1 de 83Buenas Prcticas paraLaboratorios Nacionales de Control Farmacutico Anexo 3 informe 36, 2002VALIDACIN DE MTODOS ANALTICOSwww.who.int/medicines/publications/pharmprep/en2 de 83ObjetivosIntroducir los conceptos de : Desarrollo del protocolo Calificacin de instrumento Procedimiento analtico Extensin de la validacin Transferencia de mtodos Validacin de ensayos qumicos, fsicos,biolgicos y microbiolgicosValidacin3 de 83La validacin de un mtodo analtico es el proceso por el cual se establece, mediante estudios de laboratorio, que las caractersticas de desempeo del mtodo cumplen con los requisitos para las aplicaciones analticas previstas.USP 31NF 26, Captulo General Validacin de mtodos farmacopicosQu es validacin?4 de 83La validacin de mtodos, es el proceso por el cual se demuestra que los procedimientos analticos son aptos para el uso indicado.FDA draft guidance Analytical Procedures and Methods Validation5 de 83Cul es el objetivo de la validacin?El objetivo de la validacin de un procedimiento analtico es demostrar que es apto para el propsito indicado.ICH Guideline Q2A Text on Validationof Analytical Procedures6 de 83ICH Q2(R1) Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology Documento principal (parmetros de validacin necesarios, caractersticas que deben ser consideradas): etapa 5, Oct 94E UE: Adoptado por CPMP, publicado como CPMP/ICH/381/95.E FDA: Registro Federal, volumen 60, N. 40, 1de marzo, 1995, pginas 11260-11262 Addendum (datos experimentales requeridos, interpretacin estadstica): etapa 5, Nov 1995E UE: Adoptado por CPMP, publicado como CPMP/ICH/281/95E FDA: Registro Federal, volumen 62, N. 96, 19 de mayo, 1997, pginas 27463-27467http://www.ich.org/cache/compo/276-254-1.htmlCaractersticas Analticas tpicas en la validacin Linealidad Especificidad Limite de Deteccin Lmite de cuantificacin Precisin Exactitud7 de 838 de 83Componentes de calidad de datos analticosVerificacin del CC (calibracin, materiales de referencia)`Calificacin de los instrumentos analticosValidacin de los mtodos analticosPruebas de aptitud del sistema9 de 83Componentes del Proceso de validacinFase IQ/OQ(IQ)(OQ/PV)Etapa de calificacinCiclo de vida del equipoNecesidad de validacinPapel y responsabilidadUsuario del mtodoSoporte tcnicoInstrumento MtodoFaseDQFase PQCalificacin del desempeoCalificacin del diseo y desarrollo del mtodo(DQ)Calificacin de La instalacin(IQ)Calificacin de la operacin(OQ) (PQ)PrepararDefinirDisearInstalar Funcionar OperarAnalista, equipo instrumental y mtodo10 de 83 Por qu es necesaria la validacin analtica? Cul es el propsito de la validacin analtica?Mtodos confiablesValidacinMtodos reproduciblesEtapas de ValidacinSitio delSuplidorValidacinEstructural ySoftwareISO 9000Sitio de UsoFuncionalCualificacinIQ OQ PQSitio de UsoCalibracin,MantenimientoPruebas deEjecutoriaAntes de Comprar Antes de Usar Durante Uso11 de 8312 de 83CundoValidar ?El mtodo analtico debe estar normalizadoantes de iniciar el procesode validacin 13 de 83Etapas para desarrollar un mtodo analticoPrctico : tiempo, recursosIdneo: preciso, exacto1Encontrar las condiciones ptimasDEFINIR LAS CONDICIONESEl equipoLos reactivosEl muestreo2 2VALIDAR43 3EStANDARIZAR EL METODO14 de 83La validacin de procedimientos analticos requiere: Instrumentos calificados y calibrados Mtodos documentados Patrones de referencia confiables Analistas calificados Integridad de la muestraValidacin de mtodos analticosDocumentados15 de 83Plan maestro de validacin debe incluir: Val i daci n de Mt odos Anal t i cosCal i braci nMoni t or eo Mi cr obi ol gi co yFsi co-Qumi coMant eni mi ent oCal i f i caci n de Per sonalCal i f i caci n de Pr oveedor esBuenas Pr ct i cas de Labor at or i oI nspecci ones I nt er nas16 de 83Protocolo de validacin para mtodo analtico debe especificar: El propsito y el alcance Responsabilidades