propylparaben in methanol
- Uracil in methanol
- Caffeine in water
- Pyrene in methanol
- Holmium
- Hg lamp
- Erbium perchlorate
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters : 15 mg/l
HP
Dionex : DADPE
Shimudzu
Waters : DAD
Waters : Linearity
![Page 34: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/34.jpg)
UVUV--VIS DetectorVIS Detector
Wavelength accuracy : วิธีการ
. เปดสวิทซเครื่อง ทิ้งไวประมาณ 90 นาที
. ใชขอตอที่สวมเขากับ syringe สําหรับฉีดสารตัวอยางตอเขากับทอเขาของ detector
. ใช methanol ฉีดลาง flow cell จนอานคา abs. ไดเทากับศูนย หรือกด Auto zero ของเครื่อง detector เมื่อมี methanol เต็ม flow cell
. ฉีดสารละลายมาตรฐาน propylparaben ความเขมขนประมาณ 5.6 mg/l ใหเต็ม flow cell และใหมั่นใจวาไมมีฟองอากาศ
. ทําการตั้งคาความยาวคลื่นตางๆ ตั้งแต 249 nm ถึง 264 nm โดยการเพิ่มความยาวคลื่นทีละ 1 nm แลวอานคา abs. ของแตละความยาวคลื่น โดยทิง้ ชวงประมาณ 15-30 วินาที เพื่อใหคา abs. คงที่
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 35: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/35.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 36: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/36.jpg)
รูป detector
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 37: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/37.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 38: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/38.jpg)
Linearity test :วิธีการ
. เปดสวิทซเครื่อง UV detector ไวประมาณ 60 นาที
. ใชขอตอที่สวมเขากับ syringe สําหรับฉีดสารตัวอยางตอเขากับทอเขาของ Detector
. ตั้งคาความยาวคลื่นของเครื่องตรวจวัดสารที่ 256 nm
. ใช methanol ฉีดลาง flow cell จนอานคา abs. ไดเทากับศูนย หรือกด auto zero
. ฉีดสารละลาย propylparaben ความเขมขนประมาณ 0.5 mg/l รอจนคา abs. นิ่ง
อานคา abs.
. ทําซ้ําตั้งแตขอ 4-5 โดยฉีดสารละลาย propylparaben ความเขมขน 1, 2, 4, 8
และ 16 mg/l
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 39: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/39.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
การประเมินผล :
- คํานวณคา correlation coefficient จากการเขียนกราฟระหวางคา
absorbance และ concentration
- คํานวณคา sensitivity และ % RSD ของคา sensitivity
sensitivity = absorbance/concentration
![Page 40: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/40.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 41: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/41.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 42: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/42.jpg)
Baseline noise- WL : 254 nm
- Range : 1 mAU
- Flow rate : 1 ml/min
- Recorder : 1 mVFS, Chart speed 1 cm/min
- Record baseline 30 min
- อานคา baseline noise ในชวง 1 min อานคามากกวา 5 ชวง
PUMP
MeOH
DETECTOR RECORDER
1 mAU
1 min 30 min
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 43: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/43.jpg)
Baseline drift- WL : 254 nm
- Range : 1 mAU
- Flow rate : 1 ml/min
- Recorder : 1 mVFS, Chart speed 1 cm/min
- Record baseline 30 min
PUMPMeOH
DETECTOR RECORDER
1 mAU
1 min 30 min
D
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 44: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/44.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 45: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/45.jpg)
