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    2/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) : 4 1 8 - 4 2 5 , F e b r u a r y , 1 9 9 8

    E f f e c t s o f Aged F l u o r i d e - c o n t a i n i n gR e s t o r a t i v e M a t e r i a l son R e c u r r e n t R o o t C a r i e sC . - Y . S . H s u , K . J . D o n l y , D . R . D r a k e , a n d J . S . W e f e l *Dows I n s t i t u t e f o r D e n t a l R e s e a r c h , C o l l e g e o f D e n t i s t r y , U n i v e r s i t y o f I o w a , I o w a C i t y , I o w a 5 2 2 4 2 , U S A ; * t o whom c o r r e s p o n d e n c e a n dr e p r i n t r e q u e s t s s h o u l d b e a d d r e s s e d

    A b s t r a c t . A c c u m u l a t e d e v i d e n c e h a s i l l u s t r a t e d t h a ts e c o n d a r y c a r i e s i s t h e m a j o r r e a s o n f o r t h e f a i l u r e o fa m a l g a m a n d r e s i n c o m p o s i t e r e s t o r a t i o n s . T h e p u r p o s e o ft h i s s t u d y was t o a s s e s s t h e c a r i o s t a t i c e f f e c t s o f a g e df l u o r i d e - c o n t a i n i n g r e s t o r a t i v e m a t e r i a l s o n t h e f o r m a t i o n o fs e c o n d a r y r o o t c a r i e s . F i f t y s o u n d human m o l a r s weres e l e c t e d a n d r a n d o m l y a s s i g n e d t o f i v e m a t e r i a l g r o u p s :n o n - f l u o r i d e - c o n t a i n i n g a m a l g a m ( N A ) , f l u o r i d e - c o n t a i n i n ga m a l g a m ( F A ) , n o n - f l u o r i d e - c o n t a i n i n g c o m p o s i t e ( N C ) ,f l u o r i d e - c o n t a i n i n g c o m p o s i t e ( F C ) , a n d g l a s s - i o n o m e rc e m e n t ( G I C ) . A f t e r s t a n d a r d i z e d c l a s s V c a v i t y p r e p a r a -t i o n s a n d p l a c e m e n t o f r e s t o r a t i o n s , t e e t h w i t h i n e a c h g r o u pw e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o t w o s u b g r o u p s , " n o n - a g e d "a n d " a g e d " . The a g e d s u b g r o u p was i m m e r s e d i n ani n o r g a n i c b u f f e r s o l u t i o n f o r 2 wks b e f o r e b e i n gt h e r m o c y c l e d . A f t e r b e i n g t h e r m o c y c l e d a n d s u b j e c t e d t of o u r c y c l e s o f c a r i e s f o r m a t i o n i n a b a c t e r i a l m o d e l s y s t e m ,t h e t e e t h w e r e s e c t i o n e d . D e p t h s o f o u t e r l e s i o n s a n d a r e a so f l e s i o n s o n t h e c a v i t y w a l l s w e r e m e a s u r e d b y p o l a r i z e dl i g h t m i c r o s c o p y . T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e FA a n d G I Cg r o u p s , w h e t h e r a g e d o r n o t , h a d s i g n i f i c a n t l y s m a l l e r o u t e rl e s i o n d e p t h t h a n t h e n o n - f l u o r i d e - c o n t a i n i n g NA a n d NCg r o u p s . A f t e r a g i n g , t h e FA g r o u p d e m o n s t r a t e d s i g n i -f i c a n t l y g r e a t e r l e s i o n d e p t h ( p = 0 . 0 0 0 2 ) , w h i l e t h e GICg r o u p e x h i b i t e d n o s i g n i f i c a n t c h a n g e s i n l e s i o n d e p t h s . T h eNA g r o u p h a d a g r e a t e r w a l l l e s i o n a r e a t h a n t h e NC g r o u p ,w h i l e b o t h d e m o n s t r a t e d n o s i g n i f i c a n t c h a n g e s f o l l o w i n g 2w e e k s o f a g i n g . The FA a n d GI C g r o u p s h a d s i m i l a ri n h i b i t i o n a r e a s a l o n g t h e c a v i t y w a l l s , w h e r e a s b o t h i n h i -b i t i o n a r e a s i n c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y a f t e r t h e a g i n g p r o c e s s . I ti s c o n c l u d e d t h a t t h e f l u o r i d e - c o n t a i n i n g a m a l g a m a n d t h eg l a s s - i o n o m e r c e m e n t , e v e n a f t e r a t w o - w e e k a g i n g p r o c e s s ,c a n s t i l l e l i c i t a s i g n i f i c a n t p r e v e n t i v e e f f e c t o n r e c u r r e n tr o o t c a r i e s i n a n i n v i t r o b a c t e r i a l m o d e l s y s t e m .Key w o r d s : m a t e r i a l s , f l u o r i d e , r o o t c a r i e s , S t r e p t o c o c c u sm u t a n s .

    R e c e i v e d J u l y 2 9 , 1 9 9 6 ; L a s t R e v i s i o n May 7 , 1 9 9 7 ;A c c e p t e d J u n e 7 , 1 9 9 7

    I n t r o d u c t i o nR e c u r r e n t c a r i e s h a s b e e n s h o w n t o b e t h e m o s t i m p o r t a n tf a c t o r i n t h e f a i l u r e o f a m a l g a m a n d c o m p o s i t e r e s t o r a t i o n s( A l l a n , 1 9 7 7 ; M j o r , 1 9 8 1 ; B o y d a n d R i c h a r d s o n , 1 9 8 5 ; Q v i s te t a l . , 1 9 9 0 a , b ; K i d d e t a l . , 1 9 9 2 ) . I t h a s b e e n r e p o r t e d t h a ta p p r o x i m a t e l y h a l f o f a l l r e s t o r a t i v e d e n t i s t r y p r o v i d e d i s i nt h e f o r m o f r e s t o r a t i o n r e p l a c e m e n t s , w h i l e 40% o fr e p l a c e m e n t s a r e a t t r i b u t e d t o r e c u r r e n t c a r i e s ( M a c I n n i s e ta l . , 1 9 9 1 ) . T h e o b s e r v a t i o n o f t h e l o w i n c i d e n c e o f r e c u r r e n tc a r i e s a r o u n d s i l i c a t e r e s t o r a t i o n s , w h i c h c o n t a i n f l u o r i d e ,h a s p r o m p t e d t h e i d e a o f u s i n g f l u o r i d e - c o n t a i n i n g d e n t a lm a t e r i a l s t o p r e v e n t r e c u r r e n t c a r i e s . I n t h e p a s t f e wd e c a d e s , many i n v i t r o s t u d i e s h a v e d e m o n s t r a t e d t h ec a r i o s t a t i c e f f e c t s o f t h e s e f l u o r i d a t e d r e s t o r a t i v e m a t e r i a l s .However, t h e amount o f f l u o r i d e r e l e a s e d f r o m t h o s ef l u o r i d e - c o n t a i n i n g m a t e r i a l s h a s a l s o b e e n shown t od e c r e a s e s i g n i f i c a n t l y w i t h t i m e ( F o r s t e n , 1 9 9 0 ) . T h er e s i d u a l c a r i o s t a t i c e f f e c t , c a u s e d b y " a g e d " f l u o r i d e -c o n t a i n i n g m a t e r i a l s , h a s r e m a i n e d u n c l e a r .

    R e c u r r e n t c a r i e s h a s b e e n c a t e g o r i z e d i n t w o d i m e n s i o n s( K i d d e t a l . , 1 9 9 2 ) , o n e o n t h e t o o t h s u r f a c e a n d t h e o t h era l o n g t h e c a v i t y w a l l t h r o u g h m i c r o l e a k a g e . T h e a d v e n t o fa c i d - e t c h i n g t e c h n i q u e s a n d r e s i n - b a s e d b o n d i n g a g e n t s h a sm i n i m i z e d m i c r o l e a k a g e a t e n a m e l m a r g i n s ; h o w e v e r ,m i c r o l e a k a g e a l o n g t h e r o o t - r e s t o r a t i o n i n t e r f a c e i s s t i l l a nu n s o l v e d p r o b l e m ( M a n d r a s e t a l . , 1 9 9 3 ) .

    S t r e p t o c o c c u s m u t a n s h a s b e e n i d e n t i f i e d a s o n e o f t h em o s t i m p o r t a n t m i c r o - o r g a n i s m s i n t h e e t i o l o g y o f c a r i e s( F i t z g e r a l d a n d K e y e s , 1 9 6 0 ; E m i l s o n a n d K r a s s e , 1 9 8 5 ;L o e s c h e , 1 9 8 6 ) a n d h a s b e e n s u g g e s t e d t o b e o f s i g n i f i c a n c ei n t h e e t i o l o g y o f r e c u r r e n t c a r i e s ( B e n t l e y e t a l . , 1 9 9 0 ;G o n z a l e z - C a b e z a s e t a l . , 1 9 9 5 ) . Ma n y o f t h e c a r i o s t a t i ce f f e c t s o f f l u o r i d e - c o n t a i n i n g m a t e r i a l s h a v e b e e n e v a l u a t e di n c h e m i c a l c a r i e s f o r m a t i o n s y s t e m s w i t h o u t t h e i n v o l v e -ment o f m i c r o - o r g a n i s m s , w h i c h h a v e b e e n u s e d i n o n l y af e w p u b l i s h e d s t u d i e s ( G i l m o u r e t a l . , 1 9 9 0 , 1 9 9 3 ; D e r a n d e ta l . , 1 9 9 1 ) . T h e p u r p o s e o f t h i s s t u d y was t o c o m p a r e t h ec a r i o s t a t i c e f f e c t s o f " a g e d " f l u o r i d e - c o n t a i n i n g r e s t o r a t i v em a t e r i a l s w i t h t h o s e o f n o n - a g e d m a t e r i a l s o n t h e p r e v e n t i o n

    4 1 8by guest on October 30, 2011 For personal use only. No other uses without permission.jdr.sagepub.comDownloaded from

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    D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8r e c u r r e n t r o o t c a r i e s i n ac a r i e s m o d e l s y s t e m .