y competencias del equipo de trabajo Mtodo de ensayo normalizado y documentado (los pasos del mtodo no pueden ser modificados durante la validacin)Validacin de mtodos analticos17 de 83Protocolos de validacin Lista de materiales y equipos Las caractersticas de desempeo que se evaluarn (especificidad, linealidad, etc) y el Procedimiento para evaluarlas. experimentos para cada parmetro) Anlisis estadstico o frmulas Criterio de aceptacin para cada parmetro de desempeo (los criterios de aceptacin no pueden ser cambiados para ajustarse a los datos)18 de 83Calificacin del instrumento Marca, modelo y manual del fabricante Modificaciones Calificacin de la instalacin y de la operacin Programas de calibracin Cronogramas de mantenimientoValidacin de mtodos analticos19 de 83 Clase A: Para establecer identidad Clase B: Para detectar y cuantificar impurezas Clase C: Para determinar cuantitativamente la concentracin Clase D: Para evaluar las caractersticas, disolucin, uniformidad de contenidoDiferentes clases de ensayos analticosClasificacin OMS (Inf. 32, Anexo 5 Validacin de mtodos analticos)20 de 83* Se puede permitir un grado de desviacinCaractersticaAIdentificacinB lmite cuantitativaBlmitecualitativaCCuantitativas producto terminadoDcaractersticasExactitud X X X*PrecisinX X XRobustez XXX X XLinealidad e intervalo X X XEspecificidad selectividad X X X X XLmite de deteccin XLmite de cuantificacin XParmetros requeridos para la Validacin OMSCategoras A,B,C,D segn OMS, La USP las clasifica comocategora I, II, III, IVX21 de 83Parmetros requeridos para la Validacin USP 31Caractersticas de Desempeo analticoCategora I de valoracinProd.Termi.Graneles, conservanteCategora II de valoracin Categora III de valoracin (caractersticas de desempeo, disolucin)Categora IV de valoracin (pruebas de identificacin)Prueba de lmiteCuantitativa (impurezas en frmacos)Prueba de lmiteCualitativa (metales pesados, etc.)Exactitud SI SI* * NOPrecisin SI SINO SI NOEspecificidad SI SI SI* SILmite de deteccin NO NO SI* NOLmite de cuantificacinNO SINO * NOLinealidad SI SINO * NOIntervalo SI SI* * NO* Puede ser requerido dependiendo de la naturaleza de la prueba especfica22 de 83 Mtodos nuevos requieren validacin completa Mtodos de Farmacopea requieren validacin parcial (o verificacin) Cambios significativos implican revalidacin parcialE cambios de equipoE cambios de frmulaE cambios de proveedores de reactivos crticosExtensin de la validacin23 de 83Transferencia de mtodos analticos Protocolo y procedimiento del mtodo detransferencia E precisinE exactitudE Robustez Mtodo cientfico escrito y aprobado Verificacin de la competencia Aceptacin formal por el nuevo laboratorio24 de 83Caractersticas generales de desempeo- Linealidad- Intervalo- Lmites de deteccin- Lmites de cuantificacin-Exactitud-Precisin-Especificidad (USP 31 ) Selectividad (ICH)ReproducibilidadTolerancia, fortaleza o resistencia. USP 31RobustezAptitud del sistema25 de 83ESPECIFICIDAD y SELECTIVIDADICH Q2A y USP 31 (United States Pharmacopeia): La capacidad de evaluar en forma inequvoca al analito en presencia de los componentes cuya presencia cabra esperar, tales como impurezas, productos de degradacin y componentes de la matriz. La falta de especificidad de un procedimiento analtico individual puede compensarse mediante otros procedimientos analticos de apoyo.La IUPAC, AOAC prefieren el trmino selectividad26 de 83Especificidad y Selectividad Se utiliza en :E Identificacin: garantizar la identidad del analitoE Pruebas de pureza: declaracin exacta del contenido de impurezas de un analito (sustancias relacionadas, metales pesados, disolventes residuales, etc.)E Valoracin: un resultado exacto que permite la declaracin exacta del contenido o potencia del analito en la muestraE En anlisis cualitativos: Debe tener la capacidad de distinguir compuestos de