ИЗУЧЕНИЕ ВРЕМЕННОЙ ДИНАМИКИ ЭКСПРЕССИИ РАННИХ ГЕНОВ C‐

FOS И ZIF/268 В МОЗГЕ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ВЫРАБОТКЕ УСЛОВНОГО

РЕФЛЕКСА ЗАМИРАНИЯ

Сухоруков ГригорийШарф Леа

НИИ Нормальной физиологии им. П.К.Анохина, РАМН

Руководители:Иванова А.А.

Ивашкина О.И.

Увеличение уровня мРНК с-fos и zif/268 в гиппокампе крыс после одной сессии обучения в пространственной версии водного лабиринта Морриса (Guzowski et al., 2001)

Экспрессия белка zif/268 в дорзальном гиппокампе крыс после обучения условно-рефлекторному замиранию на звуковой стимул (Lonergan et al., 2010)

Временная динамика индукции и спада уровня мРНК и белка с-fos и zif/268 в клетках первичной зрительной коры крыс (Zangenehpour, Chaudhuri, 2002)

Нейроанатомический субстрат условно-рефлекторного замирания:

Боль (БС)Контекст (УС)

Гиппокамп

Миндалина Гипоталамус

ТаламусКора

СА1

Зубчатая фасция

Цель работы:Исследование временной динамики экспрессии генов

транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа мыши после однократного сеанса обучения в модели условно-рефлекторного замирания

Задачи исследования:1) Провести количественный анализ экспрессии генов

транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа через разные временные интервалы после сеанса обучения условно-рефлекторному замиранию

2) Охарактеризовать динамику изменения уровня экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в течение 1 суток после обучения

3) Определить минимальный временной интервал после воздействия, за который уровень экспрессии каждого из исследованных генов достигает максимального значения

Методика:

t, часы0ПК 0,50,25 1,51 432 6 24ПК = пассивный контроль (отсутствие обучения)

Иммуногистохимическое выявление белковых

продуктов ранних генов c-fos и zif/268

(время до извлечения

мозга)

СА1

Зубчатая фасция

Выработка условного рефлекса замирания:

обследование камеры

ЭКР (1 мА)

30 с2 с2 мин

Результаты: экспрессия Zif/268 в поле СА1 гиппокампа 

#

# - p=0,09; критерий Манна-Уитни

n=3 n=3 n=3 n=3 n=3 n=3n=5 n=5 n=5 n=5n=4

Результаты: экспрессия Zif/268 в зубчатой фасции гиппокампа

n=3 n=3 n=3 n=3 n=3 n=3n=5 n=5 n=5 n=5n=4

Результаты: экспрессия c-Fos в поле СА1 гиппокампа 

**

* - p<0,05; критерий Манна-Уитни

n=7 n=4 n=4 n=5n=3

n=3n=4 n=3 n=3 n=4n=4

Результаты: экспрессия c-Fos в зубчатой фасции гиппокампа

*

* - p<0,05; критерий Манна-Уитни

n=7 n=4 n=4 n=5 n=3 n=3n=4 n=3 n=3 n=4n=4

Выявлены отличия во временной динамике экспрессии транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268: экспрессия Zif/268 раньше достигает максимального уровня, чем экспрессия с-Fos

Характер временной динамики экспрессии обоих ранних генов различается в двух исследованных зонах гиппокампа: в поле СА1 повышенный уровень экспрессии сохраняется в течение длительного времени; при этом в зубчатой фасции гиппокампа происходит быстрое кратковременное увеличение интенсивности экспрессии, и затем - ее быстрое снижение

Выводы:

Иммуногистохимия