    and

    and m a t e r i a l se t e e t h u s e d i n t h i s s t u d y

    a l l f r o m r e s i d e n t s o f t h eo f I o w a , U S A , a n d w e r ef r o m o r a l s u r g e o n s

    ho e x t r a c t e d t h e t e e t h f o ro t h e r t h a n f o r t h e

    s t u d y . T h e r e f o r e , t h ef a l l i n t o e x e m p t c a t e g o r y

    a n d t h e human s u b j e c t s 'i s n o t r e q u i r e d .

    m o l a r s i n a 0 . 1 %s o l u t i o n were s e l e c -d i s i n f e c t e d i n a 10% f o r -

    s o l u t i o n f o r 2 w k s , a n di n a 0 . 1 % t h y m o l s o l u -

    A f t e r b e i n g examineda l O X m a g n i f y i n g l e n s ,w i t h v i s i b l e d e f e c ts o r

    l e s i o n s w e r e d i s -The remaining 5 0

    w e r e r a n d o m l y d i v i d e d5 g r o u p s , c o r r e s p o n d i n g

    t h e f i v e d i f f e r e n t r e s t o r a -d e n t a l m a t e r i a l s . T h e s e

    w e r e T y t i n T M ( K e r r ,

    F i g u r e . T h r e e m a j o r p a t t e r n s o f d e m i n e r a l i z a t i o n a l o n g c a v i t y w a l l s e v a l u a t e d w i t h p o l a r i z ed l i g h tm i c r o s c o p y . T h r e e t y p e s o f l e s i o n s a l o n g t h e c a v i t y w a l l c a n b e c a t e g o r i z e d b a s e d o n t h r e e d i f f e r e n td i r e c t i o n s t h a t t h e i n n e r b o r d e r o f d e m i n e r a l i z a t i o n may t a k e t o w a r d t h e c a v i t y w a l l ( t h e DF l i n e ) . I f t h ei n n e r b o r d e r o f t h e d e m i n e r a l i z a t i o n e x t e n d e d s t r a i g h t t o t h e c a v i t y w a l l a t 9 0 ( t h e ABE l i n e ) , t h e l e s i o ne x h i b i t e d " n o e f f e c t " . I f t h e i n n e r b o r d e r o f d e m i n e r a l i z a t i o n c u r v e d u p w a r d ( t h e A BC l i n e ) , t h e l e s i o ne x h i b i t e d a n " i n h i b i t i o n a r e a " ( t h e B CDE a r e a ) . I f t h e i n n e r b o r d e r o f d e m i n e r a l i z a t i o n c u r v e d d o w n w a r d( t h e ABF l i n e ) , t h e l e s i o n e x h i b i t e d a " w a l l l e s i o n " r e p r e s e n t e d b y t h e B E F t r i a n g u l a r a r e a .

    M I , U S A ) , S y n a l l o y f l u o r e T M ( D e n t o r i a , C a c h a n ,Z - l 0 t T M ( 3 M , S t . P a u l , MN, U S A ) , H e l i o m o l a r T MS c h a a n , L i e c h t e n s t e i n ) , a n d V i t r e m e r T M ( 3 M , S t . P a u l ,

    N, USA) ( T a b l e 1 ) . S t a n d a r d C l a s s V p r e p a r a t i o n s w e r e p l a c e db o t h m e s i a l a n d d i s t a l s u r f a c e s o f e a c h t o o t h , w i t h d i m e n -o f 2 mm i n d e p t h , 5 mm i n l e n g t h , a n d 2 mm i n w i d t h

    a b o v e a n d h a l f b e l o w t h e c e m e n t o - e n a m e l j u n c t i o n ) . A l lw e r e p r e p a r e d b y m e a n s o f a h i g h - s p e e d h a n d p i e c e w i t h ab u r i n a n a i r t u r b i n e u n d e r a d e q u a t e w a t e r c o o l i n g . F i v ei n e a c h g r o u p , r a n d o m l y s e l e c t e d a s t h e a g e d s u b g r o u p ,r e s t o r e d w i t h t h e d e n t a l m a t e r i a l s a c c o r d i n g t o manu-

    i n s t r u c t i o n s . T h e d e n t i n b o n d i n g s y s t e m s u s e d i n t h i sa r e s u m m a r i z e d i n T a b l e 2 . A f t e r t h e r e s t o r a t i v e p r o c e -w e r e c o m p l e t e d , t h e f i v e g r o u p s o f t e e t h w e r e s e p a r a t e l yi n t o a n i n o r g a n i c b u f f e r s o l u t i o n ( 2 0 mM NaHCO3, 3

    M NaH2PO4 H 2 0 , a n d 1 mM C a C l 2 2 H 2 0 ) f o r a t w o - w e e kp e r i o d , w i t h t h e s o l u t i o n c h a n g e d e v e r y o t h e r d a y . T h e

    r e m a i n i n g t e e t h i n e a c h g r o u p w e r e r e s t o r e d w i t h t h e s a m ea f t e r t h e a g e d s u b g r o u p s f i n i s h e d t h e a g i n g p r o c e s s .a l l t e e t h w e r e c o v e r e d b y a c i d - r e s i s t a n t n a i l v a r n i s h ,f o r a z o n e a p p r o x i ma t e l y I mm w i d e a r o u n d t h e r e s t o r a -A f t e r t h e n a i l v a r n i s h d r i e d , a l l g r o u p s w e r e s e p a r a t e l yi n 5 5 + 5 C a n d 1 0 + 5 C d i s t i l l e d w a t e r b a t h s f o r

    0 c y c l e s w i t h a 3 2 - s e c o n d d w e l l t i m e i n e a c h b a t h a n d a 1 4 -i n t e r v a l between b a t h s . The g r o u p s t h a t f i n i s h e df i r s t w e r e s t o r e d i n a 100% h u m i d i t y c h a m b e r

    u n t i l a l l g r o u p s c o m p l e t e d t h e t h e r m o c y c l i n g p r o c e d u r e .

    A r t i f i c i a l r e c u r r e n t c a r i e s p r o d u c t i o nS t r e p t o c o c c u s m u t a n s 1 0 4 4 9 ( s e r o t y p e C ) was i n i t i a l l y c u l t u r e d i nT r y p t i c a s e S o y B r o t h s u p p l e m e n t e d w i t h 0 . 5 ' Y , Y e a s t E x t r a c t( T S B - Y E ) a n d i n c u b a t e d o v e r n i g h t i n a 5 K 1 C O 2 i n c u b a t o r a t3 7 C . A 2-mL q u a n t i t y o f t h i s p r i m a r y c u l t u r e was u s e d t oi n o c u l a t e a 250-mL f l a s k c o n t a i n i n g 1 5 0 mL TSB-YEs u p p l e m e n t e d w i t h 1 % g l u c o s e a n d 1 K , s u c r o s e . E a c h s u b g r o u po f f i v e t e e t h was s u s p e n d e d i n t h e medium b y o r t h o d o n t i cw i r e s a t a p p r o x i m a t e l y t h e same l e v e l . E a c h f l a s k was t h e nc o v e r e d b y a n e l a s t i c c u p w i t h o v er l y i n g t i n f o i l a n d i n c u b a t e da t 3 7 C a n d i n 5% C O 2 . M e d i a w e r e c h a n g e d e v e r y 4 8 h r s . A f t e rc o m p l e t i o n o f a t o t a l o f f o u r i n c u b a t i o n c y c l e s , a l l t e e t h w e r er e m o v e d f r o m t h e b a c t e r i a l b r o t h a n d s e p a r a t e l y p u t i n t o a t e s tt u b e c o n t a i n i n g 1 0 mL o f 5 . 0 N s o d i u m h y d r o x i d e (NaOH) t os t o p t h e d e m i n e r a l i z a t i o n p r o c e s s .

    L e s i o n measurement a n d d a t a c o l l e c t i o nWe u s e d a S i l v e r s t o n e - T a y l o r h a r d - t i s s u e m i c r o t o m e ( s e r i e s1 0 0 0 D e l u x e , S c i F a b , L i t t l e t o n , CO) t o c u t e a c h t o o t h t o o b t a i n 3o r 4 s e c t i o n s o f 1 0 0 + 2 0 pm t h i c k n e s s . S e c t i o n s w e r e i m b i b e d i nw a t e r a n d v i e w e d w i t h a p o l a r i z e d l i g h t m i c r o s c o p e . S t a n d a r d35-mm p o l a r i z e d l i g h t p h o t o m i c r o g r a p h s were t a k e n . The

    S e c o n d a r y C a r i e s 4 1 9

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    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8T a b l e 1 . F i v e m a t e r i a l g r o u p s u s e d i n t h i s s t u d yG r o u p A b b r e v i a t i o n B r a n d C o m m e n t s M a n u f a c t u r e rN o n - f l u o r i d e a m a l g a m NA T y t i n H i g h - c o p p e r ; s p h e r i c a l K e r r , R o m u l u s , M I , U S AF l u o r i d e a m a l g a m FA S y n a l l o y f l u o r e 1 % S n F 2 H i g h - c o p p e r D e n t o r i a , C a c h a n , F r a n c eN o n - f l u o r i d e r e s i n c o m p o s i t e NC Z - 1 0 0 C o m b i n e d w i t h 3 M , S t . P a u l , MN, U SA