estructura estrechamente relacionada (productos de degradacin)USP 3127 de 83caso 1 Productos relacionadosMuestra del frmaco XXEnantimero estndarEspecificidad (USP 29 ) Selectividad (ICH)28 de 83Muestra del frmaco XX bajo condiciones forzadas-Especificidad (USP 31 ) Selectividad (ICH)caso 1 Productos de degradacin29 de 83En un procedimiento analtico para impurezas, la especificidad se puede establecer: Si se dispone de impurezas la especificidad puede establecerse por adicin.E Se agregan cantidades conocidas (del frmaco o producto farmacutico) con niveles adecuados de impurezas y/o excipientes Comparacin con muestras sin agregado de cantidades conocidas El resultado de la valoracin no se ve afectado por la presencia de estos materiales: un resultado exacto que permite la declaracin exacta del contenido o la potencia del analito en una muestra(Mtodo compendial 1225 USP 31)30 de 83Pruebas de valoracin y de impurezas Si no se dispone de impurezas o de los productos de degradacin puede demostrarse la especificidad:E Comparando los resultados de las pruebas de muestras que contengan impurezas o productos de degradacin con los de un segundo procedimiento bien caracterizado. (Mtodo compendial 1225 USP 31)EspecificidadDegradaciones forzadas relevantes31 de 83Condiciones Forzadas Relevantes caso 2EProducto farmacuticocalorluzhumedad (85%)Hidrlisis cida y alcalinaOxidacinEn algunos casos, pueden ser vlidas otras condicionesEl tiempo de exposicin, la temperatura y la concentracin pueden ajustarse para obtener una degradacin adecuada de la muestra.Mtodo compendial 1225 USP 3132 de 83caso 2 Cromatograma del diluyenteNo se observan picos en los tiempos de retencin del componente principal y las impurezas.33 de 83caso 2 Cromatograma de la solucin estndarLas impurezas conocidas deben estar separadas entre s y del pico principal (Resolucin 1,5)34 de 83caso 2Cromatograma de la muestra NO sometida a condiciones forzadas de degradacin35 de 83caso 2Cromatograma de la muestra sometida a condiciones forzadas: los productos de degradacin estn separados del pico principal, R 1,536 de 83 Lmite de Cuantificacin Lmite de Deteccin Relacin de Seal a RuidoLdeD, LdeC y RSR37 de 83LMITE DE DETECCIN USP 31 : la menor cantidad de analito que puede detectarse en una muestra, aunque no necesariamente cuantificarse, bajo las condiciones del experimento indicadas.As, las pruebas de lmite confirman simplemente que la cantidad de analito se encuentra por encima o por debajo de un cierto nivel.El LD es una caracterstica de las pruebas lmiteLa ICH cuando hay ruido de fondo recomienda queel clculo del LD puede realizarse con un valor con el cual la relacin entre seal y ruido (S/R) es 2:1 3:1.38 de 83Determinacin del LD: No instrumental Mtodos no instrumentales:anlisis de muestras con concentraciones conocidas de analitos para establecer la concentracin mnima a la cual el analito puede detectarse de manera confiable.Ejemplos:TLC, valoraciones volumtricas, comparaciones de colores39 de 83Determinacin del LD: instrumental Mtodos instrumentales:igual que para los mtodos no instrumentalesanlisis de muestras con concentraciones conocidas de analitos para establecer la concentracin mnima a la cual el analito puede detectarse en forma confiable.Cuando hay ruido de fondo la ICH sugiere una relacin seal ruido aceptable de 2:1 3:140 de 83Estimacin del LD (ICH)LD = 3,3 /mdonde: = desviacin estndar (ruido) de la respuestam = pendiente de la curva de calibracin paralinealidadEl LD puede basarse en cualquiera de los siguientes:- del blanco- del punto de linealidad de nivel ms bajo- el grfico de calibracin (regresin)Otro enfoque sugiere la determinacin de la pendiente de la curva de calibracin y la desviacin estndar de las respuestas.41 de 83Ejemplos de pruebas de lmites (validacin del LD) Pruebas de comparacin del color (metales pesados ) Mtodos TLC (impurezas comunes ) Mtodos de precipitacin (prueba de plomo en la monografa sobre xido de zinc)42 de 83ruidoPico A LdDPico B LdCLnea basalRelacin entre seal y ruidoCromatograma que muestra el ruido de lnea base43 de 83Desviacin estndar del blancoEjemplo: Integracin de un pico cromatogrficoInyeccin estndarInyeccin blanco44 de 83LMITE DE CUANTIFICACIN La menor cantidad de analito en una muestra que puede determinarse con precisin y exactitud aceptables bajo las condiciones del experimento establecidas. USP 31 En esencia, idntico a ICH Q2A Lmite de cuantificacin (LC) = lmite de cuantificacin (LOQ)45 de 83Determinacin/Validacin del LC No instrumental:a partir del anlisis de muestras con un nivel adecuado mnimo de analito cuantificado con exactitud y precisin aceptables. Instrumental:igual que para los mtodos no instrumentales, ms el hecho de que el clculo del LC puede realizarse con un valor con el cual la relacin entre seal y ruido es 10:1.USP 31 (1225)46 de 83Ejemplos de valoraciones cuantitativas (validacin del LC) Mtodos de valoracin volumtrica (agua ) Mtodos HPLC/GC (pureza cromatogrfica) Mtodos gravimtricos (prdida por secado )47 de 83INTERVALO El intervalo de un mtodo analtico es la amplitud entre los niveles superior e inferior del analito (incluidos estos niveles) que se demostr que se determin con un nivel adecuado de precisin, exactitud y linealidad, utilizando el mtodo segn se describe en el protocolo.USP 31 48 de 83LINEALIDAD La linealidad de un mtodo analtico es su capacidad para obtener resultados de prueba que sean proporcionales ya sea directamente, o por medio de una transformacin matemtica bien definida, a la concentracin de analito en muestras en un intervalo dado.USP 3149 de 83Evaluacin de linealidad Debe utilizarse un mnimo de 5 puntos de datos para una evaluacin adecuada Inspeccin visual del grfico y mtodo estadstico (lnea de regresin, mnimos cuadrados)50 de 83Consideraciones de linealidad e intervalo para el protocolo de validacin Los criterios de aceptacin deben equilibrar el rigor cientfico con las limitaciones prcticas Linealidad: E Valor r2mnimo: 0,99 hasta 0,9999E Interseccin-y: estadsticamente no significativa, dentro del n % de la respuesta de la solucin estndarE Apto para la valoracin mediante un estndar de un solo punto Intervalo: necesario para resultados exactos y precisos51 de 83Linealidad e intervalo0.010.0100.0150.0200.0250.0300.0350.0400.015 0.02 0.03 0.035 0.04Linealidadde un analito en un materialMaterial de referencia mg/mlAnalito calculado en mg/ml0.0250,0155 20.01503 0.0200 0,020740.0250 0.025650.0300 0.029860.0400 0.0401Tabla de valores (x,y)x yMaterial de referencia mg/mlMaterial dereferencia mg/ml1 0.0100 0.0101#52 de 83Estadstica de linealidadUna vez realizada la curvahacer el tratamiento estadstico aplicando el principio de la linealidad:y = a y = a +bx+bxa= y a= y --bxbxEcuacin de la lnea recta: (xi(xi--x)(yix)(yi--y)y)(xi(xi--x)x)b =Taller153 de 83 Intercepto(a) -0.00056 Lmite de Linealidad e Intervalo 0.005 0.040 mg/ml Pendiente (b) 0,988857Coeficiente de correlacin ( r )E Pearson 0.99952E Coeficiente de determinacin (r2) =99,90% Desviacin estndar relativa (CV%) del procedimiento 1,37%Estadstica de linealidadEl test del coeficiente de los factores de respuesta menor del 5% indica linealidad .AEFI 200154 de 83El grfico muestra que el modelo ajustado corresponde a un modelo lineal que describe la relacin entre lo esperado y lo obtenido y que responde a una lnea recta y que permite hacer predicciones sobre otros valores corregidosy =0,00056+ 0,988857*xComo elP-value en la tabla ANOVA es menor que 0.01, existe una relacin estadsticamente significativa entre la concentracin del material de referencia y el resultado obtenido sobre las soluciones, aun nivel de confianza del 99% .The R-Squared