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サンプル調製 タンパク質サンプル調製 2 タンパク質抽出 3 タンパク質分離改善 4 タンパク質分画 6 タンパク質サンプルの濃縮と除去 10 核酸サンプル調製 13 RNA精製 13 DNA精製 15 DNAクリーンアップ 16

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Page 1: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

サンプル調製

タンパク質サンプル調製 2タンパク質抽出 3タンパク質分離改善 4タンパク質分画 6タンパク質サンプルの濃縮と除去 10

核酸サンプル調製 13RNA精製 13DNA精製 15DNAクリーンアップ 16

Page 2: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製  www.bio-rad.com/proteinsampleprep

タンパク質サンプル調製タンパク質サンプル調製は、サンプルタイプ毎に方法が異なる他、次の実験ステップに最適な手法や条件が必要であるなど様々です。バイオ・ラッドは、タンパク質の抽出、精製、分画、濃縮のために最適化した様々なキットや試薬、抽出やクリーンナップ、濃縮を行う装置を提供します。

●● 物質の化学的特性に基づいた分離・分画。

●● クロマトグラフィーの原理に基づいた分離・分画。

●● 電気泳動の原理に基づいた分離・分画。

目的に応じた最適な試薬を、下記サンプル調製セレクションガイドを参考にお選びください。

サンプル調製キットセレクションガイド

抽出 / 分離改善 Fractionation by: サンプル調製濃縮

高含有量タンパク質除去

Cell lysis/Totalタンパク質抽出

夾雑物の除去

脱塩 ダイナミックレンジ縮小

アルブミン /IgGの除去

界面活性剤、フェノール化合物、脂質の除去

再酸化防止 細胞内局在 溶解度 分子量 電荷 等電点

ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Total Protein)

ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Cytoplasmic/Nuclear)

ReadyPrepサンプル

プレパレーションキット

モデル491プレップセル /ミニプレップセル

ProteoMinerタンパク質EnrichmentKits

マイクロロトフォア、ロトフォア、ミニロトフォア

Aurum AEX/CEX Miniキット

Aurum血清

タンパク質Miniキット

AurumアフィゲルブルーMiniキット

ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Membrane Ⅰ)

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Soluble/Insoluble)

ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Total Protein)

ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Membrane Ⅱ)

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Signal)

ReadyPrep2-D

クリーンアップキット

ReadyPrep2-D

クリーンアップキット

ReadyPrep還元

アルキル化キット

バイオスピン /マイクロバイオスピンカラム

ReadyPrepミニグラインダー

マイクロロトフォアlysisキット

Bio-Plex Celllysisキット

2 サンプル調製

Page 3: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質抽出www.bio-rad.com/proteinsampleprep

タンパク質抽出細胞溶解や抽出キット、グラインダーなどを利用し、培養細胞や組織などからタンパク質を効率的に抽出することができます。

ReadyPrep™ タンパク質抽出キット(Total Protein)

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Total●Protein)は、様々な生体サンプルからタンパク質抽出物を調製するための簡単かつ迅速で再現性のある方法を提供します。このキットの使用により、IEFや2次元ゲル電気泳動などの様々な用途に直接適用できるタンパク質サンプルが得られます

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinextraction

キットの内容構成品 組成 容量

Total Protein2-D●Rehydration●Buffer●1●TBP

7M●ウレア、2M●チオウレア、1%(w/v)ASB-14、40mM●Tris、0.001%●BPB●200mM●TBP

10ml×2バイアル0.6ml

Cell lysisキット

マイクロロトフォア™ lysisキットサンプルに含まれる多種多様なタンパクを分離・分画することで、低含量タンパク質の検出が可能になります。このための1つの方法として、等電点電気泳動によるサンプルの分画が効果的です。2.5mlの小規模な液相等電点電気泳動にはマイクロロトフォアが使用でき、そのためのサンプル調製にはマイクロロトフォアlysisキットが便利です。本キットは簡単にサンプルタイプに応じたキットが利用できます。

●● 哺乳類細胞、植物細胞、酵母、バクテリアのサンプルごとに最適化した専用キット。●● マイクロロトフォア以外の用途(SDS-PAGE、2-D)にも利用可能。●● 抽出後、バッファー交換せずに、すぐにマイクロロトフォアでの分画が可能。

Bio-Plex® Cell lysisキットBio-Plex●Cell●lysisキットは、特に、Bio-Plexリン酸化タンパク質アッセイ/トータルターゲットアッセイ用の培養細胞や組織抽出物を調製するために開発されています。このCell● lysisキットを使用して、ウェスタンブロット解析用の抽出液を調製することもできます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinextraction and /bioplexcelllysis Request or download bulletins: 3033, 3034, and 5517

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格163-2086 ReadyPrep タンパク質抽出キット(Total Protein) ¥22,000

マイクロロトフォアlysisキット

See Also

マイクロロトフォア:●P.188●プロティアンi12●IEFシステム:●P.175プロテインアッセイ:●P.20

See Also

Bio-Plex:●P.310

Bio-Plex●Cell●lysisキット

サンプル調製 3

Page 4: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

ReadyPrep™ ミニグラインダーReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサンプル粉砕用チューブには、粉砕用の樹脂と粉砕棒が含まれます。粉砕用樹脂は伸張性の微粒子からなる中性の研磨剤で、タンパク質や核酸を吸着しません。ReadyPrepミニグラインダーはディスポーサブル製品で、ヌクレアーゼフリー、プロテアーゼフリーの製品です。マイクロロトフォアlysisキット(Mammal)には含まれます。

●● 組織サンプル等の小規模抽出に便利。●● 粉砕用の樹脂が組織を効率的に粉砕します。●● ほとんどのベンチトップ型遠心器が利用できます。

タンパク質分離改善クリーンアップキットやカラムを用いることで塩やその他のコンタミナントを除去できます。

ReadyPrepミニグラインダー

タンパク質サンプル調製タンパク質分離改善 www.bio-rad.com/proteinsampleprep

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存マイクロロトフォアlysisキット163-2141 マイクロロトフォアlysisキット(Mammal) ¥41,000 4℃

15回用:タンパク質可溶化用バッファー(50ml)、ReadyPrep●mini●grinder●20本163-2142 マイクロロトフォアlysisキット(Plant) ¥61,000 4℃

10回用:タンパク質可溶化用バッファー(50ml)、ReadyPrep●2-Dクリーンアップキット163-2143 マイクロロトフォアlysisキット(Yeast) ¥56,000 4℃

15回用:タンパク質可溶化用バッファー(50ml)、酵母懸濁バッファー(15ml)、lyticase(0.5ml×2:1.5U/μl)

