6/5科學實作練習活動

生物科技與生命倫理~DNA 的真相 ~

DNA 萃取原理

將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒，除去蛋白質及其他成分，就可以純化 DNA 。

一般常用酚及氯仿 (phenol/chloroform) 可使蛋白質變性 (denaturaion) 的特性來進行萃取的步驟， DNA 和 RNA 不溶於有機溶媒中，而溶於水層。

另外，分子選殖 (molecular cloning) 常利用洋菜膠(agarose) 來分離不同大小的 DNA 片段或用以純化DNA 。

放置恆溫水槽 65℃ for 6 minutes

放置恆溫水槽 98℃ for 2 minutes

口腔黏膜細胞

DNA 萃取溶液＊

口腔細胞D

NA

萃取步驟

＊組裝水平電泳膠片等膠片凝 固約 15 分鐘

DNA 水平電泳槽

Agarose( 膠片 )

( 三分一的高度 )

1. 拿 Loding dye + 自己口腔萃取 DNA溶液 染色 1:52. 電壓 100V ：電流由負極往正極流3. 加好 SAMPLE 等待 25 分鐘左右

Etbr 染色原理

EtBr 會嵌入核酸配對 ( 雙股 DNA 或單股DNA 、 RNA 的自我配對二級結構 ) 之間。

EtBr 受到紫外線照射時會發出橘紅色的螢光，與核酸結合時的螢光強度約是游離態時的 20 倍。藉此可偵測核酸。

(1) 溴化乙啶 (ETBR) 染色(2) 在使用 UV 照射(3) 最後使用電泳膠片顯像儀， 看自己 DNA 序列

( 跑好電泳膠片 )

1. 注意事項 : (1)ETBR 是一個致癌化學物質 ，使用前請戴手 套，使用請小心，觸碰到 ETBR 請別亂摸周遭環境2.ETBR 廢棄物要在陽光下，照射 N 禮拜才會分解掉