estadstico indica que el modelo ajustado explica el 99,90% de la variabilidad en los resultados obtenidos. Elcoeficiente de correlacin igual a 0,99952, indica una relacin muy fuerte entre las variables. El error estndar estimado, de los residuales, muestra una desviacin estndar de 0,00038099.Este valor puede ser usado para construir lmites de prediccin para nuevas observaciones. Comentarios con relacin a los datos ANOVA55 de 830 0,05 0,1 0,15 0,2Concentracin RespuestaInterseccin-y/x = pendiente y = residualxyAnlisis de regresin Interseccin-y, pendiente y residuales56 de 83 Exactitud Precisin Repetibilidad ReproducibilidadCaractersticas de losprocedimientos analticos57 de 83Relacin entre exactitud y precisininexacto e imprecisoExacto peroimprecisoExacto y precisoinexactoprecisopero58 de 83Exactitud Calculado como el porcentaje de analito recuperado o por la diferencia entre el valor obtenido y el valor realevaluado estadsticamente59 de 83Exactitud 5 maneras de determinar la exactitudE Prueba de un Estndar de ReferenciaE Mezcla con excipientes (placebo con una cantidad agregada conocida)E Agregado de estndar (muestra con cantidad agregada conocida)E Se deduce a partir de los datos de especificidad y linealidad.E Comparacin con un mtodo reconocido como exacto (mtodo de referencia)60 de 83PRECISIN El grado de coincidencia entre los resultados de las muestras individuales de una muestra homognea La precisin debe evaluarse a travs del intervalo de cuantificacin especificado en el mtodo61 de 83Precisin comparada con exactitud La exactitud se expresa como % de recuperacin La precisin se expresa como Desviacin Estndar Relativa (RSD) 62 de 83Precisin Determinacin:E Valoracin de las muestras individuales de una preparacin homogneaE Calcular la desviacin estndar o la desviacin estndar relativa La precisin del mtodo debe incluir todas las fuentes de variacin desde la preparacin de la muestra hasta el redondeo del resultado final de la prueba63 de 83Niveles de precisin ICH-USP Repetibilidad: coincidencia dentro de un periodo corto para el mismo analista con la misma instrumentacin Precisin intermedia: coincidencia en los resultados del mismo laboratorio, pero en das distintos con analistas y equipo diferentes(segn corresponda) Reproducibilidad: coincidencia en los resultados entre laboratorios (como en un estudio colaborativo).64 de 83Precisin Repetibilidad (5 inyecciones repetidas)E Lmite de valoracin (%) % RSD mxima99,0 101,0 0,37 198,5 101,50,55 198,0 102,0 0,73 195,0 105,0 1,9 290,0 110,0 3,9 2Impurezas5 a 25 2- dependiendo del nivel1 Pharmaeuropa, 11(4), 571-5772 Pharm. Technol., 6(9), 120-137DER = Desviacin estndar Relativa (RSD)65 de 83Precisin Precisin intermedia:E La FDA recomienda un mnimo de 2 das distintos con analistas diferentes.E FDA (CDER), Gua del revisor: Validacin de mtodos cromatogrficos, nov. 1994E Criterios de aceptacin: Realizar la prueba-F, los resultados intralaboratorios no deben ser estadsticamente distintos. Tpicamente, alrededor de 2 veces la s o el CV% de la repetibilidadSin embargo, una diferencia estadstica puede no ser significativa (consideracin prctica). Necesidad de evaluar la aptitud para la indicacin de los mtodos66 de 83 Variabilidad causada por :E Variaciones de da a daE De analista a analistaE De laboratorio a laboratorioE De instrumento a instrumentoE De columna cromatogrfica a columna cromatogrficaE De estuche de reactivos a estuche de reactivosE Inestabilidad de los reactivos analticosTOLERANCIA, FORTALEZALa tolerancia es el grado de REPRODUCIBILIDAD del mtodo analtico, en diversas condiciones:ICH PRECISIN INTERMEDIA67 de 83ROBUSTEZ La USP 31 la define como una medida de la capacidad del mtodo analtico, y demuestra que no resulta afectado por pequeas pero deliberadas variaciones en los parmetros del mtodo y proporciona una indicacin