A Common Dominant TLR5 Stop Codon Polymorphism

Abolishes Flagellin Signaling and Is Associated with

Susceptibility to Legionnaires’ Disease

Thomas R. Hawn, Annelies Verbon, Kamilla D. Lettinga, Shuying Sue Li, Richard J. Laws, Shawn J. Skerrett,Bruce Beutler, Lea Schroeder, Alex Nachman, Adrian Ozinsky,Kelly D. Smith, and Alan Aderem

Journal of Experimental Medicine vol 198 (10) Nov 2003

INTRODUÇÃO:INTRODUÇÃO:

Pneumonia Pneumonia Legionella pneumophilaLegionella pneumophila

Cepas de Cepas de L. pneumophilaL. pneumophila utilizadas: utilizadas:

1.1. Corby;Corby;

2.2. JR32;JR32;

3.3. Bovenkarspel;Bovenkarspel;

4.4. Knoxville-1; eKnoxville-1; e

5.5. Philadelphia-1Philadelphia-1

A predisposição à doença dos legionários está A predisposição à doença dos legionários está relacionada aos polimorfimos no TLR5 nas células relacionada aos polimorfimos no TLR5 nas células do epitélio pulmonar?do epitélio pulmonar?

TLR5 reconhece flagelina.TLR5 reconhece flagelina.

Os polimorfismos no TLR5:Os polimorfismos no TLR5:1.1. T1846C – F616L- TLR5T1846C – F616L- TLR5RNLRNL 2.2. A1775G – N529S- TLR5A1775G – N529S- TLR5RSFRSF 3.3. C1174T – NSTOPCÓDON- TLR5C1174T – NSTOPCÓDON- TLR5392STOP.392STOP.

4.4. A2523G- K841KA2523G- K841K

MUTAÇÃO DE STOP CÓDON NO TLR5

WESTERN BLOT DE CEL/ CHO TRASNSFECTADAS COM OS POLIMORFISMOS TLR5

RNF RNL RSF STOP

ENSAIO COM NF-ENSAIO COM NF-ккBB LUCIFERASE LUCIFERASE REPOTERREPOTER

CHO HEK293 HEK293

RNF

STOP

RNF

STOP

RNL

RNFRSF

CONTROL

L. Pneumophila ATIVA TLR5 ATRAVÉS DE FLiC

L. Pneumophila ESTIMULA MACRÓFAGOS ATRAVÉS DE MyD88

CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DOS CASOS E CONTROLE

FREQUENCIA GENOTÍPICA DOS TRL5 SNP NOS CASOS E CONTROLE

FREQUÊNCIAS ALÉLICAS E HAPLOTIPICAS DOS TRL5 SNP.

ASSOCIAÇÃO DA LD E TRL5 SNP EM FUMANTES E NÃO FUMANTES

ESTIMULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE CITOCINAS PELA FLiCESTIMULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE CITOCINAS PELA FLiC

FLiC

LPS

A549 A549

WT- L.p

FLaA- L.p

CALU-3CALU-3

FLiC

LPS

WT- L.p

FLaA- L.p

ESTIMULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE CITOCINAS PELA FLiCESTIMULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE CITOCINAS PELA FLiC

SANGUE TOTAL FLiC

LPS

WT- L.p

FLaA- L.p

DISCUSSÃODISCUSSÃO::

FOI DEMONSTRADO QUE UM POLIMORFISMO DE STOP FOI DEMONSTRADO QUE UM POLIMORFISMO DE STOP CÓDON NO TLR5 ESTÁ ASSOCIADO COM A CÓDON NO TLR5 ESTÁ ASSOCIADO COM A SUSCEPTIBILIDADE À INFECÇÕES COM ORGANISMOS SUSCEPTIBILIDADE À INFECÇÕES COM ORGANISMOS FLAGELADOS EM HUMANOS. FLAGELADOS EM HUMANOS.

A INTERAÇÃO FLAGELINA E TLR5 É O PRINCIPAL A INTERAÇÃO FLAGELINA E TLR5 É O PRINCIPAL CONTROLADOR NA PRODUÇÃO DE IL-8 EM CEL/ EPITELIAIS CONTROLADOR NA PRODUÇÃO DE IL-8 EM CEL/ EPITELIAIS PULMONARES ESTIMULADAS PELA PULMONARES ESTIMULADAS PELA L.pneumophilaL.pneumophila..

OS DADOS OBTIDOS SUGEREM DIFERENÇAS CELULAR E OS DADOS OBTIDOS SUGEREM DIFERENÇAS CELULAR E ORGÃO- ESPECÍFICAS NA REGULAÇÃO E FUNÇÃO DE TLR.ORGÃO- ESPECÍFICAS NA REGULAÇÃO E FUNÇÃO DE TLR.

A PRESENÇA DE TL5 SNP/ STOP CÓDON NO DOMÍNIO DE A PRESENÇA DE TL5 SNP/ STOP CÓDON NO DOMÍNIO DE LIGAÇÃO EXTRACELULAR AO CONTRÁRIO DO DOMÍNIO DE LIGAÇÃO EXTRACELULAR AO CONTRÁRIO DO DOMÍNIO DE SINALIZAÇÃO INTRACELULAR SUGERE QUE O EFEITO SINALIZAÇÃO INTRACELULAR SUGERE QUE O EFEITO DOMINANTE OCORRE ATRAVÉS DE UM ÚNICO MECANISMO.DOMINANTE OCORRE ATRAVÉS DE UM ÚNICO MECANISMO.

TLR5 SNP/ STOP CÓDON PODE SE LIGAR À VARIANTE TLR5 SNP/ STOP CÓDON PODE SE LIGAR À VARIANTE NORMAL E INIBIR SUA MONTAGEM CORRETA E SUA NORMAL E INIBIR SUA MONTAGEM CORRETA E SUA LOCALIZAÇÃO.LOCALIZAÇÃO.