163-2144 マイクロロトフォアlysisキット(Bacteria) ¥56,000 4℃15回用:タンパク質可溶化用バッファー(50ml)、バクテリア懸濁バッファー(25ml)、lysozyme(1ml:1,500U/μl)

163-2146 ReadyPrepミニグラインダー(20回用) ¥21,000 室温サンプル調製用キット171-304011 Bio-Plex Cell Lysisキット(96well×1回分) ¥25,000 -20℃171-304011B03 Bio-Plex Cell Lysisキット(96well×3回分) ¥60,000 -20℃171-304012 Bio-Plex Cell Lysisキット(96well×10回分) ¥130,000 -20℃

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteincleanup Request or download bulletins: 2934 and 2961

Protein Sample Cleanup Kit Selection GuideKit Type andCatalog Number Applications Procedure

PreparationTime Number of Preps

Salt Removal

●●ReadyPrep●2-D●cleanup●●●kits●(#163-2130,●#163-2140)

Cleanup●of●protein●samples●for●1-D●and●2-D●applications

TCA-like●precipitation●to●remove●salts,●detergents,●lipids,●phenolic●compounds <1●hr 50

Reduction●of●streaking●on●2-D●gelsConcentration●of●dilute●samples

●●Micro●Bio-Spin™●6●●columns●(see●pages●17–18)

Removal●of●salts●and●othercontaminants

Size●exclusion●chromatography 5●min 25,●100,●1,000

Removal of Other Contaminants

●●ReadyPrep●2-D●cleanup●●kits●(#163-2130,●#163-2140)

Reduction●of●streaking●on●2-D●gelsConcentration●of●dilute●samples

TCA-like●precipitation●to●remove●salts,●detergents,●lipids,●phenoliccompounds

<1●hr 50

Reduction and Alkylation

●●ReadyPrep●reduction-●●alkylation●kit●(#163-2090)

Reduction●of●streaking●on●2-D●gelsImproved●resolution●of●basic●proteins

Reduction,●then●alkylation●of●sampleto●remove●disulfide●bonds●and●preventtheir●re-formation

<2●hr 100

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinextraction

4 サンプル調製

Page 5: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質分離改善www.bio-rad.com/proteinsampleprep

ReadyPrep 2-Dクリーンアップキット界面活性剤やカオトロープ等の物質に影響を受けない試薬を用いて、タンパク質を沈殿化します。これにより、サンプル中の●2次元電気泳動を妨害する界面活性剤、塩、ペプチド、脂質、フェノール化合物等を除去します。また、低濃度のタンパク質を濃縮することもできます。

マイクロバイオスピンカラムP-6ゲルろ過用担体バイオゲルP-6(排除限界:6,000Da)を充填したもので、タンパク質を希釈することなく、容易に脱塩することが可能です。極微量(10-75μl)のサンプルに最適です。

ReadyPrep 2-Dクリーンアップキットを用いた改善例(左)●1M●NaClを含むサンプルバッ

ファーで可溶化したE.coliサンプル

(右)●ReadyPrep●2-Dクリーンアップキットを用いて脱塩したE.coliサンプル

塩基性タンパク質の分離を改善します。一般的に使用されるDTTはアルカリ側(pH7以上)では電荷を帯びているため、電極の外側(中性側)に抜けていきます。そのため塩基性側ではDTTによる還元が不十分となり、ジスルフィド結合が再形成されてしまいます。本キットではサンプル調製の段階でまずタンパク質のジスルフィド結合を還元し、次に還元されたチオール

基が再酸化しないようにアルキル化し保護します。この処理により1次元目での塩基性タンパク質の可溶性を維持し、ストリーキングや擬似スポットの検出を抑えます。カップローディングトレイを用いたサンプルアプライ法により、最大限の分離改善が見込まれます。

ReadyPrep還元アルキル化キット

ReadyPrep還元アルキル化 キットを用いた改善例(左)●抽出物をそのままアプライし

たマウス肝臓サンプル(右)●ReadyPrep還元アルキル化キッ

トを用いて処理した後、カップローディング法によりアプライしたマウス肝臓サンプル

Ordering Informationカタログ番号 品名 数量 価格ReadyPrepキット163-2130 ReadyPrep 2-Dクリーンアップキット ¥41,000163-2090 ReadyPrep還元アルキル化キット ¥38,000マイクロバイオスピンカラム732-6221 マイクロバイオスピンカラム6,●Tris● 25本 ¥17,000732-6221B04 マイクロバイオスピンカラム6,●Tris● 25本×4セット ¥57,000732-6225 マイクロバイオスピンカラム6,●Tris● 1,000本 ¥290,000

サンプル調製 5

Page 6: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質分画 www.bio-rad.com/proteinsampleprep

タンパク質分画分画キットによりサンプルの複雑度が低減され、発現量の少ないタンパク質の検出に役立ちます。分画キットは、目的タンパク質の細胞内局在、溶解度の差、タンパク質の電荷に基づき分画する3つのタイプがあります。サイズや電荷によりタンパク質を分離するための機器も利用できます。

製品概要キットの分類と製品名 原理と目的 適用サンプル 操作時間 容量

溶解度の違いReadyPrepタンパク質抽出キット(Total●Protein)

ASB-14を用いた可溶化能の強いサンプルバッファーによる総タンパク質の抽出

▲●●▲●●▲●●▲ 45min 20回分

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Soluble/●Insoluble)

2種類の異なるサンプルバッファーによるタンパク質の抽出(2分画)

▲●● ●●▲●●▲ 1hour 20回分

ReadyPrepサンプルプレパレーションキット

3種類の異なるサンプルバッファーによるタンパク質の抽出(3分画)

▲●● ●●▲●●▲ 3hour 15回分

タンパク質の細胞内局在の違いReadyPrepタンパク質抽出キット(Membrane●I●)

TritonX-114の温度依存性可溶化能の違いによる膜タンパク質(膜結合型)の分画

▲●●▲●●▲●●▲ 3hour 50回分

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Membrane●II●)

Na2CO3バッファーを用いた超遠心法による膜タンパク質(複数回貫通型)の抽出

▲●● ●●▲●●▲ 3hour 10回分

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Signal)

TritonX-100の温度依存性可溶化能の違いによる膜タンパク質(ラフト・カベオラ結合タンパク質)の抽出

▲●●▲●● ●●▲ 3hour 50回分

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Cytoplasimc/●Nuclear)