de su confiabilidad durante su uso normal.TRANSFRENCIA DE MTODOSAPTITUD DEL SISTEMA Si las mediciones son susceptibles a variaciones en condiciones analticas, stas deben controlarse adecuadamente o incluirse en el mtodo una declaracin preventiva.68 de 83Las pruebas de aptitud del sistema se basan en el concepto que el equipo, el sistema electrnico, las operaciones analticas y las muestras aanalizarconstituyen un sistema integral que puede evaluarse como tal.USP 31 (621)Las inyecciones repetidas de una preparacin estndar empleada en la valoracin u otra solucin estndar se comparan para determinar si cumplen con los requisitos de precisin.APTITUD DEL SISTEMA69 de 83R = ( N) ( - 1 / ) ( k / k + 1 )E f i c i e n c i aS e l e c t i v i d a dC a p a c i d a dResolucin R cuando se tiene mas de un analitoUSP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMA A menos que se especifique algo diferente en la monografa individual, se emplean los datos de cinco inyecciones repetidas del analito para calcular la desviacin estndar relativa s, si el requisito es 2% o menos. Se emplean los datos de seis inyecciones repetidas si el requisito de s es ms de 2%. Las inyecciones repetidas de una preparacin estndar empleada en la valoracin u otra solucin estndar se comparan para determinar si cumplen con los requisitos de precisin.70 de 83USP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMA El factor de asimetraT, es una medida de la asimetra del pico, es la unidad para los picos perfectamente simtricos y su valor aumenta a medida que la asimetra es ms pronunciada. En algunos casos, pueden observarse valores menores a la unidad A medida que laasimetradel pico aumenta, la integracin y por lo tanto la precisin se tornan menos confiables. 71 de 83USP 31 (621)Estas pruebas se realizan mediante la recoleccin de datos de inyecciones repetidas del estndar u otras soluciones, segn se especifique en al monografa individualAPTITUD DEL SISTEMA Aunque una monografa especifique los parmetros definitivos que se deben utilizar, esto no impide utilizar otras condicionesoperativas adecuadas y puede ser necesario realizar ajustes en las condiciones operativas, para cumplir con los requisitos de aptitud del sistema. A menos que se especifique algo diferente en la monografa, los parmetros de aptitud del sistema se determinan a partir del pico del analito. 72 de 83USP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMA Sepermiteajustesslocuandoseencuentrandisponibles estndaresadecuados,(incluyendolosdereferencia),de todosloscomponentesusadosenlapruebadeaptituddel sistema y slo cuando estos estndares sean los usados para demostrarquelosajusteshanmejoradolacalidaddela cromatografaencuantoalosrequisitosdecumplimientode aptitud del sistema . Mltiplesajustespuedentenerunefectoacumulativoenel desempeodelsistemaydebenconsiderarseantesde implementarlos.73 de 83USP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMASe puede considerar cada una de las siguientes variaciones mximas, a menos que la monografa indique algo diferente. pH de la fase mvil 0,2 unidades Concentracin de la solucin amortiguadoras : se permite 10% siempre y cuando conserve lavariacin de pHRelacin de los componentes de la fase mvil: c10% absoluto y 30% relativoLongitud de onda del UV-visible:Error permitido mximo del detector 3 nmLongitud de la columna puede ajustarse hasta el 70%Dimetro interno CG, HPLC 25% Longitud de la columna de HPLC 50%74 de 83USP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMA HPLC tamao de partcula puede reducirsehasta 50% CG Tamao de la partcula conserva el cociente de intervalo entre la ms grande y la ms pequea Velocidad de flujo puede ajustarse hasta 50% Volumen de inyeccin reducirse hasta los LD , LC y precisin aceptados Temperatura de la columna puede ajustarse hasta 10% Temperatura de horno