Diode array detector
Accuracy : Scan 3 D เปรียบเทียบ wavelength accuracy spectrum plot
รูป spectrum
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters: erbium perchlorate
![Page 46: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/46.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Dionex : pyrene
![Page 47: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/47.jpg)
Linearity : วัดคา absorbance ที่ความเขมขนตาง ๆ
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters : propylparaben
คํานวณ %RSD ของ sensitivity
![Page 48: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/48.jpg)
Baseline noise
Baseline drift
เชนเดียวกับ UV-VIS detector
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 49: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/49.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Software
- มโีปรแกรมปอนขอมลูใหเครื่องคํานวณคา peak area และ peak
height และประเมนิผลที่ไดเปรียบเทียบกับเมือ่ตดิตัง้เครื่อง
- ใชขอมลูเกาที่เคยทําเก็บไวใหเครื่อง คํานวณคา peak area และ peak
height และประเมนิผลเปรียบเทียบกบัขอมลูที่เคยทําไว
![Page 50: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/50.jpg)
Performance qualification
- Pump
- RT precision
- Autosampler
- Precision ( peak area)- Linearity (peak area, volume inject)
- Detector
- Linearity (peak area, concentration)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 51: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/51.jpg)
สารเคมีที่ใช
- propylparaben ที่ความเขมขนตาง ๆ
- caffeine ที่ความเขมขนตาง ๆ
- PQ solution – acetone
- acetophenone
- propiophenone
- butyrophenone
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Waters : Condition
Column : symmetry C-18 4.6x75 mm
MP : MeOH : Water = 60:40
Wavelength : 254 nm
Flow : 1 ml/min
HP, Dionex
![Page 52: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/52.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
สารเคมีที่ใช (ตอ)
- Universal test mix - anthracene
- ethylbenzene
- isopropylbenzene
- tert-butylbenzene
- toluene
PE : Condition
Column : C-18(new) 3x3 mm
MP : MeOH::Water = 80:20
Flow : 1.2 ml/min
Wavelength : 260 nm
![Page 53: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/53.jpg)
ตัวอยางการทํา PQสารเคมี - Acetonitrile
- Propylparaben- Methanol- Water HPLC grade
สภาวะการทํางานของระบบ (HPLC condition)Column : C-18 Mobile phase : Acetonitrile : Water = 50 : 50Flow rate : 2.0 ml/minDetector : UV 256 nmInjection Volume : 20 μlSample : Propylparaben 10 mg/ml in methanol
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 54: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/54.jpg)
Pump
Precision : คํานวณคา percent relative standard deviation
(%RSD) ของคา retention time ในการ inject 6 ครั้ง
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 55: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/55.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
Autosampler
Precision : คํานวณคา percent relative standard deviation (%RSD)
ของคา peak area ในการ inject 6 ครั้ง
Linearity : คํานวณคา correlation coefficient ของกราฟระหวาง peak