    S c o t c h b o n d M u l t i - p u r p o s eF l u o r i d e r e s i n c o m p o s i t e FC H e l i o m o l a r 9% Y b F 3 c o m b i n e d V i v a d e n t , S c h a a n ,

    w i t h S y n t a c s y s t e m L i e c h t e n s t e i nG l a s s - i o n o m e r c e m e n t G I C V i t r e m e r F A S a g l a s s 3 M , S t . P a u l , MN, U SA

    w i t h t r i - c u r e s y s t e ma FAS s t a n d s f o r t h e f l u o r o a l u m i n o s i l i c a t e .d e m i n e r a l i z a t i o n a r e a s w e r e m e a s u r e d b y p r o j e c t i o n o f t h e t h e v a r i a n c e s w e r e u n e q u a l , we u s e d t h e K r u s k a l - W a l l i s n o n -p h o t o m i c r o g r a p h s o n t o a s o n i c - d i g i t i z i n g p a d . T h o s e a r e a s p a r a m e t r i c t e s t t o e v a l u a t e s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s among t h e f i v ew e r e t r a c e d b y means o f a d i g i t i z i n g p e n ( G r a f / P e n S o n i c m a t e r i a l g r o u p s , w i t h i n a g e d o r n o n - a g e d s u b g r o u p s . A l l p o s tD i g i t i z e r ; S c i e n c e A c c e s s o r i e s C o r p . , S o u t h p o r t , C T ) o n t o a 2 3 h o c p a i r w i s e c o m p a r i s o n s among t h e f i v e m a t e r i a l g r o u p s w e r emm x 3 4 mm t e m p l a t e . T h e l e s i o n d e p t h a n d a r e a o f e a c h d o n e b y m e a n s o f W i l c o x o n r a n k - s u m t e s t s w i t h a n a l p h a l e v e ls e c t i o n f r o m t h e s a m e l e s i o n w e r e m e a s u r e d , a n d t h e a v e r a g e d o f 0 . 0 0 5 b a s e d o n t h e B o n f e r r o n i c o r r e c t i o n . P a i r e d c o m p a r i s o n sd a t a r e p r e s e n t e d a n o b s e r v a t i o n f o r e a c h l e s i o n . We d e t e r m i n e d b e t w e e n t h e a g e d a n d n o n - a g e d g r o u p s w e r e e v a l u a t e d b yt h e a v e r a g e d d e p t h o f e a c h o u t e r l e s i o n b y m e a s u r i n g a l e s i o n m e a n s o f t h e W i l c o x o n s i g n e d - r a n k t e s t s w i t h a n a l p h a o f 0 . 0 1a r e a o f 2 0 0 pm i n l e n g t h a n d d i v i d i n g i t b y 2 0 0 . T h e w a l l l e s i o n a c c o r d i n g t o t h e B o n f e r r o n i c o r r e c t i o n . F o r t h e i n h i b i t i o n a r e aa r e a o r i n h i b i t i o n a r e a was d e f i n e d b y t h r e e p e r i p h e r a l l i n e s : ( 1 ) a n d t h e w a l l l e s i o n a r e a , a t w o - w a y ANOVA w a s u s e d t o a s s e s st h e v e r t i c a l l i n e r e p r e s e n t i n g t h e c a v i t y w a l l o r t he t o o th - m a t e r i a l a n d a g i n g e f f e c t s w i t h a n a l p h a o f 0 . 0 5 .r e s t o r a t i o n i n t e r f a c e ; ( 2 ) t h e i n n e r b o r d e r o f t h e d e m i n e r a l i -z a t i o n a r e a c u r v i n g down o r u p , a x i a l l y , t o m e e t t h e c a v i t y w a l l ;a n d ( 3 ) t h e i m a g i n a r y l i n e f o l l o w i n g t h e h o r i z o n t a l p o r t i o n o f Resultst h e i n n e r b o r d e r o f t h e d e m i n e r a l i z a t i o n a r e a a n d e x t e n d i n g A f t e r t h e f i r s t 2 4 - h o u r i n c u b a t i o n , t h e c u l t u r e m e d i a b e c a m es t r a i g h t t o t h e c a v i t y w a l l a t 9 0 0 ( F i g . ) . t u r b i d , a n d a t h i n l a y e r o f p l a q u e - l i k e s u b s t a n c e c o v e r e d a l lt h e w i r e s a n d t h e v a r n i s h e d a n d u n v a r n i s h e d t o o t h s u r f a c e s .Under t h e l i g h t m i c r o s c o p e , G r a m s t a i n s r e v e a l e d t h eS t a t i s t i c a l a n a l y s i s a b u n d a n t p r e s e n c e o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n s . D u r i n g t h eF o r t h e o u t e r l e s i o n d e p t h , t h e m e a n a n d v a r i a n c e i n e a c h g r o u p i n c u b a t i o n p e r i o d , t h i s c o v e r i n g s u b s t a n c e c o n t i n u o u s l yw e r e c a l c u l a t e d , a n d t h e i n t e r a c t i o n b e t w e e n t h e m a t e r i a l a n d g r e w t h i c k e r . A t t h e e n d o f t h e i n c u b a t i o n p e r i o d ( 8 d a y s ) ,a g i n g e f f e c t s w e r e a s s e s s e d . S i n c e B a r t l e t t ' s t e s t i n d i c a t e d t h a t t h e t h i c k n e s s o f t h i s l a y e r w a s a p p r o x i m a t e l y 1 mm.T a b l e 2 . D e n t i n b o n d i n g s y s t e m sG r o u p B o n d i n g S y s t e m C o m p o n e n t C o n t e n tNA ( T y t i n ) None None NoneFA ( S y n a l l o y f l u o r e ) None None NoneNC ( Z - 1 0 0 ) S c o t c h b o n d MP E t c h a n t 1 0 % m a l e i c a c i d

    S c o t c h b o n d MP P r i m e r H E M A a / V i t r e b o n d c o p o l y m e rS c o t c h b o n d MP A d h e s i v e H E M A a / B i s - G M A b

    FC ( H e l i o m o l a r ) S y n t a c P r i m e r 4% m a l e i c a c i d / T E G - D M A c / A c e t o n eS y n t a c A d h e s i v e P E G - D M A d / G l u t a r a l d e h y d eH e l i o b o n d B i s - G M A b

    GIC ( V i t r e m e r ) P r i m e r H E M A a / e t h a n o l / V i t r e b o n d c o p o l y m e r / p h o t o i n i t i a t o r sbd

    HEMA = H y d r o x y e t h y l m e t h a c r y l a t e .B i s - G M A : B i s p h e n o l - A g l y c i d y l m e t h a c r y l a t eTEG-DMA: T r i e t h y l e n e g l y c o l d i m e t h a c r y l a t ePEG-DMA: P o l y e t h y l e n e g l y c o l d i m e t h a c r y l a t e

    4 2 0 H s u e t a l .

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    5/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8T a b l e 3 . N u m b e r s o f s e c t i o n s w i t h v a r i o u s t y p e s o f l e s i o n s o n t h e r o o t c aM a t e r i a l S u b g r o u p W a l l L e s i o n I n h i b i t i o n A r e a INA N o n - a g e d 2 4 0

    Aged 2 4 0T o t a l 4 8 ( 9 1 % ) 0 ( 0 % )

    FA N o n - a g e d 0 2 7Aged 0 2 6T o t a l 0 ( 0 % ) 5 3 ( 9 8 % )

    NC N o n - a g e d 1 0 0A g e d 1 6 0T o t a l 2 6 ( 4 6 % ) 0 ( 0 % )

    FC N o n - a g e d 7 5A g e d 1 6 1 0T o t a l 2 3 ( 4 3 % ) 1 5 ( 2 7 % )

    G I C N o n - a g e d 0 2 8A g e d 0 2 7T o t a l 0 ( 0 % ) 5 5 ( 9 8 % )

    H i s t o l o g i c a l f e a t u r e s o f d e m i n e r a l i z a t i o n l e s i o n sI n t h e h i s t o l o g i c a l e v a l u a t i o n o f c a r i e s - l i k e l e s i o n s , o u t e rl e s i o n s v a r y o n l y i n l e s i o n d e p t h , w h i l e t h e l e s i o n s a l o n g t h ec a v i t y w a l l s may v a r y i n s h a p e a s w e l l a s i n s i z e o f t h ed e m i n e r a l i z e d a r e a . T h e F i g . i l l u s t r a t e s t h r e e m a j o r t y p e s o fo b s e r v e d d e m i n e r a l i z a t i o n p a t t e r n s . I n t h e f i r s t p a t t e r n , t h ei n n e r b o r d e r o f d e m i n e r a l i z a t i o n f o l l o w s t h e h o r i z o n t a lo r i e n t a t i o n o f t h e d i s t a l a n d m i d d l e p o r t i o n s o f t h e l e s i o na n d m e e t s t h e c a v i t y w a l l a t a 9 0 0 a n g l e . I f t h e p r o x i m a lp o r t i o n o f t h e i n n e r b o r d e r o f a l e s i o n c u r v e d downward t om e e t t h e c a v i t y w a l l , we c a l l e d t h i s t y p e o f l e s i o n a " w a l ll e s i o n " . I f t h e p r o x i m a l p o r t i o n o f t h e i n n e r b o r d e r r a nupward t o m e e t t h e c a v i t y w a l l , we c a l l e d t h i s w e d g e -s h a p e d r e g i o n a n " i n h i b i t i o n a r e a " . T a b l e 3 l i s t s t h e n u m b e r sa n d t h e p e r c e n t a g e s o f t h e t o o t h s e c t i o n s w i t h v a r i o u s t y p e so f l e s i o n s o n t h e r o o t c a v i t y w a l l s . I t i s i n t e r e s t i n g t h a t t h eFC g r o u p s h o w e d b o t h w a l l l e s i o n s a n d i n h i b i t i o n a r e a s o nt h e i r r o o t c a v i t y w a l l s , w h i l e t h e NA a n d NC g r o u p s n e v e r

    T a b l e 4 . A g i n g e f f e c t s o n r o o t o u t e r l e s i o n d e p t h s ( p m )N o n - a g e d A g e d A g i n g E f f e c t

    M a t e r i a l Mean S D Mean SD p v a l u e aNA 1 2 0 . 9 3 . 7 1 2 9 . 6 1 1 . 5 0 . 0 1 4 0FA 5 2 . 0 3 . 9 7 9 . 9 5 . 4 0 . 0 0 0 2NC 1 4 1 . 8 5 . 8 1 2 1 . 6 6 . 2 0 . 0 0 0 2FC 1 0 3 . 5 3 . 9 1 2 2 . 6 1 5 . 7 0 . 0 0 7 3G I C 1 0 1 . 8 7 . 0 1 0 6 . 0 5 . 8 0 . 1 2 1 2a S t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e o f t h e a g i n g e f f e c t s was e v a l u a t e d b ymeans o f W i l c o x o n s i g n e d - r a n k t e s t s . P v a l u e s t a n d s f o r t h es t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e o f c o m p a r i s o n s b e t w e e n t h e a g e d a n dn o n - a g e d g r o u p s r e s t o r e d w i t h t h e same m a t e r i a l s , c o n s i d e r e ds i g n i f i c a n t when p < 0 . 0 1 .