puede ajustarse hasta 10% Programa de Temperatura horno CG hasta 20% A MENOS QUE SE ESPECIFIQUE OTRA COSA los parmetros de aptitud del sistema se determinan a partir del pico del analito.75 de 83USP 31 (621)APTITUD DEL SISTEMA Los tiempos de retencin relativos son slo informativos, facilitan la identificacin de los picos. Para determinar la eficacia del sistema operativo final, se lo debe someter a una prueba de aptitud. Las inyecciones repetidas de la preparacin estndar requeridas para demostrar que la precisin del sistema es adecuada , pueden realizarse antes de inyectar las muestras o intercalarse entrelas inyecciones de las muestras. Se debe demostrar la aptitud del sistema durantetoda la corrida mediante inyecciones de unapreparacin control adecuada a intervalos apropiados, incluso al final del anlisis.76 de 83APTITUD DEL SISTEMA La preparacin control puede ser una preparacin estndar o una solucin que contenga una cantidad conocida, y cualquier otro material adicional til para el control del sistema analtico. Como por ejemplo impurezas o excipientes. Siempre que haya un cambio significativo en el equipo o en un reactivo crtico, la prueba de aptitud debe realizarse antes de inyectar las muestras, Ningn anlisis de muestras es aceptable a menos que cumpla los requisitos de aptitud del sistema. Los anlisis de muestras obtenidos cuando el sistema no cumple con la condicin de aptitud es inaceptable.77 de 83Verificacin de procedimientos farmacopicosLos usuarios de los procedimientos analticos farmacopicos nonecesitanvalidarestos procedimientoscuandolosusanporprimera vez,auncuandodebeestablecerevidencias documentadasdeaptitudenlascondiciones reales,FDAestableci esterequisitoenel punto21CFR211.194a2. Severificar la aptituddetodoslosmtodosdeprueba usados bajo las condiciones reales de uso .No incluye los microbiolgicos78 de 83Verificacin de procedimientos farmacopicosEL PROCESO DE VERIFICACION,da confianza en que losprocedimientos se llevan a cabo con la aptitud requeridaSi la verificacin no es exitosa y la consulta y asistencia del personal USP,no logra solucionar el problema, se puede concluir que el procedimiento posiblemente, no es apto para usar en el artculo que se est evaluando en el laboratorio y entonces se hace necesario validar el mtodo analtico.79 de 83USP 31 (1226)Verificacin de procedimientos farmacopicosEvaluar la complejidad del procedimiento y del material sometido a anlisis. Se usan algunas de lascaractersticas del desempeo analtico, las que se consideren adecuadas, la extensin depende de la formacin y competencia del analista, el tipo de procedimiento, el equipo e instrumentos asociados, los pasos especficos del procedimiento y el artculo, por ejemplo exactitud por las diferentes matrices. LD y LCUSP 31 (1226)80 de 83REQUISITOS DE LA VERIFICACION81 de 83Reporte de ValidacinOObjetivo y alcance del mtodo, aplicabilidadOTipo de analito y la matriz sobre la que se hizo la validacin, ODetalles del analito, reactivos, estndares de referencia y control y estabilidad de las muestras preparadas.OProcedimiento para la verificacin de la calidad de los estndares y reactivos qumicos usados OCondiciones de seguridad82 de 83OListado de equipos, funcionamiento, condiciones de desempeo. IQ,OQ,PQ ODetalle de las condiciones y cmo fue realizado el proceso, incluyendo la preparacin de la muestraGTratatamiento estadstico y clculos realizados Procedimientos de control rutinarioOParmetros crticos establecidos a travs del test de robustezOParmetros del mtodo11 11Reporte de Validacin83 de 83Resultados de la incertidumbre de la medicinCriterios para revalidacinPersona que desarroll y valid el mtodo inicialmenteResumen y conclusionestest de aceptacin de las variablesRegistros como cromatogramas, espectros y curvas de calibracin17 1712 1213 1314 1415 1516 16Reporte de Validacin