核とその他の細胞小器官の溶解度の違いによる核内タンパク質の分画

▲ ▲ 3hour 50回分

電荷の違いAurum陰イオン交換(AEX)Miniキット

スピンカラムを用いた陰イオン交換クロマトグラフィーの手法によるタンパク質の分画

▲●●▲●●▲●●▲●●▲ 30min 2回分

Aurum陽イオン交換(CEX)Miniキット

スピンカラムを用いた陽イオン交換クロマトグラフィーの手法によるタンパク質の分画

▲●●▲●●▲●●▲●●▲ 30min 2回分

アフィニティー活性の違い(高含量タンパク除去)Aurum血清タンパク質Miniキット アフィニティークロマトグラフィーによる●

アルブミンとIgGの除去●●▲ 30min 10回分

AurumアフィゲルブルーMiniキット アフィニティークロマトグラフィーによるアルブミンの除去

●●▲ 30min 2回分

(タンパク質エンリッチメント)ProteoMinerタンパク質Enrichmentキット

高含量タンパク質の希釈と低含量タンパク質の濃縮 ▲●● ●●▲●●▲●●▲ 3hour 2,●10回分

▲●Mammalian●tissue●or●cells.●●●▲●Plant●leaves.●●●▲●E.●coli .●●●▲●Yeast.●●●●▲●Serum,●plasma

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinfractionation Request or download bulletins: 2934 and 2961

6 サンプル調製

Page 7: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質分画www.bio-rad.com/proteinsampleprep

溶解度の違いを利用した調製

バイオ・ラッドでは、サンプルバッファーの可溶化能の違いにより、全タンパク質を抽出するキット、2分画するキット、3分画するキットを販売しており、目的に応じたタンパク質の抽出と分画を行うことが可能です。

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Total Protein)簡単・短時間で、再現性よくサンプル中のタンパク質を抽出します。両イオン性界面活性剤のASB-14を含むバッファーで、より多くのタンパク質を可溶化することができます。

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Soluble/Insoluble)1つのサンプルを2つに分画し、親水性タンパク質と疎水性タンパク質をそれぞれ濃縮します。可溶化能の強い界面活性剤であるASB-14を使用して、より多くのタンパク質を可溶化することができます。

ReadyPrepサンプルプレパレーションキット1つのサンプルを3つに分画し、各フラクションのタンパク質を濃縮することで、発現量の低いタンパク質の検出を可能にします。チオウレアや比較的強い界面活性剤であるSB3-10、チャージを持たず還元力の強いTBPを使用しているため、従来使用されてきたバッファーに比べて多くのタンパク質を可溶化することができます。

キットの内容構成品 組成 容量

Total Protein2-D●Rehydration●Buffer●1●TBP

7M●ウレア、2M●チオウレア、1%(w/v)ASB-14、40mM●Tris、0.001%●BPB●200mM●TBP

10ml×2バイアル0.6ml

Soluble/Insoluble2-D●Rehydration●Buffer●1Lysis●BufferTBP

7M●ウレア、2M●チオウレア、1%(w/v)ASB-14、40mM●Tris、0.001%●BPB

200mM●TBP●

10ml×2バイアル50ml×5ポーチ0.6ml

サンプルプレパレーションキットReagent1Reagent2Reagent3

TBP

40mM●Tris8M●ウレア、4%(w/v)CHAPS、40mM●Tris、0.2%(w/v)Bio-Lyte3/105M●ウレア、2M●チオウレア、2%(w/v)CHAPS、2%(w/v)SB3-10、40mM●Tris、0.2%(w/v)Bio-Lyte3/10200mM●TBP

50ml10ml×3バイアル10ml×2バイアル

0.5ml

可溶化上清

不溶分

No.2

可溶化上清

不溶分

No.3

Step2界面活性剤や還元剤などを含むバッファー(Reagent 2+TBP)

Step3より強い界面活性剤や還元剤などを含むバッファー(Reagent 3+TBP)

Step1界面活性剤や還元剤を含まないバッファー(Reagent 1)

可溶化上清

不溶分

No.1

Proteinsample

Reagent 2

サンプルプレパレーション実験プロトコール

Ordering Informationカタログ番号 品名 数量 価格 保存ReadyPrepタンパク質抽出キット163-2086 ReadyPrepタンパク質抽出キット(Total●Protein) ¥22,000 室温163-2085 ReadyPrepタンパク質抽出キット(Soluble/●Insoluble) ¥28,000 室温163-2100 ReadyPrepサンプルプレパレーションキット ¥31,000 室温ReadyPrepサンプルプレパレーションキット構成品163-2102 ReadyPrep Reagent 1 1本 ¥8,000 室温163-2103 ReadyPrep Reagent 2 1本 ¥8,000 室温163-2104 ReadyPrep Reagent 3 1本 ¥8,000 室温163-2101 Reducing Agent●TBP●200mM●0.6ml 1本 ¥8,000 室温*

*●開封後は-20℃で保存

サンプル調製 7

Page 8: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質分画 www.bio-rad.com/proteinsampleprep

タンパク質の細胞内局在に基づく調製

タンパク質の細胞内における局在に基づく分画を行うことで、ターゲットとする発現量の低いタンパク質を濃縮し、検出感度を向上させます。微量な膜タンパク質や核タンパク質をターゲッ

トとする場合、電気泳動後新たなバンドおよびスポットの検出・効率的な解析を行うことが可能になります。

膜タンパク質の特異的分画ReadyPrepタンパク質抽出キット(Membrane I)膜に結合したタンパク質をTritonX-114を用いて、効率よく抽出します。超遠心や密度勾配遠心等のステップを踏まずに、簡便に●膜タンパク質を分画することが可能です。

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Membrane II)複数回膜を貫通したタンパク質を特異的に分画します。Na2CO3を含むバッファーで懸濁し、超遠心法により分画します。

ReadyPrepタンパク質抽出キット(Signal)スフィンゴ脂質・コレステロールが豊富なカベオラやラフトなどのシングルドメインをTritonX-100を用いて、効率よく抽出します。シグナル伝達や脂質の輸送に重要な役割を果たす膜タンパク質(GPIアンカー型タンパク質、アシル化チロシンキナーゼ、Gタンパク質など)を特異的に抽出することが可能です。

核内タンパク質の特異的分画ReadyPrepタンパク質抽出キット

(Cytoplasmic/ Nuclear)核内のタンパク質と細胞質中のタンパク質を分画します。核膜を溶解することなく細胞質内のタンパク質だけを抽出するバッファーを加え、シリンジ(培養細胞)、ホモジナイザー(組織)を用いて核と溶解した細胞質タンパク質を分画します。遠心して得られた核ペレットを可溶化能の強いバッファーで懸濁することで核内のタンパク質を抽出します。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinfractionation Request or download bulletins: 2934 and 2961