    [ v i t y w a l l s d e m o n s t r a t e d i n h i b i t i o na r e a s , a n d t h e FA a n d G I GN o E f f e c t T o t a l g r o u p s n e v e r s h o w e d w a l ll e s i o n s . I n 2 8 s e c t i o n s o f t h e

    3 2 7 n o n - a g e d FC g r o u p , 1 62 2 6 s e c t i o n s h a v e n e i t h e r w a l l5 ( 9 % ) 5 3 ( 1 0 0 % ) l e s i o n s n o r i n h i b i t i o n a r e a s ,7 s e c t i o n s showed w a l l1 2 8 l e s i o n s , a n d 5 s e c t i o n s0 2 6 i n h i b i t i o n a r e a s . I n t h e 2 6

    1 ( 2 % ) 5 4 ( 1 0 0 % ) s e c t i o n s o f t h e a g e d FCg r o u p , 1 0 s e c t i o n s demon-1 8 2 8 s t r a t e d i n h i b i t i o n a r e a s a n d1 3 2 9 1 6 w a l l l e s i o n s . T h e n u m b e r3 1 ( 5 4 % ) 5 7 ( 1 0 0 % ) o f s e c t i o n s w i t h b o t h w a l ll e s i o n s a n d i n h i b i t i o n a r e a s1 6 2 8 a p p e a r e d t o b e i n c r e a s e d i n0 2 6 t h e a g e d FC g r o u p . I n t h e1 6 ( 3 0 % ) 5 4 ( 1 0 0 % ) a g e d NC g r o u p , t h e n u m b e ro f s e c t i o n s w i t h " n o e f f e c t "1 2 9 d e c r e a s e d and t h a t o f0 2 7 s e c t i o n s w i t h w a l l l e s i o n s1 ( 2 % ) 5 6 ( 1 0 0 % ) i n c r e a s e d when c o m p a r e dw i t h t h e n o n - a g e d s u b g r o u p .

    The FA a n d G IC g r o u p sb o t h h a d 9 8 % s e c t i o n s e x h i b i t i n g i n h i b i t i o n a r e a s , w h i l e t h eNA g r o u p h a d 9 1 % s e c t i o n s d e m o n s t r a t i n g w a l l l e s i o n s .

    O u t e r l e s i o n sT h e p - v a l u e s o f p a i r w i s e c o m p a r i s o n s b e t w e e n t h e a g e d a n dn o n - a g e d g r o u p s a r e s h o w n i n T a b l e 4 . T h e t w o - w e e k a g i n gp r o c e s s e x h i b i t e d a v a r i a b l e e f f e c t o n d e m i n e r a l i z a t i o n o f a l lg r o u p s ( T a b l e 4 ) . T h e FA a n d FC g r o u p s h a d d e e p e r l e s i o n sa f t e r a g i n g , w h i l e t h e NA a n d G I C g r o u p s e x h i b i t e d n os i g n i f i c a n t c h a n g e . I n t e r e s t i n g l y , t h e n o n - a g e d NC g r o u ph a d d e e p e r l e s i o n s o n t h e r o o t s u r f a c e s a f t e r a g i n g .T h e r a n k i n g s o f t h e o u t e r l e s i o n d e p t h s f o r t h e f i v em a t e r i a l g r o u p s a r e l i s t e d i n T a b l e 5 . T h e o r d e r , f r o m t h ed e e p e s t t o t h e s h a l l o w e s t g r o u p s , i s " N C , NA, F C , G I C , F A "f o r b o t h t h e n o n - a g e d a n d a g e d g r o u p s . T h o s e g r o u p sh a v i n g means o f o u t e r l e s i o n d e p t h t h a t were n o ts t a t i s t i c a l l y d i f f e r e n t f r o m e a c h o t h e r were a s s i g n e d t h e

    T a b l e 5 . M a t e r i a l e f f e c t s o n r o o t o u t e r l e s i o n d e p t h s ( p m )S u b g r o u p N o n - a g e d A g e dM a t e r i a l Mean S D R a n k i n g a Mean S D R a n k i n gNC 1 4 1 . 8 5 . 8 A 1 2 1 . 6 6 . 2 aNA 1 2 0 . 9 3 . 7 B 1 2 9 . 6 1 1 . 5 aFC 1 0 3 . 5 3 . 9 C 1 2 2 . 6 1 5 . 7 a bG I C 1 0 1 . 8 7 . 0 C 1 0 6 . 0 5 . 8 bFA 5 2 . 0 3 . 9 D 7 9 . 9 5 . 4 ca Means o f g r o u p s w h i c h d i d n o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r f r o m e a c ho t h e r were a s s i g n e d t h e same l e t t e r s ( u p p e r c a s e f o r t h e non-a g e d g r o u p s a n d l o w e r c a s e f o r t h e a g e d g r o u p s ) .

    S e c o n d a r y C a r i e s 4 2 1

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    6/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8T a b l e 6 . A r e a o f t h e w a l l l e s i o n o n t h e r o o t s u r f a c e ( p m x p m )M a t e r i a l T r e a t m e n t N Mean S D aNA N o n - a g e d 1 0 2 8 . 3 1 5 . 1NA A g e d 1 0 3 6 . 0 1 6 . 6NC N o n - a g e d 1 0 1 0 . 2 1 4 . 3NC A g e d 1 0 1 9 . 1 2 4 . 9a T w o - w a y ANOVA r e v e a l e d n o s i g n i f i c a n t i n t e r a c t i o n b e t w e e nm a t e r i a l a n d a g i n g e f f e c t s , a s i g n i f i c a n t m a t e r i a l e f f e c t ( p =0 . 0 0 4 5 ) , a n d a n i n s i g n i f i c a n t a g i n g e f f e c t ( p = 0 . 1 6 0 2 ) .

    s a m e r a n k i n g , d e n o t e d b y l e t t e r s i n a d e s c e n d i n g o r d e r . T h ep - v a l u e s i n e a c h p a i r w i s e c o m p a r i s o n were c o n s i d e r e ds t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t when l e s s t h a n 0 . 0 0 5 , a f t e r t h eB o n f e r r o n i c o r r e c t i o n .

    L e s i o n s a l o n g t h e c a v i t y w a l lA s m e n t i o n e d a b o v e , t h e d e m i n e r a l i z a t i o n a l o n g t h e c a v i t yw a l l c a n b e a w a l l l e s i o n , a n i n h i b i t i o n a r e a , o r a s i m p l e " n o -e f f e c t " l e s i o n ( T a b l e 3 ) . S i n c e w e f o u n d no s e c t i o n s i n t h eNA a n d NC g r o u p s d e m o n s t r a t i n g i n h i b i t i o n a r e a s a n d n ow a l l l e s i o n s i n t h e FA a n d GIC g r o u p s , w e c o m p a r e dq u a n t i t a t i v e l y o n l y t h e w a l l l e s i o n s i n t h e NA a n d NCg r o u p s a n d t h e i n h i b i t i o n a r e a s i n t h e FA a n d G I C g r o u p s .T h e t w o - w a y ANOVA t e s t w a s u s e d t o e v a l u a t e t h e m a t e r i a la n d a g i n g e f f e c t s .T h e r o o t w a l l l e s i o n a r e a s m e a s u r e d i n t h e NA a n d NCg r o u p s r e v e a l e d a s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t m a t e r i a l e f f e c t( p = 0 . 0 0 4 5 ) b u t n o t a s i g n i f i c a n t a g i n g e f f e c t ( p = 0 . 1 6 0 2 )( T a b l e 6 ) . T h e r e s u l t s i n d i c a t e d t w o n o t e w o r t h y p o i n t s . F i r s t ,t h e r o o t c a v i t y w a l l s i n t h e NA g r o u p d e m o n s t r a t e d ag r e a t e r w a l l l e s i o n a r e a t h a n t h o s e i n t h e NC g r o u p . S e c o n d ,t h e t w o - w e e k a g i n g p e r i o d r e s u l t e d i n a l a r g e r w a l l l e s i o na r e a i n b o t h t h e NA a n d NC g r o u p s , a l t h o u g h t h e d i f f e r e n c eb e t w e e n t h e a g e d a n d n o n - a g e d s u b g r o u p s d i d n o t r e a c h as t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t l e v e l . T h e i n h i b i t i o n a r e a s m e a s u r e di n r o o t w a l l l e s i o n s o f t h e FA a n d G I C g r o u p s e l u c i d a t e d as i g n i f i c a n t i n c r e a s e o f t h e i n h i b i t i o n a r e a a l o n g t h e c a v i t yw a l l a f t e r a g i n g ( p = 0 . 0 0 0 1 ) , b u t n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c ewas f o u n d b e t w e e n t h e s e t w o m a t e r i a l g r o u p s ( p = 0 . 0 9 2 3 )( T a b l e 7 ) .D i s c u s s i o nI n t h i s s t u d y , d e m i n e r a l i z a t i o n o n t h e o u t e r s u r f a c e sa p p e a r e d t o b e c a u s e d b y a c i d p r o d u c t i o n f r o m S t r e p t o c o c c u sm u t a n s , which c o l o n i z e d t h e t o o t h s u r f a c e , w h i l e t h ed e m i n e r a l i z a t i o n a l o n g t h e c a v i t y w a l l was c a u s e d b y ac o m b i n a t i o n o f t h e p r i m a r y a c i d a t t a c k a n d a n a d d i t i o n a la c i d a t t a c k t h r o u g h m i c r o g a p s b e t w e e n t h e c a v i t y w a l l a n dr e s t o r a t i o n . B o t h t y p e s o f a c i d a t t a c k c a n b e c o u n t e r e d b yc a r i o s t a t i c a g e n t s d e p o s i t e d o n t h e o u t er s u r f a c e s , a t t h ec a v i t y w a l l s , o r i n t h e m i c r o g a p s . I n g e n e r a l , t h e o u t e r l e s i o nd e p t h was m a i n l y a f f e c t e d b y t h e l o c a l c o n c e n t r a t i o n o fc a r i o s t a t i c a g e n t s o n t h e s u r f a c e , w h i l e t h e d e m i n e r a l i z a t i o na l o n g t h e c a v i t y w a l l w a s i n f l u e n c e d b y b o t h t h e c a r i o s t a t i c

    T a b l e 7 . A r e a o f i n h i b i t i o n a r e a s i n l e s i o n s o n r o o t c a v i t y w a l l s( p m x P M )M a t e r i a l T r e a t m e n t N M e a n S D aFA N o n - a g e d 1 0 6 0 . 4 1 9 . 3FA A g e d 1 0 1 1 2 . 8 2 0 . 1G I C N o n - a g e d 1 0 4 8 . 7 2 4 . 8G I C A g e d 1 0 1 0 1 . 1 2 0 . 9a T w o - w a y ANOVA r e v e a l e d n o s i g n i f i c a n t i n t e r a c t i o n b e t w e e nm a t e r i a l a n d a g i n g e f f e c t s , a s i g n i f i c a n t a g i n g e f f e c t ( p =0 . 0 0 0 1 ) , a n d a n i n s i g n i f i c a n t m a t e r i a l e f f e c t ( p = 0 . 0 9 2 3 ) .a g e n t s a n d t h e d e g r e e o f m i c r o l e a k a g e b e t w e e n r e s t o r a t i o n sa n d t o o t h s t r u c t u r e s . I t h a s b e e n p r e v i o u s l y s h o w n t h a t i ft h e r e i s n o m i c r o l e a k a g e , t h e r e w i l l b e n o w a l l l e s i o n( D e r a n d e t a l . , 1 9 9 1 ) . A l t h o u g h n o t t h e o n l y c o n t r i b u t i n gf a c t o r , m i c r o l e a k a g e i s a n e c e s s a r y c o n d i t i o n f o r " w a l ll e s i o n " f o r m a t i o n .