area และ volume inject
![Page 56: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/56.jpg)
Detector
Linearity : คํานวณคา correlation coefficient ของกราฟ
เสนตรงระหวาง peak area และ concentration
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 57: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/57.jpg)
Maintenance
การรั่วซึมของฟตติ้ง (fitting)
ความถี่ : ทกุครั้งที่ใช ผูดําเนินการ : ผูรับผิดชอบเครื่อง
วิธีการ :
1. เปดเครื่องใหทํางานตามวิธีการใชเครื่องมือ
2. สังเกตดูการรั่วซึมของเฟสเคลื่อนที่ โดยใชกระดาษกรองดูดซับ หรือการมีคราบเกลือติดอยูตามขอตอตาง ๆ ไดแก compression screw, ferrule, nut และ union หากพบการรั่วซึม ซึ่งเกิดจากการขันเกลียวผิดวิธี เปนผลใหปลายฟตติ้งเสีย ใหเปลี่ยนใหม แลวขันใหถกูวิธี โดยใชมอืขันกอนตามดวยประแจขันใหแนนพอดี
การประเมินผล
ไมมีการรั่วซึมของเฟสเคลื่อนที่ หรือคราบเกลือติดอยูตามขอตอตาง ๆ
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 58: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/58.jpg)
ประสทิธิภาพของปม (pump)
ความถี่ : ทุกครั้งที่ใช ผูดําเนินการ : ผูรับผิดชอบเครื่อง
วิธีการ : 1. เปดเครื่องใหทํางานตามวิธีการใชเครื่องมือ
2. สังเกตดูการเปลี่ยนแปลงของคาความดันของระบบการรั่วซึมของเฟสเคลื่อนที่
ที่บริเวณ pump head และฟงเสียงการทํางานของปมที่ผิดไปจากปกติ
3. ตรวจสอบอัตราการไหล โดยการตั้งอัตราการไหลไวที่คาหนึง่ ใชกระบอกตวงรองรับ
เฟสเคลื่อนที่ที่ออกมาจากปมโดยไมติดตั้งคอลัมน อานปรมิาตร เมื่อครบเวลาที่
กําหนดและเปรียบเทียบกับคาที่คํานวณได
การประเมินผล
1. คาความดันของระบบ เปลี่ยนแปลงไมเกิน 10 ปอนดตอตารางนิ้ว
2. ไมมกีารรั่วซึมของเฟสเคลื่อนที่
3. ไมมีเสียงผิดปกติเกิดขึ้นขณะทํางาน
4. ปริมาตรของเฟสเคลื่อนทีท่ี่อานไดเบี่ยงเบนไป จากคาที่คํานวณไดไมเกิน + 3%
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 59: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/59.jpg)
ตรวจสอบการรั่วซึมและความสกปรกของระบบฉีดสาร
ความถี่ : ทุกครั้งที่ใช ผูดําเนินการ : ผูรับผิดชอบเครื่อง
วิธีการ :
1. เปดเครื่องใหทํางานตามวิธีการใชเครื่องมือ
2. ฉดี methanol ความเขมขนรอยละ 50 โดยปรมิาตร
3. สังเกตการรั่วของระบบฉดีสารทัง้ดานหนาและดานหลงั ซึ่งเกิดจาก loop ในระบบฉีดสาร
สกปรก หรือ seal หรือ valve เสียหาย ถาสาเหตุการรั่วซึมเกิดจาก loop สกปรก ใหทํา
ความสะอาดดวย methanol ความเขมขนรอยละ 50 v/v ในแตละกรณีดงันี้
- ระบบฉดีของ Rheodyne ใชเข็มฉีดน้ํายาสําหรบัลางโดยการฉดี methanol ความเขมขนรอยละ 50 โดยปรมิาตร ประมาณ 2 ml
- ระบบฉดีของ “U6K” (Waters) ใหลางโดยการสับคานควบคุม (mode) ไปที่ “load” และ “inject” สลับกันไปมา
- ระบบฉดีอัตโนมัติ กดปุม purge
การประเมนิผล : ไมมกีารรั่ว
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 60: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/60.jpg)
ตรวจสอบการอุดตันของ solvent reservoir filter และทอเทฟลอน (Teflon) จาก reservoir
ความถี่ : ทุกเดือน ผูดําเนินการ : ผูรับผิดชอบเครื่อง
วิธีการ :
1. ถอด solvent reservoir filter ลางโดยการ sonicate นานประมาณ 5-10 นาที
ในกรดไนตริกความเขมขน 6 โมลาร ตามดวยน้ํากลั่นจนหมดกรด
2. ตรวจสอบสภาพของทอเทฟลอน ถาหักงอหรืออุดตันควรเปลี่ยนใหม
การประเมนิผล :
เฟสเคลื่อนที่จาก reservoir ไหลเขาสูระบบไดดี ไมมฟีองอากาศ
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 61: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/61.jpg)
การตรวจสอบประสทิธภิาพของคอลัมน
วิธีการ :
เปดระบบเครื่องใหทํางาน ตั้งสภาวะเครื่องมือตามวิธีการที่กําหนดในใบรับรอง