操作フロー

(膜貫通画分)沈殿

サンプル

(30-40秒ソニケート+1分冷却)×3-4回M1、0.5mL

PSB

M2(TritonX-114)、0.5mL4℃、10分インキュベート

動物組織:25-50mg、植物組織:0.25g、培養細胞:0.05mL

遠心分画(~16,000g)

上清

遠心

上清(上層)(親水性画分)

上清(下層)(膜結合画分)

PSB遠心

上清

PSB遠心

上清

2D クリーンアップキット処理

37℃、30分インキュベート

ReadyPrepタンパク質抽出キット (MembraneⅠ)

操作フロー

上清

(膜貫通画分) (親水性画分)沈殿

上清

上清

(タンパク質画分)

サンプル

(30秒ソニケート+冷却)×3-4回

4℃、60分インキュベート

遠心(~3,000g)

100-200mg

遠心分画(100,000g)

遠心(~16,000g)

Lysis Buffer、1mL

MPCR(Na2CO3)、60mL

コンプリート2-DRehydration/Sample Buffer、1-2mL

ReadyPrepタンパク質抽出キット (MembraneⅡ)

操作フロー

PSB、0.2-0.3mL

(膜画分)沈殿

沈殿

室温、10-15分インキュベート(ボルテックス)

上清

上清(親水性画分)

サンプル

(30-40秒ソニケート+1分冷却)×3-4回

4℃、15分インキュベート

動物組織:25-50mg、植物組織:0.25g、培養細胞:0.05mL

遠心分画(~16,000g)

遠心(~16,000g)

S1、0.5mL

S2(TritonX-100)、0.5mL

ReadyPrepタンパク質抽出キット (Signal)

操作フロー

CPEB 0.5mL4℃、30分インキュベートシリンジ(20ゲージ)によるストローク

PSB

CPEB 0.75mLホモジナイズ4℃,1-2分インキュベート

遠心分画(1,000g)

上清

上清(核画分)沈殿

遠心(12,000-16,000g)2-D クリーンアップキット処理

PSB

上清

(細胞質画分)

遠心

組織~50mg培養細胞 0.05mL

ReadyPrepタンパク質抽出キット (Cytoplasmic/Nuclear)

8 サンプル調製

Page 9: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質分画www.bio-rad.com/proteinsampleprep

キットの構成品 別途必要な機器・試薬

Membrane IMembrane●protein●extraction●buffer●1(M1)●50ml×1本Membrane●protein●extraction●buffer●2(M2)●50ml×1本Protein●solubilization●buffer●(PSB)●25g×1本PSB●diluent●30ml×1本ReadyPrep●2-Dクリーンアップキット●1箱

◦還元剤◦キャリアアンフォライト◦ソニケーター◦37℃に設定可能なヒートブロック

Membrane II2-D●Rehydration●/●Sample●Buffer●10ml×2本 組成:●7M●Urea,●2M●Thiourea,●1%●(w/v)●ASB-14,●●

40mM●Tris,●0.001%●BPBLysis●Buffer●50ml×5袋Membrane●Protein●Concentraining●Reagent●125ml×5袋200mM●TBP●0.6ml×1本TBP保存用ガラス製バイアル×1本

◦キャリアアンフォライト◦ソニケーター◦超遠心機 (●100,000●g回転可能なローターと●30ml以下のチューブ)

SignalSignal●protein●extraction●buffer●(S1)50ml×1本Signal●protein●extraction●buffer●(S2)50ml×1本Protein●solublization●buffer(PSB)25g×1本PSB●diluent●30ml×1本

◦還元剤◦キャリアアンフォライト◦ソニケーター

Cytoplasmic/ NuclearCytoplasmic●protein●extraction●buffer(CPEB)●50ml×1本Protein●solubilization●buffer(PSB)25g×1本PSB●diluent●30ml×1本ReadyPrep●2-Dクリーンアップキット●1箱

◦還元剤◦キャリアアンフォライト◦20ゲージニードルのシリンジ(培養細胞の場合)◦ホモジナイザー(組織の場合)

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存ReadyPrepタンパク質抽出キット163-2088 ReadyPrepタンパク質抽出キット(MembraneⅠ) ¥70,000 室温163-2084 ReadyPrepタンパク質抽出キット(MembraneⅡ) ¥31,000 室温163-2087 ReadyPrepタンパク質抽出キット(Signal) ¥43,000 室温163-2089 ReadyPrepタンパク質抽出キット(Cytoplasmic/Nuclear) ¥70,000 室温

タンパク質のチャージに基づく調製

Aurumイオン交換MiniキットAurumイオン交換Miniキットはイオン交換担体が充填されたスピンカラムタイプのキットです。高価なクロマトグラフィーシステム、あるいはクロマトグラフィー法に関する深い知識を必要とせず、どなたでも簡単にご使用いただけます。Aurumイオン交換Miniキットは陰イオン交換(AEX)および陽イオン交換(CEX)用のミニカラムがあり、これらのキットはルーチンでの前分画、精製、および血清、バクテリア、酵母培養細胞などの多くの未処理サンプルのスクリーニングに適用可能です。Aurumイオン交換MiniキットにはUNOsphere●S&Qイオン交換用担体がプレパックされています。これはバイオ・ラッド独自の重合法を用いて開発された新世代の親水性ポリマーです。UNOsphereイオン交換担体は、有効なタンパク質の吸着量と高いタンパク質結合力を持ちます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteinfractionation Request or download bulletin: 2928

サンプル調製 9

Page 10: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質サンプルの濃縮と除去 www.bio-rad.com/proteinsampleprep

仕様Aurum陰イオン交換AEX Aurum陽イオン交換CEX

担体 UNOsphere●Q UNOsphere●S結合容量 36mg●protein/column* 12mg●protein/column*Bed●Volume● 0.2ml 0.2ml結合バッファー 20mM●Tris、pH8.3** 20mM●酢酸ナトリウム、pH5.0**溶出バッファー 結合バッファー+1.0M●NaCl 結合バッファー+1.0M●NaCl品質保持期間 4℃/1年 4℃/1年● *●BSA(AEX)およびIgG(CEX)により決定された結合容量になります。結合容量はタンパク質の種類により多少異なります。●**●このバッファーはキットに付属されているバッファーになります。これ以外の一般的にクロマトグラフィーに使用されれているバッファーもバッファー置換を行うことで使用することができます。

Ordering Informationカタログ番号 品名 包装 価格 保存Aurumイオン交換Miniキット732-6711 Aurum陽イオン交換(CEX)Miniキット 2セット ¥20,000 4℃732-6710 Aurum陰イオン交換(AEX)Miniキット 2セット ¥20,000 4℃