    T h e p r e s e n c e o f c a r i o s t a t i c a g e n t s may r e d u c e o re l i m i n a t e c a r i e s f o r m a t i o n v i a t h e i n h i b i t i o n o f d e m i n e r a l i -z a t i o n a n d / o r b a c t e r i a l a c t i v i t i e s , s u c h a s c o l o n i z a t i o n a n da c i d p r o d u c t i o n . C a r i o s t a t i c a g e n t s i n c l u d e m e r c u r y , s i l v e r ,z i n c , c o p p e r , a n d f l u o r i d e ( 0 r s t a v i k , 1 9 8 5 ; F o r s s e t a l . , 1 9 9 1 ;L y t t l e a n d B o w d e n , 1 9 9 3 ) . Among t h e m , f l u o r i d e i s o n e o ft h e m a j o r c o n t r o l l e d v a r i a b l e s i n t h i s s t u d y .F l u o r i d e e f f e c t sT h e a b i l i t y o f r e s t o r a t i v e m a t e r i a l s t o r e l e a s e f l u o r i d e a n d t h ea b i l i t y o f t h e a d j a c e n t t o o t h s t r u c t u r e t o t a k e u p f l u o r i d e a r eb o t h i m p o r t a n t f a c t o r s i n f l u e n c i n g t h e c a r i o s t a t i c e f f e c t o ff l u o r i d e . V i t r e m e r ( G I C ) c o n t a i n s t h e h i g h e s t p e r c e n t a g e o ff l u o r i d e a n d h a s t h e g r e a t e s t r e l e a s i n g a b i l i t y . N e x t i s t h ef l u o r i d e - c o n t a i n i n g r e s i n c o m p o s i t e ( H e l i o mo l a r ) , w h i l eS y n a l l o y f l u o r e ( F A ) h a s t h e l e a s t f l u o r i d e . H o w e v e r , i na d d i t i o n t o f l u o r i d e , a m a l g a m c o n t a i n s o t h e r c a r i o s t a t i c m e t a li o n s , s u c h a s H g , A g , a n d Z n . A s d e m o n s t r a t e d i n a p r e v i o u ss t u d y , g l a s s - i o n o m e r c e m e n t s r e l e a s e t h e g r e a t e s t a m o u n t o ff l u o r i d e , f o l l o w e d b y t h e f l u o r i d a t e d a m a l g a m g r o u p , w h i c hr e l e a s e d m o r e f l u o r i d e t h a n t h e f l u o r i d a t e d c o m p o s i t e g r o u pi n t h e f i r s t 6 wks ( F o r s t e n , 1 9 9 0 ; U l u k a p i e t a l . , 1 9 9 6 ) .T h e FA g r o u p e x h i b i t e d a s m a l l e r d e m i n e r a l i z e d l e s i o no n t h e o u t e r s u r f a c e c o m p a r e d w i t h t h e NA g r o u p , p r o b a b l yd u e t o f l u o r i d e r e l e a s e ( T a b l e 5 ) . U s i n g a g e l - t y p e c a r i e sf o r m a t i o n s y s t e m , S k a r t v e i t e t a l . ( 1 9 9 1 ) comparedd e m i n e r a l i z a t i o n a d j a c e n t t o S y n a l l o y a n d S y n a l l o y f l u o r er e s t o r a t i o n s . T h e y d e m o n s t r a t e d a s i g n i f i c a n t i n h i b i t i o n o fd e m i n e r a l i z a t i o n i n t h e f l u o r i d a t e d a m a l g a m g r o u p a l o n gt h e c a v i t y w a l l s , b u t n o t o n t h e o u t e r s u r f a c e s , b o t h i n r o o ta n d i n e n a m e l . A p o s s i b l e e x p l a n a t i o n i s t h a t t h e c a v i t y w a l li s c l o s e r t o t h e f l u o r i d e - r e l e a s i n g amalgam a n d a c q u i r e sm o r e f l u o r i d e t h a n t h e o u t e r s u r f a c e ( T v e i t a n d H a l s , 1 9 8 0 ) .I n a p r e v i o u s i n v i t r o s t u d y , we i n v e s t i g a t e d t h e e f f e c t s o f t h esame f i v e r e s t o r a t i v e m a t e r i a l s u s e d i n t h i s s t u d y o nb a c t e r i a l c o l o n i z a t i o n . T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e FA g r o u ph a d a s i g n i f i c a n t l y g r e a t e r i n h i b i t i o n o f c o l o n i z a t i o n t h a n t h eo t h e r m a t e r i a l g r o u p s , i n c l u d i n g t h e NA ( T y t i n ) g r o u p ( H s ue t a l . , 1 9 9 4 ) . I t i s a l s o p o s s i b l e t h a t a c i d p r o d u c t i o n b y

    4 2 2 H s u e t a l .

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    7/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8S t r e p t o c o c c u s m u t a n s may b e i n h i b i t e d b y f l u o r i d e , a s s h o w nb y S e p p a e t a l . ( 1 9 9 2 ) . C o l l e c t i v e l y , t h e n , we s u g g e s t t h ei n v o l v e m e n t o f a t l e a s t t w o p o s s i b l e m e c h a n i s m s i n t h ed e m o n s t r a t e d c a r i o s t a t i c e f f e c t s o f S y n a l l o y f l u o r e o nr e c u r r e n t c a r i e s : i n h i b i t i o n o f d e m i n e r a l i z a t i o n andi n h i b i t i o n o f b a c t e r i a l c o l o n i z a t i o n a n d / o r a c i d p r o d u c t i o n .

    As f o r l e s i o n s o n t h e w a l l , t h e FA g r o u p d e m o n s t r a t e di n h i b i t i o n a r e a s , w h i l e t h e NA g r o u p s h o w e d w a l l l e s i o n s( T a b l e s 6 , 7 ) . T h i s r e s u l t i s i n a g r e e m e n t w i t h t h o s e o f o t h e rs t u d i e s t h a t d e m o n s t r a t e d r e d u c e d d e m i n e r a l i z a t i o n a l o n gt h e c a v i t y w a l l a d j a c e n t t o t h e r e s t o r a t i o n o f S y n a l l o y f l u o r e( S k a r t v e i t e t a l . , 1 9 9 1 ) . B e c a u s e t h e h i g h - c o p p e r T y t i n ( N A )would h a v e a c o r r o s i o n r a t e s i m i l a r t o t h a t o f t h e h i g h -c o p p e r S y n a l l o y f l u o r e ( F A ) , m i c r o l e a k a g e may e x e r t o n l y am i n i m a l i n f l u e n c e o n t h e d i f f e r e n c e i n t h e l e s i o n a l o n g t h ew a l l b e t w e e n t h e NA a n d FA g r o u p s . T h e r e f o r e , f l u o r i d er e l e a s e d f r o m t h e S y n a l l o y f l u o r e ( F A ) s e e m s t o b e t h e m a j o rf a c t o r l e a d i n g t o l e s s d e m i n e r a l i z a t i o n a l o n g t h e c a v i t y w a l li n t h e FA g r o u p t h a n i n t h e NA g r o u p .A c a r i o s t a t i c e f f e c t o f f l u o r i d e - c o n t a i n i n g r e s i nr e s t o r a t i o n s a l o n g c a v i t y w a l l s h a s b e e n e l u c i d a t e d i n o t h e rs t u d i e s ( D i j k m a n a n d A r e n d s , 1 9 9 2 ; R e b i t s k i a n d D o n l y ,1 9 9 3 ) . Compared w i t h t h e NC g r o u p , t h e FC g r o u p h a sd e m o n s t r a t e d a s i g n i f i c a n t l y s m a l l e r o u t e r l e s i o n d e p t hb e f o r e a g i n g , b u t t h e d i f f e r e n c e i n l e s i o n d e p t h b e t w e e nthem became s t a t i s t i c a l l y i n s i g n i f i c a n t a f t e r t h e a g i n gp r o c e s s . T h u s , t h e f l u o r i d e e f f e c t s may d e c r e a s e d u e t o t h ea g i n g p r o c e s s . As f o r l e s i o n s o n c a v i t y w a l l s , s o m e t o o t hs e c t i o n s o f t h e FC g r o u p d e m o n s t r a t e d i n h i b i t i o n z o n e sw h i c h were n o t s e e n a t a l l i n t h o s e o f t h e NC g r o u p .I n t e r e s t i n g l y , some s e c t i o n s s h o w e d i n h i b i t i o n a r e a s , b u to t h e r s , e v e n some b e l o n g i n g t o t h e s a m e t o o t h , e x h i b i t e dw a l l l e s i o n s i n t h e FC g r o u p . F o r t y - t h r e e a n d 46% o f t h es e c t i o n s i n t h e FC a n d NC g r o u p s , r e s p e c t i v e l y , h a d w a l ll e s i o n s ( T a b l e 3 ) . T h i s f i nd i ng s e e m e d t o c o r r o b o r a t e t h eo b s e r v a t i o n t h a t p e r f e c t m a r g i n a l s e a l i n g was n o t o b t a i n e d ,e v e n b y t h e u s e o f n e w - g e n e r a t i o n b o n d i n g a g e n t s ( M a n d r a se t a l . , 1 9 9 3 ) . A n o t h e r p o s s i b l e r e a s o n c o u l d b e t h a t t h ef l u o r i d e - f r e e d e n t i n b o n d i n g s y s t e m m i g h t a d h e r e t o t h ec a v i t y w a l l s o s t r o n g l y t h a t i t , p a r t i a l l y o r c o m p l e t e l y ,i n t e r f e r e d w i t h t h e d i f f u s i o n o f f l u o r i d e f r o m H e l i o m o l a r( F C ) i n t o t h e a d j a c e n t t o o t h s t r u c t u r e . T h i s h y p o t h e s i s h a sb e e n m e n t i o n e d i n o t h e r p u b l i s h e d a r t i c l e s ( K e r b e r a n dD o n l y , 1 9 9 3 ; P r a t i e t a l . , 1 9 9 4 ) .A g i n g e f f e c tM o s t f l u o r i d a t e d r e s t o r a t i v e m a t e r i a l s h a v e b e e n s h o w n t or e l e a s e a s m a l l e r amount o f f l u o r i d e a f t e r a g i n g ( F o r s t e n ,1 9 9 0 ; D i j k m a n e t a l . , 1 9 9 3 ) . I n t h i s s t u d y , we c h a n g e d t h ei n o r g a n i c b u f f e r s o l u t i o n a n d t h e c u l t u r e m e d i a e v e r y o t h e rd a y . The l o o s e l y a t t a c h e d f l u o r i d e , o r o t h e r c a r i o s t a t i ca g e n t s , may b e g r a d u a l l y l o s t d u r i n g media e x c h a n g et h r o u g h t h e w h o l e t w o - w e e k a g i n g p e r i o d . H o w e v e r , t h ef l u o r i d e w h i c h c o n t i n u o u s l y d i f f u s e d i n t o t h e j u x t a p o s e dc a v i t y w a l l may b e c u m u l a t i v e l y i n c o r p o r a t e d i n t o t h ep o r o u s r o o t d e n t i n d u r i n g a n d a f t e r a g i n g .The c o n c e n t r a t i o n o f f l u o r i d e i o n s r e l e a s e d froma m a l g a m d e c r e a s e s d u r i n g t h e a g i n g p r o c e s s ( F o r s t e n , 1 9 9 0 ) ,a s d o t h o s e o f t h e o t h e r c a r i o s t a t i c i o n s m e n t i o n e d