ของคอลัมนฉดีน้ํายาตรวจสอบและคํานวณคา plate number จากโครมาโตแกรมที่ได
การคํานวณ :
คํานวณตามวิธีที่กําหนดมาในใบรับรองของคอลัมนแตละชนิดหรือคํานวณตามสูตร
n = 16 ( t/w )2
เมื่อ t = ระยะทางจากจุดฉีดถึงยอด peak ทีส่นใจ
w = ความกวางของฐาน peak ทีส่นใจ
การประเมินผล :เปรียบเทยีบคา n ของคอลัมนใหมกับคาที่แจงในใบรับรองของบริษัทผูผลิต ไมควร
ต่ํากวารอยละ 10 สําหรับคอลัมนใหม และรอยละ 50 สําหรับคอลัมนเกา ถาคา n สําหรับคอลัมนเกา
ต่ํากวารอยละ 50 ใหทดลองลางคอลัมน ทดสอบประสิทธิภาพอีกครั้ง ถาไมดีขึ้นควรเตรียมสํารองคอลัมน
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 62: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/62.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 63: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/63.jpg)
การทําความสะอาดคอลัมน
วิธีการ :
. เปดเครื่องทํางานตามวิธีการใชเครื่องมือเฉพาะระบบปม
. ตรวจสอบการอุดตันของการดคอลัมนกอน โดยติดตั้งเฉพาะการดคอลัมนเขาระบบ
เพียงอยางเดียว
. เปดเครื่องใหทํางาน สังเกตคาความดันในสภาวะการทํางานปกติ ถาความดนัสูงกวา
ปกติแสดงวามีการอดุตัน ในทํานองเดียวกันใหตรวจสอบกับคอลัมนที่ใชงาน ถาพบวามี
การอุดตันของคอลัมน ใหทําการลางตามวิธีการดังนี้
ติดตั้งคอลัมนเขาระบบในทศิทางกลับกับที่แสดงบนคอลัมน ฉี ด DMSO
ปริมาตร 50-200 μlแลวผานคอลัมนดวย methanol ความเขมขนรอยละ 50 v/v
ไมนอยกวา 30 ml เพื่อชะลางเอาสิ่งสกปรก เชน โปรตีน ไขมัน ออกไป จากนั้นกลับทิศทาง
ของคอลัมนใหอยูในทศิทางเดิม เมื่อเปดระบบใหทํางาน สังเกตคาความดันของระบบ
เปรียบเทียบกับความดนัปกติทีเ่คยใชงาน
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 64: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/64.jpg)
การตรวจสอบประสทิธภิาพของแหลงกําเนิดแสง
ความถี่ : ทุก 3 เดือน ผูดําเนินการ : ผูรับผิดชอบเครื่อง วิธีการ :
. ประสทิธิภาพของระบบตรวจวัดสัญญาณที่ลดต่ําลงอาจเกิดจากความสกปรกของ flow cell
. สําหรบัเครื่องบางรุน ตรวจสอบประสิทธิภาพของหลอดกําเนิดแสงไดโดยตรง จากการอานคา
พลังงานของหลอดกาํเนิดแสง เปรียบเทียบกับคาที่บันทึกไวในคูมือการใชเครื่อง หรือจาก
บันทกึชั่วโมงที่ใชงานของผูใชเอง
. เครื่องที่ไมมีสวนแสดงคาพลังงานของหลอดกําเนิดแสง ใหเปรียบเทียบความสูงของ peak
ของสารชนิดเดียวกันในขณะทําการสอบเทียบกับที่เคยบันทึกไวเมื่อใชหลอดกําเนิดแสงใหม
ในสภาวะของการใชงานเดียวกันหมายเหตุ
เครื่องมือที่มีการปรับเทียบตัวเองอัตโนมัติในระบบตรวจวัดสัญญาณเมื่อเปดเครื่อง
ใชงาน หากการปรับเทยีบไมผาน มักจะมสีาเหตุจากประสทิธภิาพของหลอดกําเนิดแสงต่ํา
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
![Page 65: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/65.jpg)
การสอบเทียบเครื่องการสอบเทียบเครื่อง HPLCHPLC
ที่มาของขอมูล
1. สํานักมาตรฐานหองปฏิบัติการ. การตรวจสอบความถูกตองของเครื่องโครมาโต
กราฟชนิดของเหลวความดันสูง. กรมวิทยาศาสตรการแพทย. 1999
2. Operational Qualification of HPLC. Sithiporn association Co., Ltd
3. Operational Qualification of HPLC. Bara,Windsor & Co.,LTD
4. Operational Qualification of HPLC . Agilent Technologies (Thailand) Ltd
5. Operational Qualification of HPLC. Analytical Technology Co., Ltd
6. Operational Qualification of HPLC. Perkin Elmer (Thailand) Ltd
![Page 66: การสอบเทีียบเครื่ื่อง HPLCHPLCdmsc2.dmsc.moph.go.th/webroot/drug/km/lab_instrument... · 2006-10-02 · การสอบเทีียบเครื่ื่อง](https://reader033.vdocuments.mx/reader033/viewer/2022053014/5f131decc33cec21a775db94/html5/thumbnails/66.jpg)
THANK YOU