タンパク質サンプルの濃縮と除去複雑なサンプルでは、少量のタンパク質を検出可能にするために、大量に含まれるタンパク質の除去が必要となることがしばしばあります。バイオ・ラッドは、タンパク質の除去のための異なる2つの方法を提供しますーProteoMiner™タンパク質Enrichmentシステム(ヘキサペプチドライブラリーを使用)およびAurum™血清/アフィゲルブルー製品(アフィニティ樹脂を使用)。いずれの技術も大量のタンパク質レベルを低減しますが、ProteoMinerシステムは少量のタンパク質を高濃度に濃縮し、血清や血漿以外のサンプルにも適用が可能です。

製品概要キットの分類と製品名 目的 原理 操作時間 適用サンプル 検体数

ProteoMinerタンパク質Enrichmentキット 高含量タンパク質の希釈と低含量タンパク質の濃縮 Affinity●chromatography 3hour ▲●●▲●●▲●●▲ 2,●10

Aurum血清タンパク質Miniキット732-6701

アルブミンとIgGの除去 Affinity●chromatography <30min ●●▲ 10

AurumアフィゲルブルーMiniキット732-6708

アルブミンの除去 Affinity●chromatography <30min ●●▲ 2,●bulk

▲●Mammalian●tissue●or●cells.●●●▲●E.●coli .●●●▲●Yeast.●●●●▲●Serum,●plasma

ProteoMiner™ タンパク質Enrichmentシステム

ProteoMiner™ タンパク質Enrichmentキット生体サンプル中の高含量タンパク質は、中〜低含量タンパク質の検出を妨げます。ProteoMinerタンパク質Enrichmentキットは、生体サンプルに含まれるタンパク質の含有量の違い(ダイナミックレンジ)を小さくすることができる、新しいサンプル処理ツールです。

ProteoMinerタンパク質Enrichment技術は、多種多様のペプチドリガンドが結合したビーズにより、高含量タンパク質を希釈すると同時に、低含量タンパク質を濃縮します。生体サンプルをビーズに添加すると、高含量タンパク質は、それらに対する親和性の高いビーズに対して飽和結合し、過剰のタンパク質は洗い流されます。一方、低含量タンパク質は、それらに特異的なビーズリガンドにより濃縮されます。

10 サンプル調製

Page 11: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質サンプルの濃縮と除去www.bio-rad.com/proteinsampleprep

●● イムノデプリーションすることなく高含量タンパク質量を低下させることができる。

●● 一般的な方法では検出できなかった中〜低含量タンパク質を濃縮することができる。

●● 多様なサンプルに適用可能。

●● 多様な検出方法に適用可能。

●● 便利で簡単なキット。

ProteoMiner小/大容量キットタンパク質量に応じて、2種類のサイズからお選びいただけます。

0.2ml用キットー限られたサンプル材料での使用に最適化されています(最低10mgのタンパク質が推奨されます)。

1ml用キットー最低50mgのタンパク質を含むサンプルの使用に最適化されています。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteominer Request or download bulletins: 5632, 5635, and 5841

溶出

過剰タンパク質

洗浄サンプル添加、結合カラムサンプル(ダイナミックレンジ大)

ProteoMiner技術それぞれのビーズには、サンプル中の特定のタンパク質に親和性をもつ6アミノ酸から構成される、異なるペプチドリガンドが結合している。サンプルをビーズに添加することでタンパク質はそれらに特異的なビーズに結合する。ビーズに結合しない過剰のタンパク質は洗い流され、ビーズに結合したタンパク質を溶出し、その後の検出に用いる。

高含量タンパク質の減少により、タンパク質の検出能/分解能が向上する。左、未処理血漿/血清;右、ProteoMinerタンパク質Enrichmentキットを使用して処理した血漿/血清

● ● 処理前● ●

● 血漿● ● 血清

● ● 処理後● ●

● 血漿● ● 血清

サンプル調製 11

Page 12: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

タンパク質サンプル調製タンパク質サンプルの濃縮と除去 www.bio-rad.com/proteinsampleprep

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存ProteoMinerタンパク質Enrichmentキット163-3006 ProteoMinerタンパク質Enrichmentキット(0.2ml用,●10回) ¥58,000 4℃

構成内容:10mg用スピンカラム(10)、洗浄バッファー、溶出バッファー、回収チューブ163-3007 ProteoMinerタンパク質Enrichmentキット(1ml用,●10回) ¥80,000 4℃

構成内容:50mg用スピンカラム(10)、洗浄バッファー、溶出バッファー、回収チューブ163-3008 ProteoMinerタンパク質Enrichmentスターターキット(0.2ml用,●2回) ¥20,000 4℃

構成内容:10mg用スピンカラム(2)、洗浄バッファー、溶出バッファー、回収チューブ163-3009 ProteoMinerタンパク質Enrichmentスターターキット(1ml用,●2回) ¥28,000 4℃

構成内容:50mg用スピンカラム(2)、洗浄バッファー、溶出バッファー、回収チューブProteoMiner段階溶出キット163-3010 ProteoMiner 4段階溶出キット(0.2ml用,●10回) ¥72,000 4℃

構成内容:10mg用スピンカラム(10)、洗浄バッファー、溶出試薬(4種類)、回収チューブ163-3011 ProteoMiner 4段階溶出キット(1ml用,●10回) ¥98,000 4℃

構成内容:50mg用スピンカラム(10)、洗浄バッファー、溶出試薬(4種類)、回収チューブProteoMinerキットアクセサリー163-3003 ProteoMiner 4段階溶出試薬(10回) ¥28,000 4℃

構成内容:163-3006、163-3007用の溶出試薬(4種類)732-6207 ミニバイオスピンエンプティーカラム(100本) ¥29,000

アフィニティー活性を利用した調製

Aurum血清タンパクMiniキットAurum血清タンパクMiniキットはアフィニティー担体であるアフィゲルブルーとアフィゲルプロテインAが充填されたスピンカラムを用いてサンプルを精製します。遠心するだけで血清中のアルブミンとIgGをより簡単により速く除去します。

Aurum血清タンパクMiniキットによりサンプルを精製することで、90%以上の割合でアルブミンとIgGを除去することができ、結果的にそれ以外のタンパク質を3-4倍近い濃度でアプライすることが可能になります。

サンプル調製の際、Aurum血清タンパクMiniキットを使用することで、血清及び血漿試料中のアルブミン、IgGレベルを減少させることができます。その結果、アルブミン周辺のスポットの出現やマイナースポットのシグナル増加を達成することが可能となります。