    p r e v i o u s l y ( L y t t l e a n d Bowden, 1 9 9 3 ) . The FA g r o u p ss h o w e d m o r e d e m i n e r a l i z a t i o n o n t h e o u t e r s u r f a c e s a f t e rt h e two-week a g i n g p r o c e s s ( p = 0 . 0 0 0 2 ) and g r e a t e ri n h i b i t i o n a r e a s c o m p a r e d w i t h t h e n o n - a g e d g r o u p s ( p =0 . 0 0 0 1 ) . H o w e v e r , t h e i n c r e a s e i n o u t e r l e s i o n d e p t h s o f t h eNA g r o u p s ( p = 0 . 0 1 4 ) a n d w a l l l e s i o n a r e a s ( p = 0 . 1 6 ) d i dn o t r ea c h t h e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t l e v e l o f o x = 0 . 0 1 a n d0 . 0 5 , r e s p e c t i v e l y . T h e s e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t t h e i n h i b i t o r ye f f e c t s o f t h e m e t a l i o n s o n d e m i n e r a l i z a t i o n i n t h e NAg r o u p a r e i n s i g n i f i c a n t l y o r o n l y s l i g h t l y r e d u c e d a f t e r at w o - w e e k a g i n g p r o c e s s .T h e o u t e r l e s i o n s o f t h e NC a n d FC g r o u p s b o t h c h a n g e da f t e r a g i n g ( p = 0 . 0 0 0 2 a n d 0 . 0 0 7 3 , r e s p e c t i v e l y ) . H o w e v e r ,t h e y a r e i n o p p o s i t e d i r e c t i o n s ( T a b l e 4 ) . T h e d e c r e a s e i n t h el o c a l f l u o r i d e c o n c e n t r a t i o n a f t e r a g i n g i n t h e FC g r o u pc o u l d e x p l a i n t h e f i n d i n g o f d e e p e r l e s i o n s a f t e r a g i n g . I tr e m a i n s u n c l e a r why t h e a g e d NC group e x h i b i t e ds h a l l o w e r l e s i o n s o n t h e o u t e r s u r f a c e s .

    F o r t h e l e s i o n s a l o n g t h e c a v i t y w a l l s , t h e NC g r o u ps h o w e d a g r e a t e r number a n d a r e a o f w a l l l e s i o n s a f t e ra g i n g ; h o w e v e r , i t d i d n o t r e a c h s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e( T a b l e 7 ) . We s p e c u l a t e t h a t t h i s c o u l d b e a t e m p o r a r yb a l a n c e b e t w e e n t h e e f f e c t s o f t h e h y g r o s c o p i c e x p a n s i o nand t h e h y d r o l y t i c d e g r a d a t i o n o n m i c r o l e a k a g e .I n t e r e s t i n g l y , t h e FC g r o u p s h o w e d a n i n c r e a s e d p e r c e n t a g eo f t o o t h s e c t i o n s w i t h b o t h w a l l l e s i o n s a n d i n h i b i t i o n a r e a sa f t e r a g i n g ( T a b l e 3 ) . H y d r o l y t i c d e g r a d a t i o n o f t h e a d h e s i v eb o n d i n g s y s t e m i n t h e FC g r o u p ( S y n t a c ) may r e s u l t i nm i c r o l e a k a g e a n d t h u s e n h a n c e d e m i n e r a l i z a t i o n i n s o m et e e t h b u t may a l s o h a v e f a c i l i t a t e d t h e d i f f u s i o n o f f l u o r i d ef r o m r e s t o r a t i o n s i n t o t h e c a v i t y w a l l s . T h e u l t i m a t eoutcome o f a g i n g e f f e c t s o n d e m i n e r a l i z a t i o n may b ed i c t a t e d b y t h e t o t a l n e t e f f e c t s o f t h e s e t w o f a c t o r s , w h i c hmay i n t e r a c t w i t h e a c h o t h e r . F u r t h e r m o r e , s o m e b o n d i n gb e t w e e n b o n d i n g a g e n t s a n d t o o t h s u r f a c e s may b r e a k a f t e ra g i n g a n d t h e r m a l c y c l i n g p r o c e d u r e s , w h i l e s o m e b o n d i n gmay r e m a i n i n t a c t . E v e n i n t h e s a m e t o o t h s a m p l e , a l b e i t n o to f t e n s e e n , some s e c t i o n s d i d h a v e i n h i b i t i o n a r e a s w h i l eo t h e r s h a d w a l l l e s i o n s . T h e f a c t o r s w h i c h i n f l u e n c e t h eb o n d i n g i n t e g r i t y o f d e n t i n b o n d i n g a g e n t s a t m i c r o s c o p i cl e v e l s w a r r a n t f u r t h e r i n v e s t i g a t i o n .

    I t i s w e l l - a c c e p t e d t h a t t h e f l u o r i d e - r e l e a s i n g a b i l i t y o fG IC d e c r e a s e s w i t h a g i n g . D i f f e r e n t m a t e r i a l s h a v ee x h i b i t e d v a r i o u s a g i n g e f f e c t s o n t h e m a t e r i a l s ' f l u o r i d e -r e l e a s i n g a b i l i t y ( F o r s t e n , 1 9 9 0 ) . C r i m ( 1 9 9 3 ) s h o w e d a g o o dm a r g i n a l a d a p t a t i o n o f o n e l i g h t - a c t i v a t e d G I C ( F u j i I IL C T M ) , e v e n a f t e r t h e s i x - m o n t h a g i n g p r o c e s s . P r a t i e t a l .( 1 9 9 4 ) d e m o n s t r a t e d n o s i g n i f i c a n t i n c r e a s e o f m i c r o l e a k a g ea d j a c e n t t o V i t r e b o n d T M ( 3 M , S t . P a u l , MN, U S A ) a f t e r twom o n t h s . Our f i n d i n g s s u g g e s t t h a t t h e r e a r e n o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s i n o u t e r l e s i o n d e p t h s b e t w e e n t h e G I C - a g e d a n dn o n - a g e d s u b g r o u p s . On t h e c a v i t y w a l l s , t h e i n c r e a s e da c c u m u l a t i o n o f f l u o r i d e d i d e n h a n c e t h e i n h i b i t o r y e f f e c to n d e m i n e r a l i z a t i o n a n d c a u s e d a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e i n t h ei n h i b i t i o n a r e a s a f t e r t h e two-week a g i n g p r o c e s s( p = 0 . 0 0 0 1 ) .M a t e r i a l e f f e c t sI n g e n e r a l , t h e h i g h e r t h e c o n c e n t r a t i o n o f c a r i o s t a t i c a g e n t s ,

