一、实验目的一、实验目的 学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法 。二、实验原理二、实验原理（ 1 ）鉴定实验设计的理念： 某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合物，产生 特定的颜色反应。（ 2 ）基本原理 ①可溶性还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀（水浴） ②蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应 ③脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒 （脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅳ染液→红色小颗粒）

（显微镜）

三、实验材料用具三、实验材料用具1 、实验材料 : 苹果、花生种子、鸡蛋蛋白

2 、实验仪器：水浴锅 , 双面刀片 , 试管 , 试管架 , 试管夹 , 烧杯 , 小量筒 , 滴管 , 水浴锅，玻璃漏斗 , 研钵 , 石英砂 , 纱布 , 培养皿，载玻片 , 盖玻片 , 吸水纸 , 显微镜

3 、实验试剂：

斐林试剂 甲液 :0.1g/mL 的 NaOH溶液，乙液 : 0.05g/mL 的CuSO4 溶液 )

双缩脲试剂 A 液 :0.1g/mL 的 NaOH溶液 , B 液 : 0.01g/mL 的CuSO4 溶液

苏丹Ⅲ染液酒精溶液 体积分数为 50%

蒸馏水

选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织 ( 排除色素 对显色的干扰，苹果、梨最好）

1.1. 可溶性还原糖的鉴定 可溶性还原糖的鉴定

制备组织样液：制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）样液

显色反应

现象：

水浴2min

2mL斐林试剂

2mL组织样液

①斐林试剂必须现配现用，甲液和乙液（ 1:1）混合后再使用。②不能在量筒中直接制备斐林试剂。③水浴加热时试管底部不要碰到水浴锅底部，试管口不要向着有人的地方。

2.2. 蛋白质的鉴定 蛋白质的鉴定 选材 : 鸡蛋蛋清稀释液（或黄豆组织样

液）取一个鸡蛋 →敲破一小块蛋壳→吸取 0.5mL蛋清→加入 5mL蒸馏水→搅拌均匀

显色反应

现象：

制备组织样液 :

( 创设碱性条件 ) ( 提供 Cu2+) 2mL组织样液

2mL双缩脲A 液

3-4滴双缩脲B 液

在加双缩脲试剂时，先加 A 液，后加 B 液

3.3. 脂肪的鉴定 脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４ h ），去皮，将子叶削成薄片

制片：

① 选取最薄的薄片移至载玻片中央 ② 在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液 2 － 3 滴，染色２－３

min③ 滴加体积分数为 50%的酒精溶液 1—2滴， 1-2min洗去浮色

④ 吸去余液，滴 1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察

现象：

①注意花生子叶徒手切片方法（书本 17页右下角）。②染色后一定要用 50%的酒精溶液洗去浮色，染色和 洗浮色时间不宜过长。③注意显微镜的使用。

苹果

1.可溶性还原糖的鉴定 研磨

匀浆过滤

样液水浴2min 观察

2.蛋白质的鉴定 鸡蛋蛋清稀释液 2mL

双缩脲试剂 A 液2mL

摇匀 双缩脲试剂B 液 3~4滴观察 观察

3.脂肪的鉴定 花生种子 去皮 子叶 切片 取最薄片于

载玻片中央

苏丹Ⅲ染液2~3滴染色

2~3min

50%的酒精溶液 1—2滴

洗去浮色

1~2min

吸去余液，滴1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片

临时装片 显微镜观察

样液2mL

+

刚配制的斐林试剂 2mL

（甲液：乙液 =1:1）

斐林试剂与双缩脲试剂的比较：

试剂组成

检验结果

试剂用法

检测对象

双缩脲试剂斐林试剂

还原性糖 蛋白质

甲液 :0.1g/mLNaOH乙液 :0.05g/mLCuSO4

A 液 :0.1g/mLNaOHB 液 :0.01g/mLCuSO4甲液与乙液先混再用，

且现配现用，需加热 先加 A 液，再加 B 液，不需加热

生成砖红色沉淀 溶液变成紫色