AurumアフィゲルブルーMiniキットアルブミンだけを除きたいときは、AurumアフィゲルブルーMiniキットをご使用ください。

仕様Aurum血清タンパクMiniキット* AurumアフィゲルブルーMiniキット

アルブミン結合容量 >11mg/ml● >11mg/mlhuman●IgG結合容量 >18mg/ml● -保存バッファー 0.05%●NaN3 0.05%●NaN3サンプル量 ≦250μl● ≦100μl品質保持期間 4℃/1年 4℃/1年*●ヒト血清に最適化されておりますので、他の動物種では非特異的な吸着が生じることがあります。ご注意ください。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/proteindepletion Request or download bulletin: 2823

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存732-6701 Aurum血清タンパクMiniキット(10セット) ¥40,000 4℃732-6712 AurumアフィゲルブルーMiniキット(2セット) ¥20,000 4℃

12 サンプル調製

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核酸サンプル調製RNA精製www.bio-rad.com/nasampleprep

核酸サンプル調製バイオ・ラッドでは、DNA、RNA、PCR産物などの精製試薬をスモールスケールからラージスケールまで、用途に合わせて幅広く提供します。

RNA精製Aurum™ トータルRNAキット

AurumトータルRNAキットは、シリカメンブレンを使用したトータルRNA精製キットです。

本キットはシリカメンブレンを採用していますので、迅速な精製が可能で、インタクトなトータルRNAを高い収量で得られます。RNAの分解を避けるために、本キットに含まれる試薬やプラスチック用品はRNaseフリーです。

キットにはゲノムDNAのコンタミネーションを防ぐために、DNaseⅠが含まれています。

検体数にあわせて、ミニカラム形式のMiniキット、マイクロプレート形式の96キットの2種類からお選びください。

また精製が困難な脂肪や繊維が多いサンプルにはFatty●and●Fibrous●Tissueキットのご使用をお勧めいたします。

AurumトータルRNA●Fatty●and●Fibrous●Tissueキットは脂肪、繊維、タンパク質、DNAそしてヌクレアーゼがリッチなサンプルから高品質なDNAフリー、フェノールフリーのトータルRNAを精製することが可能です。通常そのようなサンプルはRNAの回収率や品質を向上させるために、特殊なプロトコールなどが要求されていました。AurumトータルRNA●Fatty●and●Fibrous●TissueキットではPureZOL試薬を利用してサンプルの効果的な溶解を行うことにより、その後のプロトコールを簡便にすることができました。キットはそのほとんどの動物または植物組織、培養細胞、酵母そしてバクテリアに有効です。

仕様Aurum トータルRNA Mini キット

Aurum トータルRNA 96キット

AurumトータルRNAFatty and Fibrous Tissueキット

精製法 シリカメンブレン シリカメンブレン シリカメンブレン&PureZOL

形式 カラム遠心または吸引

96ウェルプレート遠心または吸引

カラム遠心または吸引

適用サンプル 培養細胞 2×106個以下/カラム 1×106個以下/ウェル 1×107個以下/カラムバクテリア 2.4×109個以下/カラム 8×108個以下/ウェル 2.4×109個以下/カラム酵母 3×107個以下/カラム 2×107個以下/ウェル 3×107個以下/カラム動物組織 20-40mg以下/カラム 100mg以下/カラム植物組織 60mg以下/カラム 100mg以下/カラム

DNaseI添付 有り 有り 有り作業時間 <50分以内

(DNAase処理含まない)<50分以内(DNAase処理含まない)

<60分以内

メンブレン結合容量 >100μg● >40μg >100μg精製度(A260/280)● 1.9〜2.1 1.9〜2.1 1.9〜2.1溶出容量 2×40μl 2×40μl 80μl収量(例) 20-40μg/2×106●HeLa

35-55μg/2.4×109●E.coli17μg/1×106●HeLa5μg/8×108●E.coli

140-150μg/1×107●293H20-30μg/2.4×109●E.coli

Aurum●Total●RNA●Mini●Kit

Aurum●Total●RNA●Fatty●and●Fibrous●Tissue●Kit

Aurum●Total●RNA●96●Kit

Aurum●Vacuum●Manifold

See Also

核酸増幅試薬:●P.380リアルタイムPCR●●解析システム:●P.369Experion全自動●電気泳動システム:●P.278

See Also

トランスフェクション●試薬:●P.345

サンプル調製 13

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核酸サンプル調製RNA精製 www.bio-rad.com/nasampleprep

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存AurumトータルRNAキット732-6820 AurumトータルRNA Miniキット(50回分) ¥35,000 室温

構成内容:RNA●binding●カラム(50)、2ml蓋なしwashチューブ(50)、1.5ml蓋付遠心チューブ(50)、2.0ml蓋付遠心チューブ(100)、DNaseⅠ(凍結乾燥品)、Lysis●solution、Low●stringency●wash●solution、High●stringency●wash●soltion、Elution●solution、DNase●dilution●solution

732-6820B03 AurumトータルRNA Miniキット(150回分)●50回分●3セット ¥90,000 室温732-6820B05 AurumトータルRNA Miniキット(250回分)●50回分●5セット ¥145,000 室温732-6820B10 AurumトータルRNA Miniキット(500回分)●50回分●10セット ¥279,000 室温732-6800 AurumトータルRNA 96キット(96well×2回分) ¥83,000 室温

構成内容:RNA●binding●プレート(2)、Grow●block(2)、Sample●collectionプレート(2)、Aurum●growth●membrane(2)、DNaseⅠ(凍結乾燥品)、Lysis●solution、Low●stringency●wash●solution、High●stringency●wash●soltion、DNase●dilution●solution

732-6800B03 AurumトータルRNA 96キット(96well×6回分)●●●96×2回分●3セット ¥242,000 室温732-6800B05 AurumトータルRNA 96キット(96well×10回分)●96×2回分●5セット ¥390,000 室温732-6800B10 AurumトータルRNA 96キット(96well×20回分)●96×2回分●10セット ¥758,000 室温732-6470 Aurumバキュームマニホールド ¥103,000

構成内容:バキュームレギュレーター(1)、ステージ(1)、交換用ルアーキャップ(4)、カラムアダプタープレート(1)、チュービング(1)

732-6830JA● AurumトータルRNA Fatty and Fibrous Tissueキット(50回分) ¥49,000 室温構成内容:50ml●PureZOL●RNA●isolation●reagent*、RNA●bindingカラム(50)、2ml蓋なしcollectionチューブ(50)、2ml蓋付遠心チューブ(100)、1.5ml蓋付遠心チューブ(50)、DNaseⅠ(凍結乾燥品)、Low●stringency●wash●solution、Elution●solution、DNase●dilution●solution

*●ただし構成品のPureZOL●RNA●isolation●reagentは4℃保存にて1年。バキュームフォーマットではAurumバキュームマニホールドが必要になります。