    S e c o n d a r y C a r i e s 4 2 3

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    8/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8t h e g r e a t e r t h e p o t e n t i a l c a r i o s t a t i c e f f e c t . I t h a s b e e n r e p o r t e dt h a t t h e r e i s a l i n e a r r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e l o g a r i t h m o f i nv i t r o f l u o r i d e r e l e a s e a n d t h e i n h i b i t o r y e f f e c t on e n a m e ld e m i n e r a l i z a t i o n ( D i j k m a n e t a l . , 1 9 9 3 ) . T h e o u t e r l e s i o nd e p t h s o f t h e f l u o r i d e - c o n t a i n i n g g r o u p s ( G I C a n d F A ) w e r ea l w a y s s m a l l e r t h a n t h o s e o f t h e n o n - f l u o r i d e - c o n t a i n i n gg r o u p s ( N C a n d N A ) . T a b l e 5 s h o w s t h a t t h e o r d e r o f "NC 2NA > FC = G I C > FA" r e m a i n s t h e s a m e f o r o u t e r l e s i o nd e p t h , w h e t h e r a g e d o r n o n - a g e d . I t i s i n t e r e s t i n g t o n o t et h a t t h e " a g e d " N C , NA, a n d F C g r o u p s h a v e n o s t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e n t h e i r o u t e r l e s i o n d e p t h s .T h i s may b e d u e t o t h e d e c r e a s e d a v a i l a b i l i t y o f c a r i o s t a t i ca g e n t s o n t h e r o o t s u r f a c e s a f t e r t h e a g i n g p r o c e s s i n t h e NAa n d F C g r o u p s . T h e r e a r e t w o p o s s i b l e r e a s o n s why t h e FAg r o u p s h a d s m a l l e r o u t e r l e s i o n s t h a n t h e G I C g r o u p s . T h ef i r s t i s t h e p o t e n t i a l s y n e r g i s t i c c a r i o s t a t i c e f f e c t s o f f l u o r i d ea n d o t h e r m e t a l i o n s i n a m a l g a m . A n o t h e r p o s s i b i l i t y i s t h a tt h e l a r g e r m i c r o l e a k a g e i n t h e FA g r o u p , c o m p a r e d w i t ht h a t o f t h e G I C g r o u p , may f a c i l i t a t e t h e l e a k i n g o u t o f t h o s ec a r i o s t a t i c a g e n t s . T h e c o m p a r a b l e i n h i b i t i o n a r e a s a l o n g t h ec a v i t y w a l l i n t h e FA a n d G I C g r o u p s , a g e d o r n o t , seemp o t e n t i a l l y t o s u p p o r t b o t h p o s s i b i l i t i e s . R e c e n t l y , t h ep r o p e r t i e s o f G I C s t o t a k e up a n d r e l e a s e f l u o r i d e h a v e b e e ns u b s t a n t i a t e d ( C r e a n o r e t a l . , 1 9 9 4 ) . T h e r e f o r e , i n t h e o r a lc a v i t y o f a n i n d i v i d u a l who f r e q u e n t l y u s e s f l u o r i d ep r o d u c t s ( e . g . , t o o t h p a s t e ) , t h e l o n g - t e r m c a r i o s t a t i c e f f e c t so f G I C s o n a d j a c e n t t o o t h s t r u c t u r e s may t r a n s c e n d t h o s e o ft h e FA r e s t o r a t i o n s .E x p e r i m e n t a l d e s i g n sS i n c e t h e c a v i t y v a r n i s h h a s b e e n shown t o b e q u i c k l yw a s h e d away i n t h e c l i n i c a l s i t u a t i o n a r o u n d a m a l g a mr e s t o r a t i o n s , and t h e s e a l i n g e f f e c t i s o n l y t e m p o r a r y( D u t t o n e t a l . , 1 9 9 3 ) , we c h o s e n o t t o a p p l y c a v i t y v a r n i s h i no u r a m a l g a m g r o u p s . T h e f r e q u e n t p r e s e n c e o f w a l l l e s i o n si n t h e NA g r o u p s a n d i n h i b i t i o n a r e a s i n t h e FA g r o u p ss e e m e d t o s u p p o r t t h e c o n c e p t t h a t s e a l i n g c a p a c i t y i s n o ti m p o r t a n t e n o u g h t o o u t w e i g h t h e a d v a n t a g e o f a r e l e a s e o fi n c o r p o r a t e d f l u o r i d e f r o m a m a l g a m r e s t o r a t i o n s i n t e r m s o ft h e d e v e l o p m e n t a n d r a p i d i t y o f t h e s e c o n d a r y c a r i e s a t t a c ki n a s h o r t - t e r m e x p e r i m e n t ( H e i n t z e a n d M 0 r n s t a d , 1 9 8 0 ) .R e g a r d i n g t h e G I C r e s t o r a t i o n s , t h e mean g a p s b e t w e e n t h eG I C a n d d e n t i n h a v e b e e n r e p o r t e d t o b e a b o u t 8 t o 1 0 pm( S i d h u , 1 9 9 4 ) . T h e f a c t t h a t t h e p r e d o m i n a n t t y p e ( 9 8 % ) o fs e c t i o n i n t h e G I C g r o u p d e mo n s t r a t e d i n h i b i t i o n z o n e s i ns p i t e o f t h e m i c r o g a p s s e e m s t o s u b s t a n t i a t e t h e a f o r e -m e n t i o n e d n o t i o n a s w e l l ( H e i n t z e a n d M 0 r n s t a d , 1 9 8 0 ) .A l t h o u g h v a r i o u s f l u o r i d a t e d m a t e r i a l s h a v e d i f f e r e n tr a t e s a n d d u r a t i o n s o f f l u o r i d e r e l e a s e , m o s t o f t h e m a j o rf l u o r i d e r e l e a s e u s u a l l y t a k e s p l a c e i n t h e f i r s t d a y o r w e e k .T h i s h o l d s t r u e f o r f l u o r i d a t e d a m a l g a m ( F a z z i e t a l . , 1 9 7 7 ;S h a n n o n a n d M i l l e r , 1 9 8 0 ) , f l u o r i d a t e d r e s i n c o m p o s i t e( S w i f t , 1 9 8 9 ; U l u k a p i e t a l . , 1 9 9 6 ) , and g l a s s - i o n o m e rcements ( D i a z - A r n o l d e t a l . , 1 9 9 5 ; Musa e t a l . , 1 9 9 6 ) .A l t h o u g h we r e c o g n i z e t h a t amalgam c o r r o s i o n p r o d u c t smay n o t b e p r e s e n t , we u s e d a t w o - w e e k a g i n g p e r i o d t oc i r c u m v e n t t h e i n i t i a l b u r s t o f f l u o r i d e r e l e a s e . S i n c e t h i ss t u d y i n d i c a t e d a s i g n i f i c a n t c a r i o s t a t i c e f f e c t o f g l a s s -i o n o m e r c e m e n t s a n d f l u o r i d a t e d a m a l g a m r e s t o r a t i o n s o n

    t h e a d j a c e n t r o o t s t r u c t u r e a f t e r 2 w k s , t h e r e w o u l d b e s o m ev a l u e f o r f u r t h e r s t u d i e s w i t h a l o n g e r a n d m o r e v i g o r o u sa g i n g s c h e m e f o r b e t t e r s i m u l a t i o n o f t h e o r a l c o n d i t i o n .A c k n o w l e d g m e n t sT h e a u t h o r s would l i k e t o t h a n k T i n g - r u H su f o r h e rs t a t i s t i c a l a s s i s t a n c e . T h i s i n v e s t i g a t i o n was f i n a n c i a l l ys u p p o r t e d i n p a r t b y R e s e a r c h G r a n t s P 5 0 D E - 1 1 1 3 4 f r o mt h e N a t i o n a l I n s t i t u t e o f D e n t a l R e s e a r c h , N a t i o n a l I n s t i t u t e so f H e a l t h , B e t h e s d a , MD 2 0 8 9 2 .

    R e f e r e n c e sA l l a n DN ( 1 9 7 7 ) . A l o n g i t u d i n a l s t u d y o f d e n t a l r e s t o r a t i o n s . B r

    D e n t J 1 4 3 : 8 7 - 8 9 .B e n t l e y C D , B r o d e r i u s C A , D r a k e CW, C r a w f o r d J J ( 1 9 9 0 ) .R e l a t i o n s h i p b e t w e e n s a l i v a r y l e v e l s o f m u t a n s s t r e p t o -c o c c i a n d r e s t o r a t i o n l o n g e v i t y . C a r i e s R e s 2 4 : 2 9 8 - 3 0 0 .B o y d MA, R i c h a r d s o n A S ( 1 9 8 5 ) . F r e q u e n c y o f amalgamr e p l a c e m e n t i n g e n e r a l d e n t a l p r a c t i c e . C a n D e n t A s s o c J5 1 : 7 6 3 - 7 6 6 .C r e a n o r S L , C a r r u t h e r s L M , S a u n d e r s W P , S t r a n g R , F o y e R H( 1 9 9 4 ) . F l u o r i d e u p t a k e a n d r e l e a s e c h a r a c t e r i s t i c s o f g l a s s -

    i o n o m e r c e m e n t s . C a r i e s R e s 2 8 : 3 2 2 - 3 2 8 .C r i m G A ( 1 9 9 3 ) . E f f e c t o f a g i n g o n m i c r o l e a k a g e o f r e s t o r a t i v es y s t e m s . A m J D e n t 6 : 1 9 2 - 1 9 4 .D e r a n d T , B i r k h e d D , E d w a r d s s o n S ( 1 9 9 1 ) . S e c o n d a r y c a r i e s

    r e l a t e d t o v a r i o u s m a r g i n a l g a p s a r o u n d amalgamr e s t o r a t i o n i n v i t r o . S w e d D e n t J 1 5 : 1 3 3 - 1 3 8 .D i a z - A r n o l d AM, H o l m e s D C , W i s t r o m DW, S w i f t E J J r ( 1 9 9 5 ) .

    S h o r t - t e r m f l u o r i d e r e l e a s e / u p t a k e o f g l a s s ionomerr e s t o r a t i v e s . D e n t Ma t 1 1 : 9 6 - 1 0 1 .D i j k m a n G E , A r e n d s J ( 1 9 9 2 ) . S e c o n d a r y c a r i e s i n s i t u a r o u n df l u o r i d e r e l e a s i n g l i g h t - c u r i n g c o m p o s i t e s : A q u a n t i t a t i v em o d e l i n v e s t i g a t i o n o n f o u r m a t e r i a l s w i t h a f l u o r i d e

    c o n t e n t b e t w e e n 0 a n d 2 6 v o l % . C a r i e s R e s 2 6 : 3 5 1 - 3 5 7 .D i j k m a n G E , d e V r i e s J , L o d d i n g A , A r e n d s J ( 1 9 9 3 ) . L o n g - t e r mf l u o r i d e r e l e a s e o f v i s i b l e l i g h t - a c t i v a t e d c o m p o s i t e s i nv i t r o : A c o r r e l a t i o n w i t h i n s i t u d e m i n e r a l i z a t i o n d a t a .C a r i e s R e s 2 7 : 1 1 7 - 1 2 3 .D u t t o n F B , S u m m i t t J B , C h a n C N , G a r c i a - G o d o y F ( 1 9 9 3 ) . E f f e c to f a r e s i n l i n i n g a n d r e b o n d i n g o n t h e m a r g i n a l l e a k a g e o fa m a l g a m r e s t o r a t i o n s . 7 D e n t 2 1 : 5 2 - 5 6 .E m i l s o n C G , K r a s s e B ( 1 9 8 5 ) . S u p p o r t f o r a n d i m p l i c a t i o n s o ft h e s p e c i f i c p l a q u e h y p o t h e s i s . S c a n d J D e n t R e s 9 3 : 9 6 - 1 0 4 .F a z z i R , V i e i r a D F , Z u c a s SM ( 1 9 7 7 ) . F l u o r i d e r e l e a s e a n d

    p h y s i c a l p r o p e r t i e s o f a f l u o r i d e - c o n t a i n i n g a m a l g a m . JP r o s t h e t D e n t 3 8 : 5 2 6 - 5 3 1 .F i t z g e r a l d R J , K e y e s P H ( 1 9 6 0 ) . D e m o n s t r a t i o n o f t h e e t i o l o g i cr o l e o f S t r e p t o c o c c i i n e x p e r i m e n t a l c a r i e s i n t h e h a m s t e r . JA m D e n t A s s o c 6 1 : 9 - 1 9 .F o r s s H , J o k i n e n J , S p e t s - H a p p o n e n S , S e p p a L , Luoma H( 1 9 9 1 ) . F l u o r i d e a n d m u t a n s S t r e p t o c o c c i i n p l a q u e g r o w t h

    on g l a s s i o n o m e r a n d c o m p o s i t e . C a r i e s R e s 2 5 : 4 5 4 - 4 5 8 .F o r s t e n L ( 1 9 9 0 ) . S h o r t - a n d l o n g - t e r m f l u o r i d e r e l e a s e f r o m

    g l a s s i o n o m e r s a n d o t h e r f l u o r i d e - c o n t a i n i n g f i l l i n gm a t e r i a l s i n v i t r o . S c a n d J D e n t R e s 9 8 : 1 7 9 - 1 8 5 .Gilmour SM, E d mu n d s DH , D u m m e r PM ( 1 9 9 0 ) . The

    4 2 4 H s u e t a l .

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    9/9

    J D e n t R e s 7 7 ( 2 ) 1 9 9 8p r o d u c t i o n o f s e c o n d a r y c a r i e s - l i k e l e s i o n s o n c a v i t y w a l l sa n d t h e a s s e s s m e n t o f m i c r o l e a k a g e u s i n g a n i n v i t r om i c r o b i a l c a r i e s s y s t e m . I O r a l R e h a b i l 1 7 : 5 7 3 - 5 7 8 .

    G i l m o u r A S , Edmunds DH , Newcombe R G , C l a r k MF ( 1 9 9 3 ) .A n i n v i t r o s t u d y i n t o t h e e f f e c t o f a b a c t e r i a l a r t i f i c i a l c a r i e ss y s t e m o n t h e e n a m e l a d j a c e n t t o c o m p o s i t e a n d a m a l g a mr e s t o r a t i o n s . C a r i e s R e s 2 7 : 1 6 9 - 1 7 5 .G o n z a l e z - C a b e z a s C , L i Y , N o b l i t t TW, G r e g o r y R L , K a f r a w yAH , S t o o k e y GK ( 1 9 9 5 ) . D e t e c t i o n o f m u t a n s S t r e p t o c o c c ii n s e c o n d a r y c a r i o u s l e s i o n s u s i n g i m m u n o f l u o r e s c e n tt e c h n i q u e s a n d c o n f o c a l l a s e r s c a n n i n g m i c r o s c o p y . C a r i e sR e s 2 9 : 1 9 8 - 2 0 3 .

    H e i n t z e U , M o r n s t a d H ( 1 9 8 0 ) . A r t i f i c i a l c a r i e s - l i k e l e s i o n sa r o u n d c o n v e n t i o n a l , f l u o r i d e - c o n t a i n i n g a n d d i s p e r s e da m a l g a m s . C a r i e s R e s 1 4 : 4 1 4 - 4 2 1 .

    Hsu C Y , W e f e l J S , D r a k e D R , D o n l y K J ( 1 9 9 4 ) . C o l o n i z a t i o n o fd e n t a l m a t e r i a l s b y S t r e p t o c o c c u s m u t a n s ( a b s t r a c t ) . J D e n tR e s 7 3 ( S p e c I s s ) : 4 1 7 .

    K e r b e r L J , D o n l y K J ( 1 9 9 3 ) . C a r i e s i n h i b i t i o n b y f l u o r i d e -r e l e a s i n g p r i m e r s . A m J D e n t 6 : 2 1 6 - 2 1 8 .K i d d E A , T o f f e n e t t i F , M j o r I A ( 1 9 9 2 ) . S e c o n d a r y c a r i e s . I n t D e n t1 4 2 : 1 2 7 - 1 3 8 .L o e s c h e WJ ( 1 9 8 6 ) . R o l e o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n s i n human d e n t a ld e c a y . M i c r o b i o l R e v 5 0 : 3 5 3 - 3 8 0 .L y t t l e H A, Bowden GH ( 1 9 9 3 ) . T h e l e v e l o f m e r c u r y i n humand e n t a l p l a q u e a n d i n t e r a c t i o n i n v i t r o b e t w e e n b i o f i l m s o f

    S t r e p t o c o c c u s m u t a n s a n d d e n t a l a m a l g a m . J D e n t R e s7 2 : 1 3 2 0 - 1 3 2 4 .Mandras R S , R e t i e f DH , R u s s e l l CM ( 1 9 9 3 ) . Q u a n t i t a t i v e

    m i c r o l e a k a g e o f s i x d e n t i n b o n d i n g s y s t e m s . A m J D e n t6 : 1 1 9 - 1 2 2 .M a c l n n i s WA , I s m a i l A , B r o g a n H ( 1 9 9 1 ) . P l a c e m e n t a n d

    r e p l a c e m e n t o f r e s t o r a t i o n s i n a m i l i t a r y p o p u l a t i o n . C a nD e n t A s s o c J 5 7 : 2 2 7 - 2 3 1 .M j o r I A ( 1 9 8 1 ) . P l a c e m e n t a n d r e p l a c e m e n t o f r e s t o r a t i o n s . O p e rD e n t 6 : 4 9 - 5 4 .

    Musa A , P e a r s o n G J , G e l b i e r M ( 1 9 9 6 ) . I n v i t r o i n v e s t i g a t i o n o f

    f l u o r i d e i o n r e l e a s e f r o m f o u r r e s i n - m o d i f i e d g l a s sp o l y a l k e n o a t e c e m e n t s . B i o m a t e r i a l s 1 7 : 1 0 1 9 - 1 0 2 3 .

    0 r s t a v i k D ( 1 9 8 5 ) . A n t i b a c t e r i a l p r o p e r t i e s o f a n d e l e m e n tr e l e a s e f r o m s o m e d e n t a l a m a l g a m s . A c t a O d o n t o l S c a n d4 3 : 2 3 1 - 2 3 9 .P r a t i C , T a o L , S i m p s o n M , P a s h l e y DH ( 1 9 9 4 ) . P e r m e a b i l i t ya n d m i c r o l e a k a g e o f C l a s s I I r e s i n c o m p o s i t e r e s t o r a t i o n s . ID e n t 2 2 : 4 9 - 5 6 .

    Q v i s t J , Q v i s t V , M j o r I A ( 1 9 9 0 a ) . P l a c e m e n t a n d l o n g e v i t y o famalgam r e s t o r a t i o n s i n D e n m a r k . A c t a O d o n t o l S c a n d4 8 : 2 9 7 - 3 0 3 .Q v i s t V , Q v i s t J , M j o r I A ( 1 9 9 0 b ) . P l a c e m e n t a n d l o n g e v i t y o ft o o t h - c o l o r e d r e s t o r a t i o n s i n D e n m a r k . A c t a O d o n t o l S c a n d4 8 : 3 0 5 - 3 1 1 .R e b i t s k i G , D o n l y K J ( 1 9 9 3 ) . D e n t i n p r e t r e a t m e n t a n d c a r i e si n h i b i t i o n b y a f l u o r i d e - r e l e a s i n g r e s i n . A m I D e n t 6 : 2 0 4 -2 0 6 .S e p p a L , T o r p p a - S a a r i n e n E , Luoma H ( 1 9 9 2 ) . E f f e c t o f d i f f e r e n tg l a s s i o n o m e r s o n t h e a c i d p r o d u c t i o n a n d e l e c t r o l y t e

    m e t a b o l i s m o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n s I n g b r i t t . C a r i e s R e s2 6 : 4 3 4 - 4 3 8 .S h a n n o n I L , M i l l e r J T ( 1 9 8 0 ) . F l u o r i d e s u p p l e m e n t e d d e n t a l

    a m a l g a m . O p e r D e n t 5 : 1 1 - 1 3 .S i d h u SK ( 1 9 9 4 ) . M a r g i n a l c o n t r a c t i o n g a p f o r m a t i o n o f l i g h t -

    c u r e d g l a s s i o n o m e r s . A m J D e n t 7 : 1 1 5 - 1 1 8 .S k a r t v e i t L , W e f e l J S , E k s t r a n d J ( 1 9 9 1 ) . E f f e c t o f f l u o r i d ea m a l g a m s o n a r t i f i c i a l r e c u r r e n t e n a m e l a n d r o o t c a r i e s .

    S c a n d J D e n t R e s 9 9 : 2 8 7 - 2 9 4 .S w i f t E J J r ( 1 9 8 9 ) . F l u o r i d e r e l e a s e f r o m two c o m p o s i t e r e s i n s .Q u i n t e s s e n c e I n t 2 0 : 8 9 5 - 8 9 7 .T v e i t A B , H a l s E ( 1 9 8 0 ) . I n h i b i t o r y e f f e c t o f a f l u o r i d e -

    c o n t a i n i n g a m a l g a m o n d e v e l o p m e n t o f c a v i t y w a l l l e s i o n si n v i t r o . A c t a O d o n t o l S c a n d 3 8 : 2 9 - 3 9 .

    U l u k a p i H , B e n d e r l i Y , S o y m a n M ( 1 9 9 6 ) . D e t e r m i n a t i o n o ff l u o r i d e r e l e a s e f r o m l i g h t - c u r e d g l a s s - i o n o m e r s a n d af l u o r i d a t e d c o m p o s i t e r e s i n f r o m t h e v i e w p o i n t o f c u r i n gt i m e . J O r a l R e h a b i l 2 3 : 1 9 7 - 2 0 1 .

    S e c o n d a r y C a r i e s 4 2 5

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