14 サンプル調製

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核酸サンプル調製DNA精製www.bio-rad.com/nasampleprep

インスタジーンDNA精製マトリクス

インスタジーン●マトリックスはPCRの鋳型として使用するに十分な純度のゲノムDNAを1時間で迅速に精製するための製品です。

特別に配合された6%w●/●v キレックス樹脂は、PCRを阻害する細胞溶解産物を吸着し、上清中にゲノムDNAが精製されます。

上清のゲノムDNAはそのままPCRにすぐに使用することができます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/instagene-matrix Request or download bulletin: 2074

DNA精製Quantum Prep® プラスミド精製キット

Quantum●Prepプラスミド精製キットは、バクテリアからプラスミドDNAを精製するための試薬キットです。本キットは、バイオ・ラッド独自の珪藻土マトリクスを採用しているため、すぐれた回収量および精製度を得ることができます。

高純度に精製されたプラスミドはそのままDNAシーケンシング、ジーントランスファー、DNAミュータジェネシス、クローニングおよび制限酵素処理に使用できます。

また、本キットには溶菌から回収までに必要とされるほとんどの試薬が含まれています。操作も簡便であるため、プラスミド精製が短時間に行えます。

Quantum Prepの優れた回収能プラスミドを保持した大腸菌DH5α培養液1.5mlから、24μgのプラスミドを回収。

Quantum Prep Miniキット

Quantum Prep Midiキット

入数 100回分 20回分

1カラムあたりの培養液量 1〜2ml 40〜50ml

1カラムあたりの回収量●(High●copyプラスミド)

<40μg 100〜300μg

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存732-6100 Quantum Prep Miniキット(100回分)● ¥29,000 室温732-6120 Quantum Prep Midiキット(20回分)● ¥26,000 室温

0● 5● 10● 15● 20● 25

Quantum●Prep●kit

Brand●X

Brand●Y

Phenol/chloroform

Plasmid●yield●in●μg/1.5ml●culture

Quantum●Prep●Midiキット

Quantum●Prep●Miniキット

See Also

PCR関連:●P.362DCode微生物●群集解析:●P.272

InstaGene Protocol

Add●bacterial●colony●to●water.PCR-ready

Spin;●use●supernatant●for●PCR.Add●InstaGene●matrix●and●incubate●at●56°C●for●30●min.●Vortex●and●incubate●at●100°C●for●8●min.

Spin●and●remove●supernatant.

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存732-6030 インスタジーンDNA精製マトリクス(100回分)20ml ¥15,000 4℃

サンプル調製 15

Page 16: 03 サンプル調製 P001-018ReadyPrep ミニグラインダー ReadyPrepミニグラインダーは、各種サンプルからタンパク質や 核酸を高回収率で抽出するためのグラインダーです。1.5mlのサ

核酸サンプル調製DNAクリーンアップ www.bio-rad.com/nasampleprep

キレックス100 分子生物学グレード

ヌクレアーゼ並びにリガーゼ阻害剤フリーの樹脂は、PCRを阻害しないように、サンプル中からPCR阻害物と金属イオンを除去することができます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/dna-isolation Request or download bulletin: 2074

DNAクリーンアップバイオ・ラッドは、PCR前、PCR後のサンプル調製のための様々なクリーンアップカラムや充填済みカラムを提供しています。次ページのセレクションガイドを参照いただき、用途に合った最適な製品をお選びください。

Freeze ’N Squeeze™ DNA Gel Extraction Spin Columns

Freeze’N●Squeezeスピンカラムは、アガロースゲルからDNAを回収するためのキットです。

凍結したゲルをスピンカラムに入れ、遠心することでDNAをゲルから押し出します。

●● 溶液の調製やカラム、担体、メンブレン等の準備も不要です。

簡単な操作による回収●● 精製に要する時間は約10分、実際に操作を行う時間はわずか1分です。

●● 精製された50-23,000bpのDNAはそのままPCR、サブクローニング、ライゲーション、制限酵素処理、等様々な酵素反応にご使用いただけます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/freeze-n-squeeze

1,000●bp700600500400300200100

● 1● 2● 3● 4● 5● 6● 7

Freeze ’N Squeeze Method

Cut●out●gel●slice.

Purified●DNA

–20ºC●for●5●min

Recover●purified●DNA.Spin●for●3●min.Transfer●to●spin●column●and●freeze●for●5●min.

Chop●into●pieces.

See Also

アガロースゲル●システム:●

P.254DNAラダー:●

P.268

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存732-6165 Freeze ’N Squeezeスピンカラム(25回分) ● 25本 ¥10,000 室温732-6166 Freeze ’N Squeezeスピンカラム(100回分)100本 ¥28,000 室温

Recovery of DNA fragments using Freeze ’N Squeeze spin columns.Extracted● fragments●were●rerun●on●a●ReadyAgarose™●1 % ● T A E ● g e l . ● L a n e ● 1 ,●precision●molecular●mass●ruler;● lane●7,●EZ●Load™●100●bp●PCR●molecular●ruler.

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格142-1253 キレックス100,●50●g,●sodium,●200–400●dry●mesh,●分子生物学グレード75–150μm●wet●bead ¥25,000

16 サンプル調製

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核酸サンプル調製DNAクリーンアップwww.bio-rad.com/nasampleprep

充填済みスピンカラム

プレパックサイズ排除(ゲルろ過)スピンカラムにより、放射線標識したプローブ、ニックトランスレーション産物、プラスミド、PCR混合物を簡単にクリーンアップ/精製できます。バイオスピン/マイクロバイオスピン/PCR●Kleen™カラムにより迅速にDNAやタンパク質のサンプルをクリーンアップし、簡単

にサイズ排除クロマトグラフィーを使用できます。これらのカラムは複数のサイズで利用可能で、複数の分子量排除限界を提供し、様々なニーズに応えます。以下のチャートを使用して、ニーズに最も合うカラムを選んでください。

充填済みスピンカラムセレクションガイドバイオスピン6 マイクロバイオスピン6 バイオスピン30 マイクロバイオスピン30 PCR Kleen

充填担体 Special●gradeBio-Gel®●P-6●gel

Special●grade●Bio-Gel●P-6●gel

Special●grade●Bio-Gel●P-30●gel

Special●grade●Bio-Gel●P-30●gel

Special●gradesize●exclusion●gel

平衡化バッファー 10mM●Tris,●pH●7.4,●or●SSC●buffer*

10mM●Tris,●pH●7.4,●or●SSC●buffer*

10mM●Tris,●pH●7.4,●or●SSC●buffer*

10mM●Tris,●pH●7.4,or●SSC●buffer*

10mM●Tris,●1mMEDTA,●pH●7.0

用途

20塩基未満のオリゴヌクレオチドの脱塩

◦ ◦ — — —

標識反応:DNAからの20塩基(bp)未満の未取り込みヌクレオチドの除去

— — ◦ ◦ —

200bp未満のPCR産物からのプライマーやプライマーダイマーの除去

— — — — ◦

バッファー交換(制限酵素断片、PCR産物、酵素反応、シークエンシング用テンプレート)

◦ ◦ — ◦ —

DNAシークエンシング反応混合物の精製**

— — ◦ ◦ —

リボプローブ精製*** — — — ◦ —

抗体、酵素、タンパク質溶液の脱塩

◦ ◦ — ◦ —

分子量6,000未満のタンパク質の精製

◦ ◦ — — —

分子量40,000未満のタンパク質の精製

— — ◦ ◦ —

ベッドボリューム 1.1ml 0.7ml 1.1ml 0.7ml 0.6ml

回収/分離 20baseもしくは20bpの回収

20baseもしくは20bpの回収

22baseもしくは22bpの回収

22baseもしくは22bpの回収

700bp以上の回収

脱塩 脱塩 ddNTPsの分離 ddNTPsの分離 プライマー、プライマーダイマーの分離

分子量の排除限界、球状タンパク質 6,000 6,000 40,000 40,000 8,000,000

サンプル容積 50-100μl 10-75μl 50-100μl 10-75μl 25-100μl

遠心タイプ スイングバケット マイクロ冷却 スイングバケット マイクロ冷却 マイクロ冷却

オートクレーブ可否 可 可 可 可 可

● *●150mM●NaCl,●17.5mM●sodium●citrate,●pH7.0.●● **●In●Tris●buffer.●***●In●RNase-free●Tris●buffer.

サンプル調製 17

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プレパックバイオスピン/マイクロバイオスピンカラムバイオスピン/マイクロバイオスピンカラムにより、DNA(およびタンパク質)サンプルを迅速にクリーンアップします。バイオスピン/マイクロバイオスピンカラムは、特別にサイズ分画したBio-Gel●P担体を充填して、TrisまたはSSCバッファー中に十分に水和させて出荷し、直ぐに使用できます。これらの製品により、塩、オリゴヌクレオチド、プライマーダイターミネーターおよび、DNA、RNAからの小分子、並びにタンパク質サンプルがわずか10分間で効果的にクリーンアップ/除去されます。

●● 4分間の微量遠心チューブスピンでの迅速なサンプル精製。●● ddNTPおよびダイターミネーターの効率的な(98%)除去。●● 収率の向上・22bp未満のDNAの95%回収率。●● 10〜100μlのサンプル充填に適応。●● ●RNaseフリーのマイクロバイオスピンP-30●Trisスピンカラムでの安全なリボプローブ調製。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/dna-cleanup and /protein-cleanup

PCR KleenスピンカラムPCR●Kleenスピンカラムはゲルろ過担体をプレパックしたカラムで、200bp以上のPCR産物の精製に適しています。本キットの使用により、反応液に含まれるdNTPs、プライマー、プライマーダイマー、酵素などその後のアプリケーションに影響を及ぼす物質の除去が簡単に行えます。精製後のDNAはPCR、サブクローニング、制限酵素処理、他の酵素反応等にそのまま使用することができます。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/dna-cleanup Request or download bulletin: 2311

Ordering Informationカタログ番号 品名 包装 価格 保存Micro Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-6 in Tris Buffer732-6221 マイクロバイオスピンカラム6 Tris 25本 ¥17,000 4℃732-6221B04 マイクロバイオスピンカラム6 Tris 25本●●4セット ¥57,000 4℃732-6225 マイクロバイオスピンカラム6 Tris 1,000本 ¥290,000 4℃Micro Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-30 in Tris Buffer732-6223 マイクロバイオスピンカラム30 Tris 25本 ¥17,000 4℃732-6223B04 マイクロバイオスピンカラム30 Tris 25本●●4セット ¥57,000 4℃732-6226 マイクロバイオスピンカラム30 Tris 1,000本 ¥290,000 4℃732-6250 マイクロバイオスピンカラム30 Tris RNase free 25本 ¥17,000 4℃732-6250B04 マイクロバイオスピンカラム30 Tris RNase free 25本●●4セット ¥57,000 4℃Micro Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-6 in SSC Buffer732-6200 マイクロバイオスピンカラム6 SSC 25本 ¥17,000 4℃732-6200B04 マイクロバイオスピンカラム6 SSC 25本●●4セット ¥57,000 4℃732-6205 マイクロバイオスピンカラム6 SSC 1,000本 ¥290,000 4℃Micro Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-30 in SSC Buffer732-6202 マイクロバイオスピンカラム30 SSC 25本 ¥17,000 4℃732-6202B04 マイクロバイオスピンカラム30 SSC 25本●●4セット ¥57,000 4℃732-6206 マイクロバイオスピンカラム30 SSC 1,000本 ¥290,000 4℃Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-6 in Tris Buffer732-6227 バイオスピンカラム6 Tris 25本 ¥20,000 4℃732-6227B04 バイオスピンカラム6 Tris 25本●●4セット ¥72,000 4℃Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-30 in Tris Buffer732-6231 バイオスピンカラム30 Tris 25本 ¥20,000 4℃732-6231B04 バイオスピンカラム30 Tris 25本●●4セット ¥72,000 4℃Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-6 in SSC Buffer732-6002● バイオスピンカラム6 SSC 25本 ¥20,000 4℃732-6213● バイオスピンカラム6 SSC 1,000本 ¥370,000 4℃Bio-Spin Columns With Bio-Gel P-30 in SSC Buffer732-6006● バイオスピンカラム30 SSC 25本 ¥20,000 4℃PCR Kleenスピンカラム732-6300 PCR Kleenスピンカラム 25本 ¥15,000 4℃

End●cap

Reservoir●●●

Porous●30μm●polyethylene●bed●●support●retains●●fine●particles

Luer●end●fitting●with●snap-off●tip

1.2ml●bed●volume

5cm

3.7cm●workingbed●height

3cm2cm●workingbed●height

End●cap

Reservoir

0.8ml●bed●volume

Luer●end●fitting●with●snap-off●tip

PCR●Kleenスピンカラム

プレパックバイオスピン/マイクロバイオスピンカラム

See Also

エンプティーカラム:●P.97

バイオゲル担体:●P.77

バイオスピン・●マイクロ●

バイオスピン・●ミニバイオ●

スピンカラム:●P.90

核酸サンプル調製DNAクリーンアップ www.bio-rad.com/nasampleprep

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